Articulo de referencia

Mapeo de eliminación

En genética , y especialmente en ingeniería genética , el mapeo de deleción es una técnica utilizada para descubrir los sitios de mutación dentro de un gen . El principio del ma...

En genética , y especialmente en ingeniería genética , el mapeo de deleción es una técnica utilizada para descubrir los sitios de mutación dentro de un gen .

El principio del mapeo de deleciones implica cruzar una cepa que tiene una mutación puntual en un gen con múltiples cepas que tienen cada una una deleción en una región diferente del mismo gen. Siempre que se produzca una recombinación entre las dos cepas para producir un gen de tipo salvaje (+) (independientemente de la frecuencia), la mutación puntual no puede estar dentro de la región de la deleción. Si la recombinación no puede producir ningún gen de tipo salvaje, entonces es razonable concluir que la mutación puntual y la deleción se encuentran dentro del mismo tramo de ADN .

Este ejemplo debería demostrar cómo funciona el principio:

Supongamos que tienes un gen X , que en forma de tipo salvaje (+) se puede mostrar linealmente de la siguiente manera:

5'-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------3' gen X, +

Supongamos que una cepa de organismos tiene una mutación puntual en el gen (ahora llamado gen X, para indicar que ya no es de tipo salvaje):

5'-----------------------------------------------------X--------------------------------------------------------------3' gen X, –

Ahora supongamos que tienes dos cepas de organismos, cada una con deleciones en el gen X en diferentes sitios, llamados del-1 y del-2 , respectivamente (la línea de puntos indica el sitio de la deleción):

5'-------------------(................................ .................)------------------------------- -----------------3' del-1

5'------------------------------------------------ ------------(.................................... .......)---------3' del-2

Dado que la mutación puntual se encuentra dentro de la deleción de del-1, no habrá recombinantes de tipo salvaje (+) entre el mutante puntual y el mutante del-1. Sin embargo, en un cruce entre el mutante puntual y el mutante del-2, podría producirse un recombinante de tipo salvaje (+) exitoso.

En la recombinación genética, si un alelo mutante en el donante se encuentra dentro de la secuencia correspondiente a la región eliminada en el receptor, entonces no se obtendrán recombinantes (+) (como en el cruce con del-1). Para reparar una deleción por recombinación, el donante debe tener secuencia de ADN de tipo salvaje en la región correspondiente al ADN eliminado en el receptor (como en el cruce contra del-2). En otras palabras, existe una posibilidad factible de recombinación entre el mutante puntual y del-2 en la que se podría obtener una longitud de ADN que no contuviera ni la mutación puntual ni la deleción, lo que indica que las mutaciones en estas dos cepas no pueden estar en la misma región.

Tenga en cuenta que no todos los cruces entre el mutante puntual y del-2 producirán recombinantes (+); en este caso, solo los eventos de cruce que ocurran entre el mutante puntual y el extremo 5' de la deleción heredarían la secuencia de tipo salvaje.


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