Célula madre límbica

Las células madre límbicas , también conocidas como células madre epiteliales corneales , son células madre unipotentes ubicadas en la capa epitelial basal del limbo corneal . Forman el límite entre la córnea y la esclerótica . Las características de las células madre límbicas incluyen una tasa de recambio lenta, un alto potencial proliferativo, clonogenicidad, expresión de marcadores de células madre, así como la capacidad de regenerar todo el epitelio corneal. La proliferación de las células madre límbicas tiene la función de mantener la córnea ; por ejemplo, reemplazando las células que se pierden a través de las lágrimas . Además, estas células también impiden que las células epiteliales conjuntivales migren a la superficie de la córnea. ^{[ 2 ]}

El daño al limbo puede provocar deficiencia de células madre límbicas (LSCD); esta puede ser primaria, relacionada con un microambiente estromal insuficiente para sustentar las funciones de las células madre, como la aniridia y otras afecciones congénitas, o secundaria, causada por factores externos que destruyen las células madre límbicas, como quemaduras químicas o térmicas, radiación, cirugía, infección, uso de lentes de contacto o ciertos medicamentos. ^{[ 3 ]}

Los signos y síntomas incluyen: conjuntivalización, vascularización corneal, molestias o dolor ocular, deterioro visual , fotofobia y ceguera, que probablemente estén asociados con un fallo en el proceso de regeneración del epitelio corneal . ^{[ 4 ]}

El tratamiento inmediato tiene como objetivo limitar el daño traumático o químico al limbo, controlar la inflamación y contribuir a la formación de un epitelio corneal sano. El tratamiento inicial tras un traumatismo o lesión incluye lágrimas artificiales sin conservantes, esteroides tópicos, lentes de contacto terapéuticas y gotas oftálmicas autólogas (elaboradas a partir del suero y plasma sanguíneo del propio paciente). Una vez estabilizada la superficie corneal, la cirugía es el principal tratamiento. ^{[ 5 ]}

Tipos de cirugías:

1. En caso de deficiencia parcial de células madre límbicas (LSCD), se puede realizar una epiteliectomía conjuntival sectorial secuencial (SSCE) para eliminar el tejido (pannus) que haya crecido sobre la córnea. Este procedimiento se utiliza a veces como medida temporal hasta que sea posible realizar intervenciones quirúrgicas adicionales.
2. El trasplante de membrana amniótica de la placenta también puede ser útil. Si bien la membrana amniótica no posee células madre propias, favorece la regeneración de las células madre del limbo. Sin embargo, podría ser necesaria una intervención quirúrgica adicional si estos métodos no dan resultado o si la enfermedad es más grave.
3. El autoinjerto limbar conjuntival (CLAU) consiste en el trasplante de tejido limbar del ojo sano del paciente. Dado que el procedimiento se realiza mediante el trasplante de células madre limbares autólogas del ojo sano del paciente, no existe riesgo de rechazo inmunitario y, por lo tanto, no se requiere inmunosupresión sistémica. Sin embargo, este procedimiento representa un riesgo para el ojo donante, ya que el paciente ya tiene un ojo dañado.
4. En el caso de la deficiencia bilateral de células madre límbicas (LSCD), donde ambos ojos están afectados, es posible trasplantar tejido límbico de un donante vivo (generalmente un familiar). Esto se conoce como aloinjerto límbico conjuntival (CLAL). El CLAL se puede realizar tanto en casos de LSCD parcial como total; el tejido del donante suele ser de un hermano o progenitor. Al igual que con el CLAU, solo se puede trasplantar una parte del limbo del donante, ya que se utiliza un donante vivo. Al tratarse de un trasplante alogénico, se requiere inmunosupresión debido al riesgo de rechazo.
5. El aloinjerto queratolimbólico (KLAL) consiste en el trasplante de órganos de una persona fallecida que donó sus órganos. El KLAL puede utilizarse en casos de deficiencia bilateral de células madre límbicas (LSCD) cuando no se dispone de un donante vivo emparentado, o en pacientes con LSCD unilateral que no desean poner en riesgo la salud de su ojo. Sin embargo, la mayoría de estos trasplantes fracasan en un plazo de cinco años. El KLAL presenta varias limitaciones: el injerto suele tener hasta 24 horas de antigüedad antes de su extracción y, a menudo, se requiere un período adicional para analizar la sangre del cadáver antes de poder utilizar el tejido; con frecuencia, se observa que el limbo está dañado debido a la falta de inmunocompatibilidad del tejido; existe un alto riesgo de rechazo entre el receptor y el cadáver del donante, y los estudios reportan solo un éxito temporal en términos de efectividad del trasplante, ya que la mayoría fracasa después de 5 años.
6. Un procedimiento reciente, menos invasivo que la CLAU, que hasta ahora solo se ha probado en casos unilaterales, es el trasplante simple de epitelio limbar (SLET). En este procedimiento, se corta tejido limbar sano del ojo sano del paciente en varios fragmentos y se transfiere directamente a la membrana amniótica humana que recubre la córnea del ojo dañado. Los estudios publicados hasta la fecha solo han investigado el procedimiento en pacientes con afectación unilateral ^{[ 6 ]} , y aún no se ha demostrado la eficacia a largo plazo de la técnica.
7. Otra innovación reciente es el trasplante de epitelio límbico cultivado (CLET), ya sea autólogo (donde el donante y el receptor son el mismo paciente) o alogénico (donde el donante y el receptor son pacientes diferentes). Este enfoque se puede utilizar cuando uno o ambos ojos están afectados, siempre que haya suficiente tejido límbico disponible (1-2 ^mm²  ) . Se toma una pequeña muestra de células límbicas de una parte sana del ojo y se cultiva en un laboratorio estéril para producir una lámina de células suficiente para el trasplante. Una vez trasplantadas, se multiplican y regeneran el epitelio corneal. El proceso de fabricación está diseñado para garantizar la implantación del número, tamaño y calidad adecuados de células. El CLET evita algunos de los problemas que presentan otros procedimientos de trasplante límbico y no supone una amenaza para la integridad del ojo del donante. También ofrece la posibilidad de un segundo injerto en caso de fallo del primero o necesidad de un injerto adicional. El CLET autólogo se ha desarrollado para tratar específicamente la deficiencia de células límbicas (LSCD) en un reciente ensayo clínico de fase I. ^{[ 7 ]}

