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enzima de corte

Una enzima de corte (o endonucleasa de corte ) es una enzima que corta solo una hebra de una molécula de ADN o ARN de doble cadena [ 1 ] en una secuencia de nucleótidos de recon...

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Una enzima de corte (o endonucleasa de corte ) es una enzima que corta solo una hebra de una molécula de ADN o ARN de doble cadena [ 1 ] en una secuencia de nucleótidos de reconocimiento específica conocida como sitio de restricción . Estas enzimas hidrolizan (cortan) solo una hebra del dúplex de ADN, para producir moléculas de ADN que están " cortadas " en lugar de escindidas. [ 2 ] [ 3 ]

Pueden utilizarse para la amplificación por desplazamiento de cadena, [ 4 ] la reacción de amplificación de enzimas de corte , la degradación exonucleolítica, la creación de pequeños huecos, [ 5 ] o la traducción de cortes . [ 6 ] Este último proceso se ha utilizado con éxito para incorporar tanto nucleótidos marcados radiactivamente como nucleótidos fluorescentes, lo que permite estudiar regiones específicas en un ADN de doble cadena. [ 6 ] [ 7 ] Se han estudiado más de 200 enzimas de corte, y 15 de ellas están disponibles comercialmente [ 8 ] y se utilizan de forma rutinaria para la investigación y en productos comerciales.

La enzima de corte Nb.BbvCI se ha utilizado con éxito para incorporar nucleótidos marcados con fluorocromo en puntos específicos de una secuencia de ADN mediante traducción de cortes . [ 9 ]

Referencias

  1. ↑ Wang X, Zhu B (22 de mayo de 2024). "SARS-CoV-2 nsp15 degrada preferentemente el dsRNA rico en AU a través de su actividad de nickasa de dsRNA" . Nucleic Acids Research . 52 (9): 5257– 5272. doi : 10.1093 / nar/gkae290 . PMC 11109939. PMID 38634805 .  
  2. ↑ Ando T; et al. (julio de 1969). "Aislamiento y caracterización de enzimas con acción de corte de Escherichia coli infectada con el fago T4" . J. Biochem . 66 (1): 1– 10. doi : 10.1093/oxfordjournals.jbchem.a129107 . PMID 4309718 .  
  3. ↑ Morgan RD, Kong H, et al. (noviembre de 2000). "Caracterización de la actividad de corte específico de ADN de la endonucleasa de restricción N.BstNBI". Biol . Chem . 381 (11): 1123– 5. doi : 10.1515/BC.2000.137 . PMID 11154070. S2CID 22472698 .   
  4. ↑ Walker GT, Little MC, Nadeau JG, Shank DD (enero de 1992). "Amplificación in vitro isotérmica de ADN mediante un sistema de enzima de restricción/ADN polimerasa" . Proc. Natl. Acad. Sci. USA . 89 (1): 392– 6. Bibcode : 1992PNAS...89..392W . doi : 10.1073 / pnas.89.1.392 . PMC 48243. PMID 1309614 .  
  5. ↑ Wang H, Hays JB (octubre de 2001). "Preparación simple y rápida de ADN plasmídico con huecos para la incorporación de oligómeros que contienen lesiones de ADN específicas". Mol. Biotechnol . 19 (2): 133– 40. doi : 10.1385/MB:19 : 2:133 . PMID 11725483. S2CID 22156627 .  
  6. 1 2 Rigby PW, Dieckmann M, Rhodes C, Berg P (junio de 1977). "Marcaje de ácido desoxirribonucleico con alta actividad específica in vitro mediante traducción de muescas con ADN polimerasa I". J. Mol. Biol . 113 (1): 237– 51. doi : 10.1016/0022-2836(77)90052-3 . PMID 881736 . 
  7. ↑ Jo K, Dhingra DM, Odijk T, de Pablo JJ, Graham MD, Runnheim R, Forrest D, Schwartz DC (2007). "Un sistema de codificación de barras de molécula única que utiliza nanohendiduras para el análisis de ADN" . Proc. Natl. Acad. Sci. USA . 104 (8): 2673–8 . Bibcode : 2007PNAS..104.2673J . doi : 10.1073 / pnas.0611151104 . PMC 1815240. PMID 17296933 .  
  8. ↑ "Enzimas REBASE" . Enciclopedia de enzimas de restricción y corte . Consultado el 1 de junio de 2009 .
  9. ↑ Jo K, Dhingra DM, Odijk T, de Pablo JJ, Graham MD, Runnheim R, Forrest D, Schwartz DC (2007). " Un sistema de codificación de barras de molécula única que utiliza nanohendiduras para el análisis de ADN" . PNAS . 104 (8): 2673–8 . Bibcode : 2007PNAS..104.2673J . doi : 10.1073/pnas.0611151104 . PMC 1815240. PMID 17296933 .  
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