Prueba de fijación del complemento

La prueba de fijación del complemento es una prueba inmunológica que permite detectar la presencia de anticuerpos o antígenos específicos en el suero de un paciente , según se produzca o no la fijación del complemento . Se utilizaba ampliamente para diagnosticar infecciones, sobre todo causadas por microorganismos difíciles de detectar mediante cultivos, y en enfermedades reumáticas. Sin embargo, en los laboratorios de diagnóstico clínico ha sido reemplazada en gran medida por otros métodos serológicos, como ELISA , y por métodos de detección de patógenos basados ​​en ADN, en particular la PCR .

El sistema del complemento es un sistema de proteínas séricas que reaccionan con los complejos antígeno-anticuerpo. Si esta reacción ocurre en la superficie celular, dará lugar a la formación de poros transmembrana y, por lo tanto, a la destrucción de la célula. Los pasos básicos de una prueba de fijación del complemento son los siguientes: ^{[ 1 ]}

1. El suero se separa del paciente.
2. Los pacientes presentan, de forma natural, diferentes niveles de proteínas del complemento en su suero. Para neutralizar cualquier efecto que esto pudiera tener en la prueba, las proteínas del complemento presentes en el suero del paciente deben ser destruidas y reemplazadas por una cantidad conocida de proteínas del complemento estandarizadas.
   1. El suero se calienta de tal manera que todas las proteínas del complemento —pero ninguno de los anticuerpos— que contiene se destruyen. (Esto es posible porque las proteínas del complemento son mucho más susceptibles a la destrucción por calor que los anticuerpos).
   2. Se añade al suero una cantidad conocida de proteínas del complemento estándar. (Estas proteínas se obtienen frecuentemente del suero de cobaya).
3. El antígeno de interés se añade al suero.
4. Se añaden al suero eritrocitos de oveja ( sRBC ) ^{[ 2 ]} previamente unidos a anticuerpos anti- sRBC . La prueba se considera negativa si la solución se torna rosada (es decir, hay hemólisis ) en este punto y positiva en caso contrario.

Si el suero del paciente contiene anticuerpos contra el antígeno de interés, estos se unirán al antígeno en el paso 3 para formar complejos antígeno-anticuerpo. Las proteínas del complemento reaccionarán con estos complejos y se agotarán. Por lo tanto, cuando se añadan los complejos sRBC -anticuerpo en el paso 4, no quedará complemento en el suero. Sin embargo, si no hay anticuerpos contra el antígeno de interés, el complemento no se agotará y reaccionará con los complejos sRBC -anticuerpo añadidos en el paso 4, lisando los sRBC y derramando su contenido en la solución, lo que la vuelve rosa. ^{[ 1 ]}

Si bien la detección de anticuerpos es el formato de prueba más común, también es posible detectar la presencia de antígeno. En este caso, el suero del paciente se complementa con anticuerpos específicos para inducir la formación de complejos; la adición de complemento y eritrocitos descompuestos indicadores se realiza como se describió anteriormente.

La prueba se puede hacer cuantitativa estableciendo una serie de diluciones del suero del paciente y determinando el factor de dilución más alto que aún producirá una prueba de CF positiva. Este factor de dilución corresponde al título .

• Pruebas de fijación del complemento en los encabezamientos de materias médicas (MeSH) de la Biblioteca Nacional de Medicina de EE. UU.