Hispanopedia Wiki
Articulo de referencia

Citocentrífuga

Ejemplo de una citocentrífuga Una citocentrífuga , a veces denominada citocentrifugadora , [ 1 ] es una centrífuga especializada que se utiliza para concentrar células de muestr...

Hispanopedia WikiContenido en espanolLectura gratuita

Ejemplo de una citocentrífuga

Una citocentrífuga , a veces denominada citocentrifugadora , [ 1 ] es una centrífuga especializada que se utiliza para concentrar células de muestras líquidas en un portaobjetos de microscopio para su posterior tinción y examen. [ 2 ] Las citocentrífugas se utilizan en diversas áreas del laboratorio clínico , como citopatología , hematología y microbiología , así como en investigación biológica. Este método puede aplicarse a muchos tipos diferentes de muestras, incluyendo aspirados con aguja fina , líquido cefalorraquídeo , líquido seroso y sinovial , y orina . [ 3 ]

Procedimiento

Para preparar frotis de citocentrifugación, se coloca un embudo en la parte frontal de un portaobjetos. La superficie del embudo en contacto con el portaobjetos se recubre con papel de filtro para absorber el exceso de líquido. Se colocan unas gotas de líquido en el embudo. El embudo se introduce en la citocentrifugadora, que opera a baja fuerza (600–800 xg) para preservar la estructura celular. [ 4 ] La fuerza centrífuga empuja el líquido a través de la abertura del embudo y concentra las células en una pequeña área del portaobjetos. El proceso de centrifugación concentra las células aproximadamente veinte veces [ 5 ] y crea una monocapa de una sola célula de espesor, lo que permite evaluar la morfología celular. El portaobjetos se puede fijar y teñir. [ 6 ] [ 7 ]

Aplicaciones

Células de linfoma en líquido cefalorraquídeo, portaobjetos de citocentrifugación
Células de linfoma en el líquido cefalorraquídeo

Algunas aplicaciones de las citocentrifugadoras incluyen:

Limitaciones

El proceso de citocentrifugación puede provocar que las células aparezcan distorsionadas. Las células situadas en el centro del frotis pueden verse comprimidas en comparación con las de la periferia. Los núcleos celulares pueden desarrollar hendiduras, lóbulos o agujeros artificiales [ 4 ] , y el citoplasma puede aparecer vacuolado o desarrollar proyecciones irregulares. Los gránulos citoplasmáticos pueden desplazarse hacia la periferia de la célula. Si el recuento celular es elevado, las células pueden distorsionarse debido al hacinamiento; por lo tanto, las muestras con recuentos celulares altos se diluyen antes de la preparación del frotis [ 10 ] .

Historia

El examen de células en fluidos corporales se realizaba históricamente mediante un hemocitómetro , una cámara diseñada para contar células microscópicamente. [ 11 ] Esta técnica se veía limitada por la escasa discriminación entre los tipos de células (las células solo podían clasificarse como mononucleares o polimorfonucleares) y el bajo número de células presentes en los fluidos corporales sin concentrar. Además, esta técnica no producía un registro permanente de la muestra. [ 10 ] En un artículo de 1966, Watson P. describió la primera citocentrífuga, denominándola "un aparato para concentrar células en suspensión sobre un portaobjetos de microscopio". [ 12 ] El dispositivo se comercializó en la década de 1970 y en 1983 fue patentado por Shandon (ahora Thermo Scientific ). En 2012, existían numerosas marcas de citocentrífugas en el mercado. [ 8 ]

Referencias

  1. ↑ McManus L, Mitchell R (1 de agosto de 2014). Patobiología de las enfermedades humanas: una enciclopedia dinámica de los mecanismos de las enfermedades . Elsevier Science. pág.  3365. ISBN 978-0-12-386457-4.
  2. ↑ Turgeon ML (23 de marzo de 2015). Linné & Ringsrud's Clinical Laboratory Science: Concepts, Procedures, and Clinical Applications (7.ª ed.). Elsevier Mosby. pág. 146. ISBN   978-0-323-22545-8.
  3. 1 2 Stokes BO (2004). "Principios de citocentrifugación" . Medicina de laboratorio . 35 (7): 434– 437. doi : 10.1309/FTT59GWKDWH69FB0 . ISSN 0007-5027 . 
  4. 1 2 3 Brunzel NA (5 de noviembre de 2016). «Capítulo 17: Análisis de fluidos corporales» . Fundamentos del análisis de orina y fluidos corporales . Elsevier Health Sciences. págs. 356–358 . ISBN  978-0-323-39636-3.
  5. ↑ Galagan KA (2006). Atlas a color de fluidos corporales: una guía de campo ilustrada basada en pruebas de competencia . Colegio de Patólogos Americanos . págs. 13-14 . ISBN  978-0-930304-91-1.
  6. ↑ Shambayati B (17 de febrero de 2011). Citopatología . OUP Oxford. pág. 24. ISBN  978-0-19-953392-3.
  7. ↑ Keohane EM, Smith L, Walenga JM (19 de febrero de 2015). Hematología de Rodak: Principios clínicos y aplicaciones . Elsevier Health Sciences. págs. 270–271 . ISBN  978-0-323-32716-9.
  8. 1 2 Gill G (19 de octubre de 2012). «Capítulo 6: Citocentrifugación» . Citopreparación: Principios y práctica . Springer Science & Business Media. págs. 73–84 . ISBN  978-1-4614-4932-4.
  9. ↑ Mahon CR, Lehman DC, Manuselis G (25 de marzo de 2014). Libro de texto de microbiología diagnóstica - Libro electrónico . Elsevier Health Sciences. pág. 129. ISBN  978-0-323-29262-7.
  10. 1 2 Harmening D (2009). «Capítulo 30: Examen de fluidos corporales: análisis cualitativo, cuantitativo y morfológico». Hematología clínica y fundamentos de la hemostasia (5.ª ed.). FA Davis Company. págs. 720–757 . ISBN   978-0-8036-1732-2.
  11. ↑ Vembadi A, Menachery A, Qasaimeh MA (2019). "Citometría celular: revisión y perspectiva sobre los avances biotecnológicos" . Frontiers in Bioengineering and Biotechnology . 7 : 147. doi : 10.3389/fbioe.2019.00147 . PMC 6591278. PMID 31275933 .  
  12. ↑ Watson P (septiembre de 1966). "Una centrífuga de portaobjetos: un aparato para concentrar células en suspensión sobre un portaobjetos de microscopio". The Journal of Laboratory and Clinical Medicine . 68 (3): 494– 501. PMID 5922759 .