Articulo de referencia

Elución

Principio de elución de la cromatografía en columna En química analítica y orgánica , la elución es el proceso de extraer un material de otro mediante lavado con un disolvente: ...

Principio de elución de la cromatografía en columna

En química analítica y orgánica , la elución es el proceso de extraer un material de otro mediante lavado con un disolvente: lavado de resinas de intercambio iónico cargadas para eliminar los iones capturados , o elución de proteínas u otros biopolímeros de una columna de electroforesis o cromatografía .

En un experimento de cromatografía líquida , por ejemplo, un analito generalmente se adsorbe ("se une") a un adsorbente en una columna cromatográfica. El adsorbente, una fase sólida llamada "fase estacionaria", es un polvo recubierto sobre un soporte sólido. Según su composición, el adsorbente puede tener diferentes afinidades para "retener" otras moléculas, formando una película delgada en la superficie de sus partículas. La elución es el proceso de separar los analitos del adsorbente haciendo pasar un disolvente, llamado eluyente , a través del complejo adsorbente-analito. A medida que las moléculas del disolvente "eluyen" o se desplazan a través de la columna cromatográfica, pueden pasar junto al complejo adsorbente-analito o desplazar el analito uniéndose al adsorbente en su lugar. Una vez que las moléculas del disolvente desplazan el analito, este puede ser extraído de la columna para su análisis. Por este motivo, cuando la fase móvil, denominada eluido , sale de la columna, normalmente fluye hacia un detector o es recogida por un colector de fracciones para su análisis composicional.

La velocidad de elución depende de muchos factores, como el eluyente, la fase estacionaria, el analito, el pH, la temperatura, etc. Predecir y controlar las velocidades de elución de los analitos es un aspecto clave de los métodos de cromatografía en columna y electroforesis en columna.

Definiciones

El eluyente es la porción " portadora " de la fase móvil. Transporta los analitos a través del cromatógrafo . En cromatografía líquida , el eluyente es el disolvente líquido; en cromatografía de gases , es el gas portador. [ 1 ]

El eluido contiene el material analito que emerge del cromatógrafo . Incluye específicamente tanto los analitos como los solutos que coeluyen al pasar por la columna, mientras que el eluyente es solo el portador.

El tiempo de elución de un soluto es el tiempo que transcurre entre el inicio de la separación (el momento en que el soluto entra en la columna) y el momento en que el soluto eluye.

El volumen de elución es el volumen de eluyente necesario para que se produzca la elución. Este volumen puede proporcionar información suficiente para identificar solutos en condiciones estándar para una mezcla conocida de solutos en una técnica determinada. Por ejemplo, una mezcla de aminoácidos puede separarse mediante cromatografía de intercambio iónico . Bajo un conjunto específico de condiciones, los aminoácidos eluirán en el mismo orden y con el mismo volumen de elución.

Serie eluotrópica

Una serie eluyente es una lista de disolventes ordenados según su poder de elución con respecto a un adsorbente y un analito fijos. El poder de elución de un disolvente mide principalmente su capacidad para separar el analito del adsorbente al que está unido. Esto suele ocurrir cuando el propio eluyente se adsorbe sobre la fase estacionaria, desplazando el analito. Estas series son útiles para determinar los disolventes necesarios para la cromatografía de compuestos químicos.

En general, cuando el adsorbente es polar (como en la cromatografía líquida de fase normal), los disolventes no polares como el n-hexano tienen un bajo poder de elución, y los disolventes polares como el etanol , el metanol o el agua tienen un alto poder de elución.

elución de anticuerpos

La elución de anticuerpos es el proceso de eliminar los anticuerpos que están unidos a sus dianas, como la superficie de los glóbulos rojos . Las técnicas incluyen el uso de calor, un ciclo de congelación-descongelación, ultrasonido, ácidos o disolventes orgánicos. [ 2 ]

Véase también

Referencias

  1. "Libro de Oro de la IUPAC: eluyente" . Unión Internacional de Química Pura y Aplicada. doi : 10.1351/goldbook.E02040 . Consultado el 28 de septiembre de 2008 .{{cite journal}}: Para citar una revista se requiere |journal=( ayuda )
  2. George H. Roberts (2006). "Técnicas de elución en bancos de sangre" (PDF) . American Medical Technologists (AMT) . Archivado del original (PDF) el 11 de julio de 2019. Consultado el 22 de julio de 2020 .
  • Brown, Phillis (2001). Avances en cromatografía . CRC Press . pág.  36. ISBN 0-8247-0509-2.