La floxina B (conocida comúnmente como floxina ) es un colorante rojo soluble en agua que se utiliza para colorear medicamentos y cosméticos en Estados Unidos [ 2 ] y alimentos en Japón [ 3 ] . Se deriva de la fluoresceína , pero se diferencia por la presencia de cuatro átomos de bromo en las posiciones 2, 4, 5 y 7 del anillo de xanteno y cuatro átomos de cloro en el anillo de carboxifenilo [ 4 ] . Tiene un máximo de absorción alrededor de 540 nm y un máximo de emisión alrededor de 564 nm [ 5 ] . Además de su uso industrial, la floxina B tiene funciones como sustancia antimicrobiana , colorante de viabilidad y tinción biológica [ 6 ] . Por ejemplo, se utiliza en la tinción de hematoxilina-floxina-azafrán ( HPS ) para colorear el citoplasma y el tejido conectivo en tonos rojos [ 7 ] .
Propiedades antimicrobianas
Dosis letales
En presencia de luz , la floxina B tiene un efecto bactericida sobre cepas grampositivas , como Bacillus subtilis , Bacillus cereus y varias cepas de Staphylococcus aureus resistentes a la meticilina ( SARM ). [ 8 ] A una concentración mínima inhibitoria de 25 μM, el crecimiento se reduce 10 veces en 2,5 horas. A concentraciones de 50 μM y 100 μM, el crecimiento se detiene por completo y el recuento celular disminuye en un factor de 10⁴ a 10⁵ . [ 6 ] Para los humanos, la Administración de Alimentos y Medicamentos considera que la floxina B es segura hasta una dosis diaria de 1,25 mg/kg. [ 2 ]
Mecanismo de acción
Las bacterias expuestas a la floxina B mueren por daño oxidativo . La floxina B se ioniza en agua para convertirse en un ion con carga negativa que se une a componentes celulares con carga positiva . Cuando la floxina B se expone a la luz, se produce la desbromación y se forman radicales libres y oxígeno singlete . Estos compuestos causan daño irreversible a las bacterias, lo que lleva a la detención del crecimiento y la muerte celular. [ 8 ] Las bacterias gramnegativas son resistentes a la floxina B debido a la membrana celular externa que las rodea. Esta bicapa lipídica recubierta de polisacáridos crea una barrera de permeabilidad que impide la absorción eficiente del compuesto. La adición de EDTA , que se sabe que elimina los lipopolisacáridos y aumenta la permeabilidad de la membrana , [ 9 ] elimina la resistencia a la floxina B y permite que las bacterias gramnegativas también mueran.
Medida de viabilidad
La floxina B se puede utilizar para teñir células muertas de varias levaduras , incluidas Saccharomyces cerevisiae y Schizosaccharomyces pombe . Cuando se diluye en medios de cultivo de levadura , el colorante no puede entrar en la célula debido a sus membranas. Las células de levadura muertas pierden la integridad de la membrana, por lo que la floxina B puede entrar y teñir los compuestos citosólicos intracelulares. Por lo tanto, la tinción es una medida de la muerte celular. En los ensayos de recuento celular, el número de células fluorescentes (es decir, muertas) observadas a través de un hemocitómetro se puede comparar con el número total de células para dar una medida de la mortalidad. [ 10 ] El mismo principio se puede aplicar a mayor rendimiento mediante citometría de flujo activada por fluorescencia ( FACS ), donde se cuentan todas las células teñidas con floxina B en una muestra. [ 11 ] [Nota: algunos informes sugieren que la floxina B es bombeada fuera de las células de levadura vivas pero retenida en las células de levadura muertas/moribundas. [ 12 ] [ 13 ] Sin embargo, aún se necesitan pruebas definitivas para cualquiera de los dos modelos.]
Referencias
- ↑ Floxina B (Rojo ácido 92)
- 1 2 Administración de Alimentos y Medicamentos (2001). Código de Regulaciones Federales de los Estados Unidos de América, Título 21, Parte 74.1328 . Oficina de Imprenta del Gobierno de los Estados Unidos. pág. 296. Recuperado el 15 de abril de 2016 .
- ↑ Kamikura, M (1970). "Cromatografía de capa fina de colorantes sintéticos (X)" . Ciencia de la higiene y seguridad alimentaria (Shokuhin Eiseigaku Zasshi) . 11 (4): 242– 248. doi : 10.3358/shokueishi.11.242 .
- ↑ Duarte, Paulo; Ferreira, Diana P.; Ferreira Machado, Isabel; Felipe, Luis; Ferreira, Vieira; Rodríguez, Hernán B.; San Román, Enrique (2012). "Floxina B como sonda para atrapamiento en celulosa microcristalina" . Moléculas . 17 (2): 1602–1616 . doi : 10,3390/moléculas17021602 . PMC 6268435 . PMID 22314381 .
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- 1 2 Rasooly, Avraham; Weisz, Adrian (2002). "Actividades antibacterianas in vitro de la floxina B y otras fluoresceínas halogenadas contra Staphylococcus aureus resistente a la meticilina" . Antimicrobial Agents and Chemotherapy . 46 (11): 3650– 3653. doi : 10.1128/AAC.46.11.3650-3653.2002 . PMC 128710. PMID 12384384 .
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- 1 2 Rasooly, Reuven (agosto de 2005). "Ampliación de la acción bactericida del aditivo colorante alimentario floxina B a bacterias gramnegativas" . FEMS Immunology & Medical Microbiology . 45 (2): 239– 244. doi : 10.1016/j.femsim.2005.04.004 . PMID 15949926 .
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- Bromoarenos
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