La criomicroscopía es una técnica en la que un microscopio se equipa de tal manera que el objeto que se pretende inspeccionar se puede enfriar por debajo de la temperatura ambiente. Técnicamente, la criomicroscopía implica la compatibilidad entre un criostato y un microscopio. La mayoría de los criostatos utilizan un fluido criogénico, como helio líquido o nitrógeno líquido . Existen dos motivaciones comunes para realizar una criomicroscopía. Una es mejorar el proceso de la microscopía estándar. La microscopía electrónica criogénica, por ejemplo, permite el estudio de proteínas con un daño por radiación limitado. En este caso, la estructura de la proteína puede no cambiar con la temperatura, pero el entorno criogénico permite mejorar el proceso de microscopía electrónica. Otra motivación para realizar una criomicroscopía es aplicar la microscopía a un fenómeno de baja temperatura. La microscopía de efecto túnel de barrido en un entorno criogénico, por ejemplo, permite el estudio de la superconductividad , que no existe a temperatura ambiente.
Historia
Aunque los microscopios ópticos existen desde hace siglos, la criomicroscopía es una metodología moderna. En la década de 1950, se estudiaron cristales de hielo instalando un microscopio electrónico dentro de un iglú . [ 1 ] Hacia 1980, la adaptación del microscopio electrónico, el vacío y el criostato condujo a la concepción de la criomicroscopía moderna. Este desarrollo de la criomicroscopía electrónica llevó a que Jacques Dubochet , Joachim Frank y Richard Henderson recibieran el Premio Nobel de Química de 2017. [ 2 ]
Microscopía electrónica criogénica
Los procesos de microscopía electrónica de barrido y de transmisión realizados en condiciones criogénicas se conocen como cryoSEM y cryoTEM, respectivamente.
microscopía óptica criogénica
Los entornos criogénicos se utilizan en combinación con diferentes tipos de técnicas de microscopía óptica . Los entornos criogénicos también minimizan el blanqueamiento, lo que, a su vez, mejora el contraste de la técnica microscópica. El crecimiento de cristales de hielo artificiales se estudia, por ejemplo, mediante microscopía óptica. [ 3 ] Con la microscopía de luz polarizada , el efecto de birrefringencia de, por ejemplo, estructuras de dominio ortorrómbico, se puede observar a temperaturas criogénicas. [ 4 ] En el campo de la biología, la microscopía de fluorescencia ha permitido una resolución más allá del límite de difracción . [ 5 ] El Premio Nobel de Química de 2014 fue otorgado conjuntamente a Eric Betzig , Stefan Hell y William E. Moerner por el desarrollo de la microscopía de fluorescencia de superresolución. [ 6 ]
Referencias
- ↑ Kumai, Motoi (1951-06-01). "Estudio con microscopio electrónico de núcleos de cristales de nieve" . Journal of the Atmospheric Sciences . 8 (3 ) : 151– 156. doi : 10.1175/1520-0469(1951)008 < 0151:EMSOSC > 2.0.CO ; 2. ISSN 1520-0469 .
- ↑ Cressey, Daniel; Callaway, Ewen (1 de octubre de 2017). "La criomicroscopía electrónica gana el Nobel de Química" . Nature . 550 ( 7675): 167. doi : 10.1038/nature.2017.22738 . ISSN 1476-4687 . PMID 29022937. S2CID 205252059 .
- ↑ Sazaki, Gen; Zepeda, Salvador; Nakatsubo, Shunichi; Yokoyama, Etsuro; Furukawa, Yoshinori (2010-11-16). "Pasos elementales en la superficie de cristales de hielo visualizados mediante microscopía óptica avanzada" . Actas de la Academia Nacional de Ciencias . 107 (46): 19702– 19707. doi : 10.1073/pnas.1008866107 . ISSN 0027-8424 . PMC 2993344. PMID 20974928 .
- ↑ Katakura, I.; Tokunaga, M.; Matsuo, A.; Kawaguchi, K.; Kindo, K.; Hitomi, M.; Akahoshi, D.; Kuwahara, H. (2010-04-12). "Desarrollo de un sistema de imágenes polarizadas de alta velocidad para operar en un campo magnético pulsado alto" . Review of Scientific Instruments . 81 (4): 043701. doi : 10.1063/1.3359954 . ISSN 0034-6748 . PMID 20441339 .
- ^ Hulleman, Christiaan N.; Huisman, Maximiliaan; Moerland, Robert J.; Grünwald, David; Stallinga, Sjoerd; Rieger, Bernd (2018). "Control de polarización de fluorescencia para el encendido y apagado de moléculas individuales a temperaturas criogénicas" . Pequeños métodos . 2 (9) 1700323. doi : 10.1002/smtd.201700323 . ISSN 2366-9608 . PMC 6592266 . PMID 31240238 .
- ↑ Möckl, Leonhard; Lamb, Don C.; Bräuchle, Christoph (15 de diciembre de 2014). "Microscopía de fluorescencia superresuelta: Premio Nobel de Química 2014 para Eric Betzig, Stefan Hell y William E. Moerner" . Angewandte Chemie International Edition . 53 (51): 13972– 13977. doi : 10.1002/anie.201410265 . PMID 25371081 .
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