Fluo-3

Fluo-3 es un indicador de fluorescencia de calcio intracelular (Ca ²⁺ ), desarrollado por Roger Y. Tsien . ^[1] Se utiliza para medir Ca ²⁺ dentro de células vivas en citometría de flujo y microscopía confocal de barrido láser utilizando excitación de luz visible (compatible con fuentes láser de argón que operan a 488 nm). Fluo-3 y derivados (Fluo-4, Fluo-5, etc.) también se han utilizado ampliamente con microscopía de excitación de dos fotones . Fluo-3 es un compuesto esencialmente no fluorescente, pero al unirse a Ca ²⁺ su fluorescencia aumenta bruscamente con un máximo de emisión a 525 nm adecuado para detectores utilizados convencionalmente diseñados para mediciones de isotiocianato de fluoresceína (FITC). Este gran cambio en la fluorescencia junto con un buen rendimiento de fotones proporciona un contraste muy alto que permitió la detección de eventos microscópicos de liberación de Ca ^{2+ dentro de las células llamados "} chispas de calcio ". ^[2] Mientras que las sales de fluo-3 no pueden penetrar en las células, la carga se puede lograr utilizando su derivado éster de acetoximetilo (AM). Una vez dentro de la célula, las esterasas inespecíficas escinden el éster y atrapan eficazmente el fluo-3. ^[3]

Como el calcio es un segundo mensajero clave dentro de las células, las propiedades específicas del fluo-3 permiten a los investigadores investigar la dinámica resuelta en el tiempo de la transducción de señales intracelulares en una amplia gama de células. ^{[4] [5]}