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Percoll es un reactivo que consiste en partículas de sílice coloidal que se utiliza en biología celular y otros entornos de laboratorio. Fue formulado por primera vez por Pertoft y colegas, [2] y comercializado por Pharmacia Fine Chemicals . [3] Percoll se utiliza para el aislamiento de células , orgánulos o virus mediante centrifugación de densidad .
Percoll se desarrolló a partir de usos informados previamente de nanopartículas de sílice coloidal recubiertas con polisacáridos o polímeros para separaciones centrífugas de equilibrio, isopícnicas o zonales de velocidad. [4] Percoll en sí consiste específicamente en nanopartículas de sílice polidispersas de 15 a 30 nm de diámetro (23 % p/p en agua) que han sido recubiertas con polivinilpirrolidona (PVP). Percoll es muy adecuado para experimentos de gradiente de densidad porque posee una baja viscosidad en comparación con las alternativas, una baja osmolaridad y ninguna toxicidad para las células y sus componentes.
Percoll es una marca registrada de Cytiva. [5]
Características
El Percoll no se difunde notablemente con el tiempo, lo que da como resultado la formación de gradientes muy estables. Por lo tanto, los gradientes de densidad de Percoll tanto discontinuos como continuos se pueden preparar con semanas de anticipación, lo que permite una gran reproducibilidad y facilidad de uso. [6]
Uso pasado en reproducción artificial
El Percoll se utilizaba anteriormente en la tecnología de reproducción asistida (TRA) para seleccionar espermatozoides del semen mediante centrifugación en gradiente de densidad, para su uso en técnicas como la fertilización in vitro o la inseminación intrauterina . Sin embargo, en 1996, Pharmacia envió una carta a los laboratorios indicando que el Percoll debería utilizarse únicamente con fines de investigación, no clínicos. Pharmacia no lo había comercializado como un producto de preparación de esperma; había sido reenvasado y vendido como tal por fabricantes externos. La carta de advertencia de la FDA se debió a las preocupaciones de que la PVP pudiera causar daño a los espermatozoides (un problema desconocido), y también a que algunos lotes de Percoll contenían altos niveles de endotoxina (un problema conocido). Esta última preocupación también se aplica al uso de Percoll con cualquier otra célula que pueda inyectarse nuevamente en un paciente, ya que la endotoxina puede causar inflamación grave y fiebre. Desde entonces, ha sido reemplazado por otros coloides en la industria de la TRA. [7]
Referencias
- ^ Rüssmann L, Jung A, Heidrich HG (1982). "El uso de gradientes de Percoll, elución con rotor elutriador y tinción con mitramicina para el aislamiento e identificación de estadios intraeritrocíticos de Plasmodium berghei ". Revista de Parasitenkunde . 66 (3): 273–280. doi :10.1007/BF00925344. PMID 6177116.
- ^ Pertoft, Håkan; Laurent, Torvard C. (1977). "Separación isopícnica de células y orgánulos celulares por centrifugación en gradientes de sílice coloidal modificados". Métodos de separación celular . Boston, MA: Springer US. pág. 25–65. doi :10.1007/978-1-4684-0820-1_2. ISBN 978-1-4684-0822-5.
- ^ Pertoft, H.; Laurent, TC; Laas, T.; Kagedal, L. (1978). "Gradientes de densidad preparados a partir de partículas de sílice coloidal recubiertas con polivinilpirrolidona (Percoll)". Analytical Biochemistry . 88 (1): 271–282. doi :10.1016/0003-2697(78)90419-0.
- ^ Wolff, David A. (1975). "Capítulo 5 La separación de células y partículas subcelulares mediante centrifugación en gradiente de densidad de sílice coloidal". Métodos en biología celular . Elsevier. pág. 85–104. doi :10.1016/s0091-679x(08)60731-1. ISBN 978-0-12-564110-4. ISSN 0091-679X.
- ^ "PERCOLL". Estado de la marca registrada de la USPTO y recuperación de documentos . Consultado el 15 de octubre de 2024 .
- ^ "Medios de separación celular". Cytiva . Consultado el 24 de junio de 2023 .
- ^ Mortimer, D (mayo-junio de 2000). "Métodos de preparación de esperma". Journal of Andrology . 21 (3): 357–66. PMID 10819443 . Consultado el 5 de mayo de 2010 .
