Las nucleasas quiméricas son un ejemplo de proteínas modificadas genéticamente que deben comprender un dominio de unión al ADN para proporcionar especificidad de secuencia y un dominio nucleasa para la escisión del ADN .
dominios de unión al ADN
Los dominios de unión al ADN, incluidos los motivos básicos hélice-bucle-hélice , dedo de zinc , hélice-giro-hélice y cremallera de leucina , se han utilizado en la construcción de nucleasas específicas de secuencia. De estos, se ha sugerido que los dedos de zinc son los más importantes debido a su modularidad, que permite la construcción de un dominio de unión al ADN a medida. [ 1 ]
dominio de nucleasa
El dominio nucleasa es responsable de la escisión física de las hebras de ADN y puede introducir roturas de cadena simple o doble. FokI es un ejemplo de endonucleasa específica de secuencia cuyo dominio nucleasa no específico introduce roturas de cadena doble y se ha utilizado en diversos experimentos, incluyendo la identificación de sitios de unión de alta y baja afinidad de factores de transcripción in vitro , el estudio del reclutamiento de factores a sitios promotores in vivo mediante la identificación de la posición de proteínas con un ensayo de cola de nucleasa y el estudio de proteínas específicas para la interacción con el ADN en la conformación Z-ADN (Durai et al., 2005 y referencias allí citadas).
Véase también
Referencias
- ↑ Durai S, Mani M, Kandavelou K, Wu J, Porteus MH, Chandrasegaran S (2005). "Nucleasas de dedos de zinc: tijeras moleculares diseñadas a medida para la ingeniería del genoma de células vegetales y de mamíferos" . Nucleic Acids Res . 33 (18): 5978–90 . doi : 10.1093/nar/ gki912 . PMC 1270952. PMID 16251401 .
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