ensayo de ATPasa

El ensayo de ATPasa es un ensayo de membrana que mide indirectamente la actividad de los transportadores de eflujo . Los transportadores de casete de unión a ATP o transportadores de eflujo median el transporte de sustratos a través de las membranas celulares en contra de un gradiente de concentración . La hidrólisis del ATP está estrechamente ligada a la translocación del sustrato, ya que la energía para dicha translocación se deriva de la hidrólisis del ATP . La hidrólisis del ATP produce fosfato inorgánico (Pi), que puede medirse mediante una sencilla reacción colorimétrica. La cantidad de Pi liberado es directamente proporcional a la actividad del transportador. ^{[ 1 ]}

El ensayo de ATPasa está diseñado para indicar la naturaleza de la interacción entre el compuesto y el transportador . Los ensayos de ATPasa se utilizan en dos modos diferentes: activación de la ATPasa e inhibición de la ATPasa. Los sustratos transportados aumentan la actividad basal de la ATPasa, mientras que los inhibidores o los compuestos de transporte lento inhiben la actividad basal de la ATPasa y/o la actividad de la ATPasa medida en presencia de un agente estimulante. Por lo tanto, los ensayos de ATPasa pueden determinar si un compuesto actúa como sustrato y/o inhibidor del transportador. ^{[ 2 ] [ 3 ]}

Las mutaciones en el dominio ATPasa provocan la pérdida de la función de transporte. La actividad del transportador de múltiples fármacos en células resistentes a los medicamentos se asocia con un rápido agotamiento del ATP celular cuando se inhibe la síntesis de ATP.