Pipeta graduada

Una pipeta graduada es una pipeta cuyo volumen, en incrementos, está marcado a lo largo del tubo. Se utiliza para medir y transferir con precisión un volumen de líquido de un recipiente a otro. ^{[ 1 ]} Está hecha de tubos de plástico o vidrio y tiene una punta cónica. A lo largo del cuerpo del tubo hay marcas de graduación que indican el volumen desde la punta hasta ese punto. Una pipeta pequeña permite una medición más precisa de los fluidos; una pipeta más grande se puede utilizar para medir volúmenes cuando la precisión de la medición es menos crítica. Por consiguiente, las pipetas varían en volumen, y la mayoría mide entre 0 y 25,0 mililitros (0,00 y 0,88 onzas líquidas imperiales ; 0,00 y 0,85 onzas líquidas estadounidenses ) . ^{[ 2 ]}      

Una pipeta funciona creando un vacío parcial sobre la cámara que contiene el líquido, para aspirar el líquido, y liberando ese vacío parcial para dispensarlo. ^{[ 5 ]}

Históricamente, la precisión de una pipeta graduada no era tan buena como la de una pipeta volumétrica (con una precisión de 3 cifras significativas ); sin embargo, gracias a la mejora de los métodos de fabricación, la precisión indicada por el fabricante puede igualar la de las pipetas volumétricas. Las pipetas graduadas se consideran más precisas que la pipeta Pasteur . Sus tolerancias oscilan entre ±0,6 % y ±0,4 % del volumen nominal, medido a 20 °C (68 °F) .  

Las pipetas graduadas se fabrican según las especificaciones ISO en cuanto a precisión y disposición de las graduaciones. Las pipetas de grado A y AS ofrecen la máxima precisión, donde la S significa "entrega rápida". Estos márgenes de error permitidos son idénticos a los de las normas DIN EN ISO . Las pipetas de grado B generalmente tienen el doble de margen de error permitido que las pipetas de grado A y AS. ^{[ 6 ]}

Estas pipetas suelen tener volúmenes de 5, 10, 25 y 50 ml. Se han desarrollado diversos tipos de pipetas , tanto manuales como eléctricas. Originalmente, las pipetas se fabricaban con vidrio de sílice-soda , pero actualmente muchas se fabrican con vidrio de borosilicato ; las pipetas graduadas desechables suelen ser de poliestireno .

La clasificación estándar de las pipetas graduadas se basa en la forma, las puntas de dispensación, las líneas de graduación, los periodos de llenado y descarga, y la calibración.

Clasificación estándar Las pipetas graduadas de vidrio más precisas se clasifican según su género, clase y dimensión. Los dos géneros, Género 1 y Género 2, designan, respectivamente, las pipetas con "punta cónica estándar" y "punta cónica larga".

Existen dos clases: Clase A y Clase B. Las pipetas de Clase A se fabrican con tolerancias precisas, o "límites de error". Las de Clase B admiten el doble de los límites de error que las de Clase A. La especificación de clase o el número de serie de las pipetas de Clase B no están marcados.

Diseño estándar Las puntas cónicas de dispensación de los tipos 1 y 2 son diferentes: para el tipo 1, la punta mide entre 15 y 30  mm de largo, para una  pipeta de 5 ml de capacidad, y entre 20 y 40  mm, para capacidades de 10 a 50  ml; para el tipo 2, la punta es más larga, entre 50 y 65  mm de longitud. La abertura en el extremo de la punta es perpendicular al eje del tubo, y una abertura inesperadamente estrecha no es aceptable para las pipetas del tipo 2. El biselado y el pulido al fuego del margen externo de la abertura de la punta son esenciales.

Se especifica el tiempo permitido para el llenado y el vaciado, desde la primera hasta la última marca. Dichos tiempos se miden con un cronómetro y utilizando agua destilada a 20  °C.

La escala de capacidad generalmente debe tener  marcas de al menos 90 mm, con la excepción de  las pipetas de 0,5 ml, que deben tener marcas de al menos 80  mm. El estándar para todas las pipetas es que las marcas sean indelebles y comprensibles, grabadas con tinta permanente o esmaltada. Cada marca de graduación debe tener una desviación máxima de 0,40  mm y ser perpendicular al eje del tubo. ^{[ 7 ]}

Clase A: Los límites de error de esta clase de equipos volumétricos de vidrio están especificados por la norma DIN EN ISO 9712 , que se aplica tanto a la propia Clase A como a otras clases que tienen una designación similar, como la Clase AS.

Clase AS: Especifica una pipeta de dispensación "rápida", facilitada por una punta expandida. La marca de clase se encuentra cerca de la especificación de volumen. ^{[ 4 ] [ 6 ]}

Clase B : La diferencia entre la Clase A/AS y la Clase B es que los límites de error para la Clase B son el doble de los permitidos para las clases A y AS, las pipetas de Clase B pueden ser de plástico y no se especifica el tiempo de espera del sistema de suministro (TD, Ex). ^{[ 4 ]}

Los tiempos de entrega y espera representan la eficiencia del fluido que se entrega como TD y EX . La marca TD ("para entregar") o EX significa que el volumen especificado es la cantidad de solución que drenará de la pipeta, la cual puede ser menor que la cantidad total presente debido al fluido residual que se adhiere a la pared del equipo. El tiempo de entrega se describe como la duración del tiempo que tarda el menisco en alcanzar el extremo de la punta desde el volumen más alto, que se especifica en 5 segundos para equipos volumétricos de bulbo y pipeta graduada de Clase AS. ^{[ 4 ]} Las pipetas TD/EX son el tipo más común. ^{[ 8 ]}

Otro tipo se identifica como TC ("contener") o IN , lo que significa que el volumen especificado es la cantidad real de solución presente en la pipeta y, por lo tanto, es esencial expulsarla por completo para obtener esa cantidad en el recipiente secundario. ^{[ 4 ] [ 9 ]}

Con menos frecuencia, algunas pipetas TD están diseñadas para contener la solución según el fabricante y deben soplarse. ^{[ 10 ] [ 11 ]} Un conjunto de dos anillos impresos en el extremo superior de la pipeta indican que es del tipo de "soplado" y debe soplarse con una pera de goma . No sople la solución si la pipeta no tiene anillos en el extremo superior. ^{[ 3 ]}

Se recomienda usar una pipeta cuyo tamaño sea lo más cercano posible al volumen con el que se trabaja. Es necesario enjuagar la pipeta antes de usarla para evitar errores. La técnica estándar para manejar una pipeta graduada consiste en mantener la punta sumergida en la solución sin tocar el fondo del vaso de precipitados. Luego, se utiliza un propipetador, una pera de pipeta o una pera de goma para aspirar el líquido hacia la pipeta. La forma eficaz de controlar el volumen de la solución es usar el dedo índice. ^{[ 2 ]} Una vez obtenido el volumen deseado, la solución se puede verter en otro recipiente levantando el dedo. Durante el pipeteo, la pipeta siempre debe mantenerse en posición vertical.

La solución formará un menisco , cuya posición se lee según la escala impresa en la pipeta. Para líquidos de alta viscosidad, el volumen se mide observando el menisco superior. Para líquidos de baja viscosidad, el volumen se mide observando el menisco inferior. ^{[ 12 ]}

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  Se forma un menisco con la solución de baja viscosidad. Al leer la medición, asegúrese de observar la parte inferior de la curva.
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  Una persona soplando la pipeta con una pera de goma. Nótese los dos anillos en el extremo superior de la pipeta, lo que indica que se trata de una pipeta de soplado.

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  La tasa de precisión con "TD" indicó el nivel de flujo de la solución.