Microscopía multifotónica multifocal

La microscopía multifotónica multifocal es una técnica de microscopía para generar imágenes 3D que utiliza un haz láser , dividido por una matriz de microlentes en varios haces pequeños, enfocados en la muestra. ^{[ 1 ]} Las múltiples señales se proyectan sobre una cámara CCD de la misma manera que en un microscopio convencional. La velocidad de imagen está determinada por la velocidad de fotogramas de la cámara , que depende de la velocidad de lectura y del número de píxeles , y puede superar las 30 imágenes/s. ^{[ 2 ]}

Al explotar propiedades específicas de la excitación multifotónica en modo pulsado, se ha resuelto el conflicto entre la densidad de los focos, es decir, el grado de paralelismo, y el seccionamiento axial. ^{[ 3 ]} Los pulsos láser de focos vecinos están separados temporalmente por al menos la duración de un pulso, de modo que se evita la interferencia. Este método se denomina multiplexación temporal (TMX). Además, con un alto grado de multiplicidad temporal , la distancia interfocal puede reducirse hasta tal punto que el escaneo lateral se vuelve obsoleto. En este caso, el escaneo axial es suficiente para registrar una imagen 3D.

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• Detalles técnicos