Ensayo de secreción

El ensayo de secreción es un proceso utilizado en biología celular para identificar células que secretan una proteína específica (generalmente una citocina ). Fue desarrollado por primera vez por Manz et al. en 1995.

Generalmente, una célula que secreta la proteína de interés se aísla mediante un complejo anticuerpo-anticuerpo que la recubre y es capaz de capturar las moléculas secretadas. Posteriormente, la célula se detecta con otro anticuerpo marcado con un fluorocromo y se extrae mediante un proceso denominado citometría de flujo (FACS). El método FACS es muy similar al formato de inmunoensayo enzimático ( ELISA ), con la diferencia de que las células encapsuladas permanecen intactas. Esto resulta ventajoso, ya que las células siguen vivas tras la extracción.

Los avances recientes permiten ahora extraer las células secretoras mediante un sistema de separación magnética o mediante un citómetro de flujo .

Existen diversas aplicaciones comerciales para el ensayo de secreción. Un ejemplo de ello es la tecnología Gel Microdrop (GMD), desarrollada por One Cell Systems . One Cell afirma que GMD suele recuperar un mayor número de células secretoras viables que otros métodos, al tiempo que descarta las células que no secretan la proteína deseada.

• Manz, Rudolf; et  al. (marzo de 1995). "Análisis y clasificación de células vivas según moléculas secretadas, reubicadas en una matriz de afinidad de superficie celular" . Actas de la Academia Nacional de Ciencias . 92 (6): 1921– 1925. Bibcode : 1995PNAS...92.1921M . doi : 10.1073/pnas.92.6.1921 . PMC 42394. PMID 7892200 .  

• Turcanu, Victor; Williams, Neil A. (2001). "Identificación y aislamiento celular en función de la secreción de citocinas: una herramienta novedosa para investigar las respuestas inmunitarias". Nature Medicine . 7 (3): 373– 376. doi : 10.1038/85533 . PMID 11231640. S2CID 837840 .  

• One Cell Systems - Tecnología de ensayo de secreción en microgotas de gel (GMD).