tinción de Feulgen

La tinción de Feulgen es una técnica de tinción descubierta por Robert Feulgen y utilizada en histología para identificar material cromosómico o ADN en muestras celulares. Produce una tinción oscura. Depende de la hidrólisis ácida del ADN, por lo que deben evitarse los agentes fijadores que utilizan ácidos fuertes . ^{[ 1 ]}

La muestra se somete a ácido clorhídrico caliente (60 °C) y luego al reactivo de Schiff . ^{[ 1 ]} Anteriormente, se realizaba un enjuague con sulfito , pero ahora se considera innecesario. Opcionalmente, la muestra puede teñirse con verde claro SF amarillento . Finalmente, se deshidrata con etanol , se aclara con xileno y se monta en un medio resinoso .

El ADN debe teñirse de rojo. ^{[ 1 ]} El fondo, si se contratiñe, es verde. Esta reacción también es específica del ADN, ya que el ARN se caracteriza por un azúcar ribosa, en lugar de desoxirribosa, lo que impide la hidrólisis ácida. Esto dificulta el desprendimiento de purinas y, por lo tanto, no permite la tinción. ^{[ 1 ]}

La reacción de Feulgen es una técnica semicuantitativa. Si los únicos aldehídos que quedan en la célula son los producidos por la hidrólisis del ADN, entonces la técnica es cuantitativa para el ADN. Es posible utilizar un instrumento conocido como microdensitómetro o microespectrofotómetro para medir la intensidad de la reacción rosada de Feulgen en un orgánulo determinado . Mediante este procedimiento, se determinó tempranamente que las células en interfase estaban compuestas por dos poblaciones: aquellas con ADN diploide y aquellas con ADN tetraploide (dos genomas completos). Los núcleos parecían idénticos, pero uno contenía el doble de ADN. Esto dio lugar a la división del período de interfase del ciclo celular en las fases G1, S y G2, según la síntesis de ese ADN adicional. ^{[ 2 ]}