Articulo de referencia

Microscopía de contraste de modulación de Hoffman

Células del menisco humano mediante contraste de modulación de Hoffman. Barra de escala = 10 μm. [ 1 ] La microscopía de contraste por modulación de Hoffman (microscopía HMC) es...

Células del menisco humano mediante contraste de modulación de Hoffman. Barra de escala = 10 μm. [ 1 ]

La microscopía de contraste por modulación de Hoffman (microscopía HMC) es una técnica de microscopía óptica para mejorar el contraste en muestras biológicas sin teñir. La técnica fue inventada por Robert Hoffman en 1975. [ 2 ] Al igual que la microscopía de contraste de interferencia diferencial (microscopía DIC), el contraste se incrementa mediante el uso de componentes en la trayectoria de la luz que convierten los gradientes de fase en la muestra en diferencias de intensidad de luz que se representan en una imagen que parece tridimensional. La apariencia 3D puede ser engañosa, ya que una característica que parece proyectar una sombra puede no tener necesariamente una geometría física distinta que corresponda a la sombra. La técnica es particularmente adecuada para el seccionamiento óptico a bajos aumentos. [ 3 ] [ 4 ]

Un ejemplo del uso de la iluminación HMC se encuentra en la fertilización in vitro , donde bajo iluminación de campo claro el ovocito casi transparente es difícil de ver con claridad.

Los sistemas HMC suelen constar de un condensador con una abertura de rendija, un objetivo con una abertura de rendija y un polarizador que se coloca entre el condensador y la fuente de iluminación y se utiliza para controlar el grado de contraste. El principio de HMC es utilizado por varios fabricantes de microscopios que han introducido sus propias variantes de la técnica.

Referencias

  1. Figura 1 en Cultivo tridimensional de células meniscales humanas: matriz extracelular y producción de proteoglicanos, Helen E Gruber, David Mauerhan, Yin Chow, Jane A Ingram, H James Norton, Edward N Hanley y Yubo Sun, BMC Biotechnology , 2008, 8:54 , doi : 10.1186/1472-6750-8-54 .
  2. Robert Hoffman y Leo Gross (1975). "Contraste de modulación" . Óptica Aplicada . 14 (5). Microscopio de Óptica Aplicada: 1169–1176 . doi : 10.1364/AO.14.001169 . PMID 20154791 . 
  3. Douglas B. Murphy (2001): Fundamentos de microscopía óptica e imagen electrónica , Wiley-Liss, Inc., Nueva York, ISBN 0-471-25391-X
  4. "Técnicas especializadas de microscopía: fundamentos del contraste por modulación de Hoffman" . Centro de aprendizaje de Olympus . Consultado el 4 de abril de 2023 .