Existen tres tipos de queratinocitos clonogénicos involucrados en la generación del epitelio corneal: holoclonos, meroclonos y paraclonos. 1- Holoclones: como verdaderas células madre, poseen el mayor potencial de crecimiento y dan origen a 2- meroclonos, que tienen una capacidad proliferativa mucho menor, pero se dividen con frecuencia. 3- Paraclonos tienen una capacidad proliferativa aún menor. Tanto los meroclonos como los paraclonos se conocen como células amplificadoras transitorias y su función es formar un epitelio escamoso estratificado. Los tres tipos de queratinocitos están presentes en la capa basal del limbo, siendo los holoclonos los menos abundantes (10%-15%). La capa basal de la córnea está poblada por meroclonos y paraclonos en la periferia, y solo por paraclonos en la córnea central, lo que refleja el proceso de división y diferenciación celular descrito anteriormente. Los holoclonos se identifican por la alta expresión del marcador p63 y también se conocen como células p63 brillantes.

En febrero de 2015, la Comisión Europea aprobó la CLET autóloga utilizando la terapia con células madre Holoclar para personas con LSCD grave debido a quemaduras corneales. ^{[ 1 ]} Esta es la primera vez que una terapia con células madre (aparte del uso de células madre del cordón umbilical) ha sido aprobada por una agencia reguladora en el mundo. Fue creada por Graziella Pellegrini y Michele de Luca. ^{[ 8 ] [ 9 ]} Holoclar es un producto de ingeniería tisular que comprende células epiteliales corneales humanas autólogas expandidas ex vivo , incluidas células madre, que reemplazan las células madre del limbo en pacientes cuyo limbo ha sido destruido por quemaduras oculares. El uso del factor de transcripción p63 como biomarcador de potencia garantiza la cantidad específica de células madre necesarias para el éxito clínico. Se han documentado resultados beneficiosos a largo plazo clínicamente relevantes en el tratamiento de pacientes con LSCD debido a quemaduras oculares físicas o químicas.

• Lista de tipos de células humanas derivadas de las capas germinales

• Células madre epiteliales límbicas de la córnea. Archivado el 3 de mayo de 2019 en Wayback Machine.
• Ensayo clínico número NCT02592330 para "Tratamiento de la deficiencia de células madre límbicas (LSCD) con injerto de células madre cultivadas (CALEC)" en ClinicalTrials.gov.