El espaciador transcrito interno ( ITS ) es el ADN espaciador situado entre los genes del ARN ribosómico (ARNr) de la subunidad pequeña y del ARNr de la subunidad grande en el cromosoma o la región transcrita correspondiente en el transcrito precursor policistrónico del ARNr.
En todos los ámbitos de la vida
En bacterias y arqueas , existe un único ITS, ubicado entre los genes de ARNr 16S y 23S . Por el contrario, en eucariotas existen dos ITS : ITS1 se encuentra entre los genes de ARNr 18S y 5.8S , mientras que ITS2 se ubica entre los genes de ARNr 5.8S y 28S (en opistocontos , o 25S en plantas). ITS1 corresponde al ITS presente en bacterias y arqueas, mientras que ITS2 se originó como una inserción que interrumpió el gen ancestral de ARNr 23S. [ 1 ] [ 2 ]
Organización

En bacterias y arqueas , la región ITS se presenta en una o varias copias, al igual que los genes 16S y 23S adyacentes . Cuando hay múltiples copias, estas no se encuentran contiguas, sino en ubicaciones discretas del cromosoma circular. En bacterias, es común encontrar genes de ARNt en la región ITS. [ 3 ] [ 4 ]
En los eucariotas, los genes que codifican el ARN ribosómico y los espaciadores se presentan en repeticiones en tándem de miles de copias de longitud, cada una separada por regiones de ADN no transcrito denominadas espaciador intergénico (IGS) o espaciador no transcrito (NTS).
Cada grupo ribosomal eucariota contiene el espaciador transcrito externo 5' (ETS 5'), el gen del ARNr 18S , el ITS1, el gen del ARNr 5.8S , el ITS2, el gen del ARNr 26S o 28S y, finalmente, el ETS 3'. [ 5 ]
Durante la maduración del ARNr, los fragmentos ETS e ITS se escinden. Como subproductos no funcionales de esta maduración, se degradan rápidamente. [ 6 ]
Uso en filogenia molecular
La comparación de secuencias de las regiones ITS eucariotas se utiliza ampliamente en taxonomía y filogenia molecular debido a varias propiedades favorables: [ 7 ]
- Su amplificación es habitual gracias a su pequeño tamaño, asociado a la disponibilidad de secuencias flanqueantes altamente conservadas.
- Es fácil de detectar incluso a partir de pequeñas cantidades de ADN debido al elevado número de copias de los grupos de ARNr.
- Experimenta una rápida evolución concertada mediante entrecruzamiento desigual y conversión génica. Esto promueve la homogeneidad intragenómica de las unidades repetitivas, aunque la secuenciación de alto rendimiento mostró la ocurrencia de variaciones frecuentes dentro de las especies de plantas. [ 8 ]
- Presenta un alto grado de variación incluso entre especies estrechamente relacionadas. Esto puede explicarse por la presión evolutiva relativamente baja que actúa sobre dichas secuencias espaciadoras no codificantes.
Por ejemplo, los marcadores ITS han demostrado ser especialmente útiles para dilucidar las relaciones filogenéticas entre los siguientes taxones.
Se sabe que ITS2 está más conservado que ITS1. Todas las secuencias de ITS2 comparten un núcleo común de estructura secundaria, [ 26 ] mientras que las estructuras de ITS1 solo se conservan en unidades taxonómicas mucho más pequeñas. Independientemente del grado de conservación, la comparación asistida por la estructura puede proporcionar mayor resolución y robustez. [ 27 ]
Código de barras micológico
La región ITS es la región de ADN más ampliamente secuenciada en el campo de la micología . [ 28 ] y se ha recomendado como la secuencia universal de código de barras de hongos. [ 29 ] Por lo general, ha sido más útil para la sistemática molecular a nivel de especie a género, e incluso dentro de las especies (por ejemplo, para identificar variedades locales ). Debido a su mayor grado de variación que otras regiones génicas del ADNr (por ejemplo, ARNr de subunidad pequeña y grande), a veces se puede observar variación entre repeticiones individuales de ADNr tanto dentro de las regiones ITS como IGS. Además de los cebadores universales ITS1+ITS4 [ 30 ] [ 31 ] utilizados por muchos laboratorios, se han descrito varios cebadores específicos de taxones que permiten la amplificación selectiva de secuencias fúngicas (por ejemplo, véase el artículo de Gardes y Bruns de 1993 que describe la amplificación de secuencias ITS de basidiomicetos a partir de muestras de micorrizas ). [ 32 ] A pesar de que los métodos de secuenciación de escopeta y secuenciación de nanoporos se utilizan cada vez más en microbiología médica , la baja biomasa de hongos presente en las muestras clínicas hace que los métodos de código de barras basados en PCR sean preferibles. [ 33 ] [ 34 ]
Referencias
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Enlaces externos
- Medicina de Laboratorio de la Universidad de Washington: Diagnóstico Molecular | Secuenciación de Levaduras
- Base de datos ITSone
- Base de datos ITS2 (Schultz et al.)
- ADN
- Filogenética