Etiqueta NE

La etiqueta NE es un péptido sintético diseñado como etiqueta de epítopo para la detección, cuantificación y purificación de proteínas recombinantes. Esta secuencia peptídica patentada se compone de dieciocho aminoácidos hidrofílicos . Este péptido corto no presenta homología significativa con ninguna proteína existente en la naturaleza. Este péptido sintético NE adopta una conformación de ovillo aleatorio y muestra una fuerte inmunogenicidad (predicción computacional). Esto resulta ventajoso para ofrecer una especificidad rigurosa a las proteínas con etiqueta NE, que pueden detectarse, cuantificarse y purificarse fácilmente. ^{[ 1 ]}

Detección

La etiqueta NE se puede detectar específicamente mediante un anticuerpo monoclonal de detección anti-NE: una inmunoglobulina de ratón purificada por afinidad, IgG1, que se une específicamente a las proteínas con etiqueta NE. Esta conjugación péptido-anticuerpo se valida mediante Western blot , inmunoprecipitación (IP), inmunocitoquímica (IHC) y purificación por afinidad de proteínas de fusión NE (es decir, columna de afinidad). ^{[ 2 ]}^{[ 3 ]}

Secuencias

La secuencia de ADN de la etiqueta NE es la siguiente: 5' ACC AAA gAA AAC CCg CgT AgC AAC Cag gAA gAA AgC TAT gAT gAT AAC gAA AgC 3'
La secuencia de aminoácidos correspondiente es: TKENPRSNQEESYDDNES (Thr-Lys-Glu-Asn-Pro-Arg-Ser-Asn-Gln-Glu-Glu-Ser-Tyr-Asp-Asp-Asn-Glu-Ser)

Patentes

EE. UU. 8927225
EP 2328909
CN 102203119

Referencias

↑ Ho, Philip WL.; Tse, Zero HM.; Liu, HF.; Lu, S.; Ho, Jessica WM.; Kung, Michelle HW.; Ramsden, David B.; Ho, SL. (2013). "Evaluación de la actividad estrogénica celular basada en la reducción mediada por el receptor de estrógeno de la expresión de la catecol-O-metiltransferasa (COMT) soluble en un sistema basado en ELISA" . PLOS ONE . 8 (9) e74065. Bibcode : 2013PLoSO...874065H . doi : 10.1371/journal.pone.0074065 . PMC 3765251. PMID 24040167 .
↑ Tse, HF.; Ho, JC.; Choi, SW.; Lee, YK.; Butler, AW.; Ng, KM.; Siu, CW.; Simpson, MA.; Lai, WH.; Chan, YC.; Au, KW.; Zhang, J.; Lay, KW.; Esteban, MA.; Nicholls, JM.; Colman, A.; Sham, PC. (2013). "Los cardiomiocitos derivados de células madre pluripotentes inducidas específicas del paciente recapitulan los fenotipos patogénicos de la miocardiopatía dilatada debido a una nueva mutación DES identificada mediante secuenciación del exoma completo" . Human Molecular Genetics . 22 (7): 1395– 1403. doi : 10.1093/hmg/dds556 . PMID 23300193 .
↑ Xu, EG.; Ho, Philip WL.; Tse, Zero HM.; Ho, SL.; Leung, KM. (2016). "Revelando los riesgos ecológicos de los disruptores endocrinos prioritarios en cuatro áreas marinas protegidas de Hong Kong a través de un enfoque integrador". Environmental Pollution . 215 : 103–112 . doi : 10.1016/j.envpol.2016.04.090 . PMID 27179329 .

[1] Ho, Philip WL.; Tse, Zero HM.; Liu, HF.; Lu, S.; Ho, Jessica WM.; Kung, Michelle HW.; Ramsden, David B.; Ho, SL. (2013). "Evaluación de la actividad estrogénica celular basada en la reducción mediada por el receptor de estrógeno de la expresión de la catecol-O-metiltransferasa (COMT) soluble en un sistema basado en ELISA" . PLOS ONE . 8 (9) e74065. Bibcode : 2013PLoSO...874065H . doi : 10.1371/journal.pone.0074065 . PMC 3765251. PMID 24040167 .

[2] Tse, HF.; Ho, JC.; Choi, SW.; Lee, YK.; Butler, AW.; Ng, KM.; Siu, CW.; Simpson, MA.; Lai, WH.; Chan, YC.; Au, KW.; Zhang, J.; Lay, KW.; Esteban, MA.; Nicholls, JM.; Colman, A.; Sham, PC. (2013). "Los cardiomiocitos derivados de células madre pluripotentes inducidas específicas del paciente recapitulan los fenotipos patogénicos de la miocardiopatía dilatada debido a una nueva mutación DES identificada mediante secuenciación del exoma completo" . Human Molecular Genetics . 22 (7): 1395– 1403. doi : 10.1093/hmg/dds556 . PMID 23300193 .

[3] Xu, EG.; Ho, Philip WL.; Tse, Zero HM.; Ho, SL.; Leung, KM. (2016). "Revelando los riesgos ecológicos de los disruptores endocrinos prioritarios en cuatro áreas marinas protegidas de Hong Kong a través de un enfoque integrador". Environmental Pollution . 215 : 103–112 . doi : 10.1016/j.envpol.2016.04.090 . PMID 27179329 .

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