Ciencia Izon

Izon Science fabrica una gama de columnas de cromatografía de exclusión por tamaño (SEC), denominadas «columnas qEV», que separan las vesículas extracelulares de otros componentes en una amplia variedad de muestras biológicas. Las columnas qEV están rellenas con una resina de poliacrilamida porosa, que facilita la separación de biomoléculas y partículas en solución según su tamaño. Una vez cargada la muestra en la columna, esta la atraviesa por gravedad. Las partículas de mayor tamaño eluyen primero, ya que no pueden entrar en los poros de la resina y, por lo tanto, siguen una ruta más directa a lo largo de la columna. En cambio, las partículas más pequeñas que el tamaño de corte especificado (35  nm o 70  nm, según la columna qEV) entran en los poros de la resina y eluyen más tarde. La muestra sale por la parte inferior de la columna y se recoge en tubos de recolección colocados en el colector automático de fracciones, o bien mediante recolección manual.

La detección de pulsos resistivos sintonizables (TRPS) es una técnica analítica de partícula única que se utiliza para medir el tamaño, la concentración y la carga de partículas de tamaño nano y micro mediante la detección de un cambio en la corriente iónica. El paso de una partícula individual a través de un nanoporo cargado crea un cambio transitorio en la resistencia y una disminución posterior en la corriente de fondo, conocido como evento de bloqueo. Las características del bloqueo son representativas de las propiedades de la partícula y de la muestra: la magnitud del bloqueo es proporcional al tamaño de la partícula, la tasa de bloqueo está directamente relacionada con la concentración de partículas y la velocidad con la que una partícula se mueve a través del poro está relacionada con su potencial zeta .

Las columnas qEV basadas en cromatografía de exclusión por tamaño contienen resinas de polisacáridos porosos , que permiten aislar vesículas extracelulares para su posterior análisis mediante diversos métodos analíticos. La gama de columnas qEV facilita la separación de partículas en los rangos de 35-350 y 70-1000  nm y admite volúmenes de carga de muestra entre ≤150 μL y 100 mL. El recolector automático de fracciones (AFC) qEV reduce el trabajo manual y laborioso que antes se asociaba a la SEC. El AFC utiliza un carrusel giratorio para sujetar los tubos de recolección y cuenta con un ordenador integrado que puede programarse para automatizar el volumen muerto y el volumen de recolección purificado. Durante la recolección de la muestra, el carrusel detecta el peso de cada volumen de recolección purificado y avanza automáticamente al siguiente tubo.

El colector automático de fracciones (AFC) es una tecnología de automatización programable diseñada para mejorar la reproducibilidad y la escalabilidad de la recolección de muestras de las columnas qEV. El AFC gestiona la recolección de fracciones de la columna qEV diferenciando entre el volumen del tampón y el volumen de las fracciones que contienen vesículas extracelulares. Incorpora un carrusel giratorio para sujetar los tubos de recolección y mide con precisión el volumen de cada fracción por peso a medida que la muestra eluye de la columna. En conjunto, las columnas qEV y el AFC conforman la plataforma de aislamiento qEV. Se pueden utilizar varios AFC en paralelo para aumentar el rendimiento del aislamiento de vesículas extracelulares.

El Exoid es el instrumento de detección de pulsos resistivos sintonizable más reciente desarrollado por Izon Science e incorpora sistemas automatizados para evitar la extensa sintonización manual asociada con el qNano. Anteriormente, con el qNano, había muchos componentes manuales: el estiramiento del nanoporo debía ajustarse manualmente con una manivela, y la presión se ajustaba manualmente mediante un módulo de presión variable (VPM). En cambio, el Exoid ajusta automáticamente el estiramiento, el voltaje y la presión, después de seleccionar los parámetros mediante el software. El Exoid es capaz de medir el tamaño, la concentración y el potencial zeta de partículas individuales de entre aproximadamente 40  nm y 10  μm. El qNano es el instrumento TRPS original de Izon Science y siguió siendo el principal instrumento TRPS desde su lanzamiento en junio de 2009 hasta que fue reemplazado por el Exoid en marzo de 2021. A diferencia del qNano, el Exoid tiene componentes semiautomatizados integrados para controlar la presión y el estiramiento del nanoporo, y un amplificador de fijación de voltaje mejorado. El qNano requería ajuste manual para regular la elongación del nanoporo y la presión electrocinética, mientras que el voltaje se seleccionaba mediante el software. La elongación del nanoporo se ajustaba con una manivela, y la presión se regulaba mediante un módulo de presión variable que controlaba un sistema de tubo y émbolo. Tras su lanzamiento, el qNano recibió varias actualizaciones, incluida la incorporación de un módulo de lectura de presión.

Izon Science suministra componentes individuales y complementarios para el aislamiento de qEV y mediciones de TRPS, incluyendo nanoporos, partículas de calibración de TRPS, celdas de fluido TRPS y soportes para columnas de qEV. El kit de extracción de ARN de qEV, fabricado para Izon Science por Norgen Biotek, facilita la extracción de ARN de las vesículas extracelulares (VE). El kit de concentración de qEV utiliza partículas de vesículas extracelulares Nanotrap® de Ceres NanoSciences para concentrar las vesículas extracelulares aisladas con columnas de qEV. El kit de extracción de ARN de qEV puede utilizarse junto con el kit de concentración de qEV o por separado, si se requiere.