Articulo de referencia

Herramientas moleculares de Plasmodium

Las herramientas moleculares para el estudio de Plasmodium son un conjunto de métodos para la manipulación genética del género de parásitos Plasmodium . El estudio científico de...

Las herramientas moleculares para el estudio de Plasmodium son un conjunto de métodos para la manipulación genética del género de parásitos Plasmodium . El estudio científico de las especies de Plasmodium ha resultado complejo, en parte debido a la incapacidad de muchas técnicas biológicas convencionales para alterar genéticamente el organismo . Investigaciones recientes han buscado superar estas barreras técnicas para facilitar el estudio del parásito. A continuación, se describen algunos métodos publicados de control genético en el parásito Plasmodium .

Transformación

nivel de ADN

Regulación de la transcripción

Sistemas de integración

Sistemas de recombinación

Sistemas de transposones

nivel de ARN

  • ARN de interferencia
  • antisentido
  • ribozima autocortante : un intento fallido de utilizar una ribozima autocortante inducible para controlar la degradación del ARNm de transcritos fusionados ( P. falciparum ) [ 5 ].

Nivel de proteínas

  • Dominio de desestabilización de FKBP : dominio regulable por ligando (Shld1) para promover la degradación de la proteína de fusión ( P. falciparum ) [ 6 ].
  • Dominio de desestabilización de DHFR : dominio regulable por ligando ( trimetoprima ) para promover la degradación de la proteína de fusión de P. falciparum . Gracias a que la proteína está marcada con un dominio de degradación de DHFR de E. coli , así como con GFP y una etiqueta HA , se pueden regular los niveles de proteína, determinar su localización celular y purificarla a partir de parásitos cultivados. [ 7 ]

Referencias

  1. Meissner, M; Krejany, E; Gilson, PR; De Koning-Ward, TF; Soldati, D; Crabb, BS (2005). " Expresión de transgenes regulada por análogos de tetraciclina en estadios sanguíneos de Plasmodium falciparum utilizando transactivadores de Toxoplasma gondii " . PNAS . 102 (8): 2980– 2985. Bibcode : 2005PNAS..102.2980M . doi : 10.1073/pnas.0500112102 . PMC 548799. PMID 15710888 .  
  2. Nkrumah, LJ; Muhle, RA; Moura, PA; Ghosh, P; Hatfull, GF; Jacobs Jr, WR; Fidock, DA (2006). "Integración eficiente específica de sitio en cromosomas de Plasmodium falciparum mediada por la integrasa Bxb1 del micobacteriófago" . Nature Methods . 3 (8): 615– 621. doi : 10.1038/nmeth904 . PMC 2943413. PMID 16862136 .  
  3. Carvalho, TG; Thiberge, S; Sakamoto, H; Ménard, R (2004). "Mutagénesis condicional mediante recombinación sitio-específica en transactivadores de Plasmodium berghei " . PNAS . 101 (41): 14931– 14936. doi : 10.1073/pnas.0404416101 . PMC 522007. PMID 15465918 .  
  4. Balu, B; Shoue, DA; Fraser Jr, MJ; Adams, JH (2005). "Transformación de alta eficiencia de Plasmodium falciparum por el elemento transponible lepidóptero piggyBac " . PNAS . 102 ( 45): 16391– 16396. Bibcode : 2005PNAS..10216391B . doi : 10.1073/pnas.0504679102 . PMC 1275597. PMID 16260745 .  
  5. Agop-Nersesian (2008). "Expresión funcional de ribozimas en Apicomplexa: Hacia el control exógeno de la expresión génica mediante la escisión inducible de ARN". International Journal for Parasitology . 38 (6): 673– 81. doi : 10.1016/j.ijpara.2007.10.015 . PMID 18062972 . 
  6. Armstrong, CM; Goldberg, DE (2007). "Un dominio de desestabilización de FKBP modula los niveles de proteínas en Plasmodium falciparum " . Nature Methods . 4 (12): 1007–1009 . doi : 10.1038/nmeth1132 . PMID 17994030. S2CID 3314981 .  
  7. Muralidharan, V; Goldberg, DE (2011). "Función de repetición de asparagina en una proteína de Plasmodium falciparum evaluada mediante una etiqueta de afinidad fluorescente regulable" . PNAS . 108 ( 11): 4411– 4416. Bibcode : 2011PNAS..108.4411M . doi : 10.1073/pnas.1018449108 . PMC 3060247. PMID 21368162 .