William French Anderson

Cuando Anderson comenzó su carrera, la síntesis de proteínas en bacterias era un tema central en la investigación de la biología molecular. Se propuso descubrir factores de iniciación de la síntesis de proteínas en mamíferos. Su primer gran logro, en 1970, fue el aislamiento, a partir de reticulocitos de conejo (glóbulos rojos inmaduros), de varios factores que iniciaban la síntesis de hemoglobina en los ribosomas de los reticulocitos . ^{[ 11 ]} Posteriormente se descubrió que estos factores también iniciaban la síntesis de proteínas en prácticamente todos los sistemas eucariotas .

Para aislar la molécula predicha " ARN mensajero", se necesitaba un sistema de síntesis de proteínas libre de células con ribosomas sin ARNm . Inicialmente, se desarrolló un sistema de síntesis de proteínas dependiente de ARNt libre de células a partir de ribosomas de reticulocitos de conejo, utilizando el ARNm endógeno presente en los ribosomas. ^{[ 12 ]} Se desarrolló un sistema análogo con ribosomas de reticulocitos humanos. ^{[ 13 ]}

Se desarrolló un procedimiento para eliminar el presunto ARNm de los ribosomas. Este lavado ribosomal de ribosomas de reticulocitos de conejo se incubó en un sistema libre de células y se produjo hemoglobina de conejo. El procedimiento para eliminar el ARNm endógeno de los ribosomas de reticulocitos de conejo se utilizó en ribosomas de reticulocitos humanos para obtener ARNm de globina humana. ^{[ 14 ]}

Los ribosomas de reticulocitos de conejo, previamente despojados de su envoltura, se programaron con ARNm aislado de reticulocitos humanos normales, incluyendo pacientes con talasemia y anemia falciforme. El sistema libre de células de ribosomas de conejo fue capaz de producir globina humana normal a partir de ARNm humano normal, globina falciforme a partir de ARNm de anemia falciforme y la anomalía de la cadena alfa/beta de la globina característica de la talasemia a partir de ARNm de talasemia. ^{[ 15 ] [ 16 ]}

Como primer paso para desarrollar un procedimiento de terapia génica humana, se modificaron las técnicas estándar de microinyección para permitir la inyección de plásmidos de ADN en el núcleo de células de mamíferos. ^{[ 17 ]} Se microinyectaron genes de globina humana en fibroblastos de ratón y en ovocitos de ratón, y se demostró que expresaban ARNm de globina humana. ^{[ 18 ] [ 19 ]}

La microinyección de unas pocas células no madre no era un procedimiento eficiente para un protocolo clínico. En 1984, Anderson publicó una importante revisión en Science en la que analizó las "Perspectivas de la terapia génica humana" ^{[ 20 ]} y concluyó que el enfoque más prometedor era utilizar vectores retrovirales como vehículo de administración. Inmediatamente estableció una estrecha colaboración a largo plazo con uno de los principales científicos de vectores retrovirales: Eli Gilboa, entonces en Princeton. Juntos desarrollaron vectores que podían transportar eficientemente un paquete genético a células de ratón o humanas en cultivo. ^{[ 21 ] [ 22 ]}

El vector más eficiente, N2, que porta un gen de resistencia a la neomicina, se utilizó para transducir células de médula ósea de ratón. Las células transducidas con N2 se inyectaron en ratones irradiados letalmente, donde repoblaron la médula ósea. La presencia y expresión del vector N2 se pudo detectar en las células de médula ósea repobladas de los ratones mediante la prueba de resistencia de las células de la médula ósea al antibiótico tóxico neomicina. ^{[ 23 ]}

Una vez que el procedimiento funcionó con éxito en ratones, se realizaron estudios exitosos en primates no humanos. ^{[ 24 ] [ 25 ]} Además, se realizaron estudios de seguridad exhaustivos en los animales transducidos con el vector. ^{[ 26 ]}

Intentar realizar terapia génica mediante la inserción de ADN recombinante en un ser humano fue extremadamente controvertido después de un intento ilegal realizado por Martin Cline en 1980. Anderson, junto con el bioeticista John Fletcher, estableció el estándar ético para este tipo de protocolo clínico en su artículo de 1980 en The New England Journal of Medicine titulado: "Terapia génica en seres humanos: ¿cuándo es ético comenzar?" ^{[ 27 ]} Se estableció un extenso proceso regulatorio a finales de la década de 1980, incluida la creación del Subcomité de Terapia Génica Humana como una primera ronda de supervisión regulatoria. Solo después de la aprobación por esa revisión gubernamental pública formal, el protocolo clínico de terapia génica pasó a la revisión del Comité Asesor de ADN Recombinante (RAC), la FDA y otros comités de ética/regulación. Los medios siguieron cada paso de cerca.

