Cromatograma de masas

Un cromatograma de masas es una representación de datos de espectrometría de masas como un cromatograma , donde el eje x representa el tiempo y el eje y representa la intensidad de la señal. ^{[ 1 ]} Los datos de origen contienen información de masas; sin embargo, no se representan gráficamente en un cromatograma de masas, sino que se visualiza la intensidad de la señal en función del tiempo. El uso más común de esta representación de datos es cuando la espectrometría de masas se utiliza junto con algún tipo de cromatografía , como en la cromatografía líquida-espectrometría de masas o la cromatografía de gases-espectrometría de masas . En este caso, el eje x representa el tiempo de retención, análogo a cualquier otro cromatograma. El eje y representa la intensidad de la señal o la intensidad relativa de la señal. Existen muchos tipos diferentes de métricas que esta intensidad puede representar, dependiendo de la información que se extraiga de cada espectro de masas.

El cromatograma de corriente iónica total (TICC) representa la intensidad sumada en todo el rango de masas detectadas en cada punto del análisis. ^{[ 2 ] [ 3 ]} El rango suele ser de varios cientos de unidades de masa a carga o más. En muestras complejas, el TICC a menudo proporciona información limitada, ya que múltiples analitos eluyen simultáneamente, enmascarando las especies individuales.

El cromatograma de pico base es similar al TICC, pero solo monitoriza el pico más intenso de cada espectro. ^{[ 4 ] [ 3 ]} Esto significa que el cromatograma de pico base representa la intensidad del pico más intenso en cada punto del análisis. Los cromatogramas de pico base suelen tener un aspecto más limpio y, por lo tanto, son más informativos que los cromatogramas TIC, ya que el ruido de fondo se reduce al centrarse en un único analito en cada punto.

En un cromatograma de iones extraídos (EIC o XIC), también llamado cromatograma de iones reconstruidos (RIC), uno o más valores m/z que representan uno o más analitos de interés se recuperan ("extraen") del conjunto completo de datos para una corrida cromatográfica. ^{[ 3 ]} La intensidad total o intensidad del pico base dentro de una ventana de tolerancia de masa alrededor de la relación masa-carga de un analito particular se grafica en cada punto del análisis. El tamaño de la ventana de tolerancia de masa generalmente depende de la precisión de masa y la resolución de masa del instrumento que recopila los datos. Esto es útil para reexaminar los datos para detectar analitos previamente no sospechados, para resaltar posibles isómeros, resolver sustancias sospechosas de coelución o para proporcionar cromatogramas limpios de compuestos de interés. Un cromatograma de iones extraídos se genera separando los iones de interés de un archivo de datos que contiene el espectro de masas completo a lo largo del tiempo después del hecho; Esto difiere de los cromatogramas de iones seleccionados, que se describen más adelante, en los que los datos se recopilan únicamente para valores m/z específicos. Un término muy similar es el cromatograma de compuestos extraídos (ECC).

Un cromatograma de monitorización de iones seleccionados (SIM) es similar a un EIC/XIC, con la excepción de que el espectrómetro de masas se opera en modo SIM, de modo que solo se detectan valores m/z preseleccionados en el análisis. ^{[ 5 ]} Los experimentos SIM se pueden realizar utilizando instrumentos de espectrometría de masas (MS) o espectrometría de masas en tándem (MS/MS). Son más comunes en instrumentos MS. Esto difiere significativamente del cromatograma de iones extraídos mencionado anteriormente en que solo se recogen datos para el/los ion(es) de interés en un experimento SIM; para los cromatogramas de iones extraídos (EIC o XIC), se recogen datos para un rango de masas completo durante la ejecución y luego se examinan para los analitos de interés una vez finalizada la ejecución.

El experimento de monitorización de reacción seleccionada (SRM) es muy similar al experimento SIM, excepto que se utiliza espectrometría de masas en tándem y se detecta un ion producto específico de un ion precursor específico. ^{[ 3 ]} Primero se selecciona la masa del analito precursor mientras se filtran los demás iones. Luego, el ion del analito precursor se fragmenta en fase gaseosa y se monitoriza un ion fragmento específico. Este experimento tiene una especificidad muy alta porque el cromatograma SRM representa solo iones de una masa particular que se fragmentan de manera que producen una masa producto muy específica. Este tipo de experimento solo se puede realizar utilizando espectrometría de masas en tándem. El progreso tecnológico en el área de MS/MS condujo al desarrollo de MRM, Monitorización de Reacciones Múltiples, que permite la detección simultánea de varios analitos coeluyentes con diferentes iones precursores y/o productos.

• Espectro de masas