Las pruebas de flujo continuo o inmunoensayos [ 1 ] son un tipo de ensayo diagnóstico que permite detectar la presencia de un biomarcador , generalmente un anticuerpo específico , en una muestra como la sangre. Son un tipo de prueba de diagnóstico rápido , diseñada para ser utilizada por un profesional de la salud en el contacto con el paciente. Estas pruebas suelen permitir la detección rápida de un biomarcador específico sin necesidad de equipos de laboratorio ni capacitación especializada; esto facilita el diagnóstico y permite iniciar la acción terapéutica con mayor rapidez. Las pruebas de flujo continuo comenzaron a desarrollarse a principios de la década de 1980 y fueron el primer tipo de inmunotira en desarrollarse, aunque posteriormente las pruebas de flujo lateral se convirtieron en el dispositivo de inmunotira dominante para el diagnóstico rápido. [ 2 ]
Historia
La primera prueba de flujo continuo se desarrolló en 1985 para detectar la presencia de gonadotropina coriónica humana beta en la orina. [ 2 ] [ 3 ]
Principio de las pruebas de flujo continuo
Los ensayos de flujo continuo son, por principio, ensayos de unión. [ 3 ] En la práctica, se aplican principalmente para detectar la interacción de un anticuerpo , como el de una muestra de sangre del sujeto de prueba, con antígenos inmovilizados , lo que da lugar a la formación de un complejo antígeno-anticuerpo. Sin embargo, otros tipos de ensayos de captura son técnicamente factibles, incluidos los ensayos de captura de moléculas pequeñas o las pruebas de antígenos. [ 3 ] Los ensayos de flujo continuo para la detección de micotoxinas , basados en ELISA , están disponibles desde la década de 1980 y pueden utilizarse en análisis de campo. [ 4 ]
Las pruebas de flujo continuo suelen presentarse en forma de casetes divididos en cuatro partes: una carcasa superior, un panel de membrana reactiva, un panel absorbente y una carcasa inferior. [ 5 ] Para realizar una prueba, se aplica una muestra diluida al panel de membrana reactiva y esta fluye a través de la almohadilla absorbente, donde el analito objetivo queda retenido en la membrana. [ 5 ] [ 6 ] A continuación, se lava la membrana para eliminar las moléculas no objetivo no unidas, se vuelve a lavar con una solución que contiene un reactivo de señal y se lava de nuevo para eliminar el reactivo de señal no unido. [ 5 ] [ 6 ] Si el analito estaba presente en la muestra original, al final de este proceso debería estar unido a la membrana, con el reactivo de señal unido a ella, lo que revela (generalmente de forma visual) la presencia del analito en la membrana. [ 5 ] [ 6 ]
Ventajas y desventajas
Las pruebas de flujo continuo se pueden realizar más rápidamente que las pruebas de flujo lateral. [ 5 ] Presentan buena sensibilidad a los anticuerpos, pero su detección de antígenos es generalmente menos sensible que las pruebas de flujo lateral. [ 5 ]
Referencias
- ↑ Bernard B (2003). "Pruebas rápidas en el punto de atención para anticuerpos contra el VIH" . J Lab Med . 27 : 288–295 . Archivado del original el 3 de mayo de 2012. Recuperado el 3 de julio de 2016 .
- 1 2 St John A, Price CP (agosto de 2014). "Tecnologías existentes y emergentes para pruebas en el punto de atención" . The Clinical Biochemist. Reviews / Australian Association of Clinical Biochemists . 35 (3): 155– 67. PMC 4204237. PMID 25336761 .
- 1 2 3 Valkirs GE, Barton R (septiembre de 1985). "Inmunoconcentración: un nuevo formato para inmunoensayos en fase sólida" . Química Clínica . 31 (9): 1427–31 . doi : 10.1093/clinchem/31.9.1427 . PMID 4028392 .
- ↑ Zheng MZ, Richard JL, Binder J (mayo de 2006). " Una revisión de métodos rápidos para el análisis de micotoxinas". Mycopathologia . 161 (5): 261– 73. doi : 10.1007/s11046-006-0215-6 . PMID 16649076. S2CID 6667768 .
- 1 2 3 4 5 6 "Pruebas de flujo, una descripción general" . PATH. Archivado del original el 16 de agosto de 2016. Recuperado el 4 de julio de 2016 .
- 1 2 3 "Flujo directo: cómo funciona" . PATH. Archivado del original el 19 de agosto de 2016. Recuperado el 4 de julio de 2016 .
- Pruebas médicas