Ensayo de permeabilidad de membrana artificial paralela

En química médica , el ensayo de permeabilidad de membrana artificial paralela ( PAMPA ) es un método que determina la permeabilidad de las sustancias desde un compartimento donante, a través de una membrana artificial infundida con lípidos hacia un compartimento aceptor. ^[1] Se utiliza una placa de microtitulación de múltiples pocillos para el donante y se coloca un compartimento de membrana/aceptor encima; todo el conjunto se conoce comúnmente como un "sándwich". Al comienzo de la prueba, el fármaco se agrega al compartimento donante y el compartimento aceptor está libre de fármaco. Después de un período de incubación que puede incluir agitación, el sándwich se separa y se mide la cantidad de fármaco en cada compartimento. El balance de masa permite el cálculo del fármaco que permanece en la membrana.

Aplicaciones

Hasta la fecha, se han desarrollado modelos PAMPA que muestran un alto grado de correlación con la permeación a través de una variedad de barreras, incluidos los cultivos de Caco-2 , ^[2]^[3] el tracto gastrointestinal , ^[4] la barrera hematoencefálica ^[5] y la piel.

Los compartimentos donante y/o aceptor pueden contener agentes solubilizantes o aditivos que se unen a los fármacos a medida que penetran. Para mejorar la correlación in vitro - in vivo y el rendimiento del método PAMPA, la composición lipídica, química y de pH del sistema suele diseñarse teniendo en cuenta consideraciones biomiméticas.

Aunque el transporte activo no está modelado por la membrana artificial PAMPA, hasta el 95% de los fármacos conocidos se absorben mediante transporte pasivo . ^[6] Algunos expertos apoyan una cifra menor, por lo que la cantidad está abierta a cierta interpretación. Se pueden utilizar placas de microtitulación con 96 pocillos para el ensayo, lo que aumenta la velocidad y reduce el coste por muestra.

Comercialización

Desde la primera publicación de Kansy y colaboradores, ^[7] varias empresas desarrollaron sus propias versiones del ensayo. Los primeros modelos incorporaron condiciones de isopH en los compartimentos separados por una simple membrana lipídica; posteriormente, se introdujeron productos comerciales que incorporaban membranas lipídicas más sofisticadas. ^[8] Los productos comerciales ayudaron a garantizar que los químicos farmacéuticos de diferentes laboratorios corporativos dentro de una organización mundial utilizaran la misma metodología estandarizada, los mismos reactivos y obtuvieran un rendimiento del sistema equivalente, como se demostró con un conjunto de compuestos de prueba. Esto ha resultado muy útil, ya que varias actividades operativas se han subcontratado a otros países.

Véase también

Referencias

^ Ottaviani, Giorgio; Martel, Sophie; Carrupt, Pierre-Alain (2006). "Ensayo paralelo de permeabilidad de membrana artificial: una nueva membrana para la predicción rápida de la permeabilidad pasiva de la piel humana". Journal of Medicinal Chemistry . 49 (13): 3948– 3954. doi :10.1021/jm060230+. ISSN 0022-2623. PMID 16789751.
^ Bermejo, M. et al. (2004). PAMPA – un modelo de absorción de fármacos in vitro 7. Comparación de la permeabilidad de las fluoroquinolonas in situ, Caco-2 y PAMPA en ratas. Pharm. Sci., 21: 429-441.
^ Avdeef, A. et al. (2005). Permeabilidad al Caco-2 de fármacos débilmente básicos predicha con el método Double-Sink PAMPA pKaflux. Pharm. Sci., 24: 333-349.
^ Avdeef, A. et al. (2004). PAMPA: un modelo in vitro de absorción de fármacos 11. Igualación del espesor de la capa de agua no agitada in vivo mediante agitación de pocillos individuales en placas de microtitulación. Pharm. Sci., 22: 365-374.
^ Dagenais, C. et al. (2009). Permeabilidad in situ de la barrera hematoencefálica en ratones deficientes en P-glicoproteína y su predicción utilizando un modelo PAMPA en combinación. Eur. J. Phar. Sci., 38(2): 121-137.
^ Artursson, P. Aplicación de las propiedades fisicoquímicas de las moléculas para predecir la permeabilidad intestinal. Taller de la AAPS sobre definiciones de permeabilidad y normas regulatorias, Arlington, VA, EE. UU. (1998) 17-19 de agosto.
^ Kansy M, Senner F, Gubernator K. (1998) Cribado fisicoquímico de alto rendimiento: ensayo paralelo de permeabilidad de membrana artificial en la descripción de procesos de absorción pasiva. J. Med. Chem. 41: 1007–1010.
^ Chen, X. et al. (2008) Un nuevo diseño de membrana artificial para mejorar el modelo PAMPA. Pharmaceutical Research, 25: 1511.

Lectura adicional

Avdeef, Alex (2003). Absorción y desarrollo de fármacos . Hoboken, Nueva Jersey: Wiley-Interscience/J. Wiley. ISBN 0-471-42365-3.

[OttavianiMartel2006-1] Ottaviani, Giorgio; Martel, Sophie; Carrupt, Pierre-Alain (2006). "Ensayo paralelo de permeabilidad de membrana artificial: una nueva membrana para la predicción rápida de la permeabilidad pasiva de la piel humana". Journal of Medicinal Chemistry . 49 (13): 3948– 3954. doi :10.1021/jm060230+. ISSN 0022-2623. PMID 16789751.

[2] Bermejo, M. et al. (2004). PAMPA – un modelo de absorción de fármacos in vitro 7. Comparación de la permeabilidad de las fluoroquinolonas in situ, Caco-2 y PAMPA en ratas. Pharm. Sci., 21: 429-441.

[3] Avdeef, A. et al. (2005). Permeabilidad al Caco-2 de fármacos débilmente básicos predicha con el método Double-Sink PAMPA pKaflux. Pharm. Sci., 24: 333-349.

[4] Avdeef, A. et al. (2004). PAMPA: un modelo in vitro de absorción de fármacos 11. Igualación del espesor de la capa de agua no agitada in vivo mediante agitación de pocillos individuales en placas de microtitulación. Pharm. Sci., 22: 365-374.

[5] Dagenais, C. et al. (2009). Permeabilidad in situ de la barrera hematoencefálica en ratones deficientes en P-glicoproteína y su predicción utilizando un modelo PAMPA en combinación. Eur. J. Phar. Sci., 38(2): 121-137.

[6] Artursson, P. Aplicación de las propiedades fisicoquímicas de las moléculas para predecir la permeabilidad intestinal. Taller de la AAPS sobre definiciones de permeabilidad y normas regulatorias, Arlington, VA, EE. UU. (1998) 17-19 de agosto.

[7] Kansy M, Senner F, Gubernator K. (1998) Cribado fisicoquímico de alto rendimiento: ensayo paralelo de permeabilidad de membrana artificial en la descripción de procesos de absorción pasiva. J. Med. Chem. 41: 1007–1010.

[8] Chen, X. et al. (2008) Un nuevo diseño de membrana artificial para mejorar el modelo PAMPA. Pharmaceutical Research, 25: 1511.