Anderson se asoció con Michael Blaese, un destacado inmunólogo del Instituto Nacional del Cáncer (NCI), y Steven Rosenberg , un prominente cirujano oncológico y defensor de la inmunoterapia, también del NCI. El protocolo inicial fue un estudio de seguridad en el que solo se administró el vector N2, previamente demostrado ser seguro en primates no humanos, a pacientes con cáncer del servicio clínico oncológico del NCI de Rosenberg, que se ofrecieron como voluntarios para el estudio. Se llevó a cabo una revisión regulatoria completa de "terapia génica". El protocolo clínico comenzó el 22 de mayo de 1989 e incluyó a 10 pacientes. Se demostró que el procedimiento era seguro. ^{[ 28 ]} Rosenberg continuó desarrollando protocolos clínicos de terapia génica/inmunoterapia para el cáncer. ^{[ 29 ]}

Anderson y Blaese llevaron a cabo el primer protocolo de terapia génica en una niña de 4 años llamada Ashanthi DeSilva, que padecía una enfermedad de inmunodeficiencia combinada grave por deficiencia de adenosina desaminasa (ADA SCID) en estado crítico. Los estudios preliminares incluyeron el desarrollo de un vector retroviral que contenía el gen ADA junto con características de seguridad adicionales, ^{[ 30 ]} la creación de líneas celulares T humanas deficientes en ADA utilizadas para probar los vectores ADA, ^{[ 31 ]} y la creación de una empresa de biotecnología, Genetic Therapy Inc., para fabricar el vector ADA, llamado LASN, bajo los estrictos requisitos de GMP de la FDA. Anderson también creó, y se convirtió en editor jefe de, una nueva revista, Human Gene Therapy, en 1990. Esta nueva revista publicó no solo artículos de investigación científica originales, sino también artículos sobre cuestiones éticas y regulatorias relacionadas con la terapia génica.

Ashanthi recibió su primera infusión de células el 14 de septiembre de 1990, sin complicaciones. ^{[ 32 ] [ 33 ]} Recibió 10 infusiones más durante los siguientes 2 años. Sus estudios de evaluación inmunológica se normalizaron y se volvió sana sin infecciones importantes. ^{[ 34 ] [ 35 ]} Se realizó un seguimiento exhaustivo del estado inmunológico después de 12 años: permaneció sana con el 20% de sus linfocitos todavía portando un gen ADA retroviral activo, un porcentaje suficiente para garantizar la protección inmunológica. ^{[ 36 ]} Ahora tiene 33 años, está casada y trabaja como periodista y escritora.

En 1992, Anderson siguió a su esposa a Los Ángeles, donde ella aceptó el puesto de jefa de cirugía en el Hospital Infantil de Los Ángeles . Se convirtió en profesor de bioquímica y pediatría en la Universidad del Sur de California (USC). Anderson mantuvo su gran interés en la terapia génica y logró desarrollar un vector de terapia génica retroviral que podía dirigirse a la matriz de colágeno que rodea los nódulos cancerosos. ^{[ 37 ]} Escribió varias revisiones sobre terapia génica tanto en la literatura científica ^{[ 38 ] [ 39 ] [ 40 ]} como en la literatura popular. ^{[ 41 ] [ 42 ]}

Anticipando el valor de la tecnología de laboratorio en un chip para el análisis molecular de células individuales, Anderson unió fuerzas con Stephen Quake , profesor de física aplicada en el Instituto Tecnológico de California (Caltech) . Quake estaba desarrollando tecnología de laboratorio en un chip utilizando polímeros blandos. Anderson fue investigador asociado visitante en física aplicada en Caltech de 2001 a 2006, mientras mantenía sus cargos en la USC, y logró desarrollar una válvula microfluídica mejorada que fue patentada y se ha convertido en el núcleo de los dispositivos de laboratorio en un chip de polímeros blandos. ^{[ 43 ] [ 44 ]}

Su último proyecto antes de ser arrestado fue el descubrimiento e identificación de un factor en el suero de animales irradiados que podía salvar a animales con irradiación letal incluso 24 horas después de la irradiación. ^{[ 45 ]} La purificación del suero demostró que el factor era la interleucina 12. Durante los 12 años que Anderson ha estado en prisión, se ha demostrado que la IL-12 podría ser un fármaco adyuvante muy importante en el tratamiento del cáncer.

Anderson ha ejercido como médico de ring y médico de torneo en numerosas competiciones. En 1981, se convirtió en el médico del equipo nacional de taekwondo, y también lo fue en los Juegos Olímpicos de Seúl de 1988 , cuando el taekwondo se convirtió en deporte olímpico. ^{[ 1 ]} Ha escrito varios artículos sobre medicina deportiva relacionados con la prevención y el tratamiento de lesiones en taekwondo. ^{[ 46 ] [ 47 ] [ 48 ]} Además, fue presidente del comité médico de la Federación Mundial de Taekwondo de 1985 a 1988.

Anderson es conocido en medicina forense principalmente por su análisis forense del famoso tiroteo del FBI del 11 de abril de 1986, que en su momento fue el más mortífero en la historia del FBI. Su análisis, publicado de forma privada en 1996, fue aceptado por el FBI como la versión oficial, y cada nuevo agente del FBI recibió una copia de su informe. Diez años después, el FBI autorizó a Anderson a hacer público el informe, que fue publicado con un nuevo prólogo por Paladin Press en 2006. ^{[ 49 ]}

Anderson también publicó un análisis forense del asesinato de Warren Earp , ^{[ 50 ]} así como un estudio de los moretones debajo de la armadura corporal blanda cuando balas de varios calibres impactan a una persona que lleva la armadura. ^{[ 51 ]}