Articulo de referencia

RPMI 1640

Frascos de cultivo de tejidos RPMI 1640 , conocido simplemente como medio RPMI , es un medio de cultivo celular comúnmente utilizado para cultivar células de mamíferos . [ 1 ] R...

Frascos de cultivo de tejidos

RPMI 1640 , conocido simplemente como medio RPMI , es un medio de cultivo celular comúnmente utilizado para cultivar células de mamíferos . [ 1 ] RPMI 1640 fue desarrollado por George E. Moore, Robert E. Gerner y H. Addison Franklin en 1966 en el Roswell Park Comprehensive Cancer Center (anteriormente conocido como Roswell Park Memorial Institute), de donde deriva su nombre. [ 2 ] Una modificación del medio McCoy's 5A (o RPMI 1630), fue formulado originalmente para apoyar células linfoblastoides en cultivos en suspensión, pero también puede apoyar una amplia variedad de células adherentes.

Originalmente se desarrolló para el cultivo de células leucémicas humanas. Con el paso de los años, la formulación original fue modificada y perfeccionada por investigadores y proveedores comerciales para mejorar su capacidad de sustentar el crecimiento de muchos tipos de células. Este medio contiene una gran cantidad de fosfato , aminoácidos y vitaminas . RPMI 1640 utiliza un sistema tampón de bicarbonato y requiere una atmósfera de 5-10% de CO₂ para mantener un pH fisiológico . Normalmente, el medio no contiene proteínas ni factores de crecimiento, por lo que comúnmente se suplementa con 10% de suero fetal bovino . Suplementado adecuadamente con suero o un sustituto de suero adecuado, RPMI 1640 permite el cultivo de muchos tipos de células, especialmente linfocitos humanos, células Jurkat , células HeLa , células de médula ósea, hibridomas y carcinomas .

Composición

Existen muchas formulaciones diferentes. Normalmente, un litro de RPMI 1640 contiene: [ 2 ]

  • Glucosa (2  g)
  • Un indicador de pH ( rojo fenol , 5  mg)
  • Sales (6  g de cloruro de sodio, 2  g de bicarbonato de sodio, 1,512  g de fosfato disódico, 400  mg de cloruro de potasio, 100  mg de sulfato de magnesio y 100  mg de nitrato de calcio)
  • Aminoácidos (300  mg de glutamina; 200  mg de arginina; 50  mg de asparagina, cistina, leucina e isoleucina; 40  mg de hidrocloruro de lisina; 30  mg de serina; 20  mg de ácido aspártico, ácido glutámico, hidroxiprolina, prolina, treonina, tirosina y valina; 15  mg de histidina, metionina y fenilalanina; 10  mg de glicina; 5  mg de triptófano; y 1  mg de glutatión reducido)
  • Vitaminas (35  mg de i -inositol; 3  mg de cloruro de colina; 1  mg de cada uno de los siguientes ácidos: ácido para -aminobenzoico, ácido fólico, nicotinamida, hidrocloruro de piridoxina e hidrocloruro de tiamina; 0,25  mg de pantotenato de calcio; 0,2  mg de cada uno de los siguientes ácidos: biotina y riboflavina; y 0,005  mg de cianocobalamina)

Referencias

  1. Atlas RM, Snyder JW (2006). Manual de medios de cultivo para microbiología clínica (2.ª  ed.). Boca Raton, Florida: CRC Press. pág.  427.
  2. 1 2 Moore GE, Gerner RE, Franklin HA (1967). "Cultivo de leucocitos humanos normales". JAMA . 199 (8): 519– 524. doi : 10.1001/jama.199.8.519 . PMID 4960081 . 
  • http://www.bioind.com/RPMI1640
  • http://www.sigmaaldrich.com/Area_of_Interest/Life_Science/Cell_Culture/Product_Lines/Classic_Media___Salts/RPMI_Media.html
  • http://www.invitrogen.com/site/us/en/home/Products-and-Services/Applications/Cell-Culture/Mammalian-Cell-Culture/Classical_Media/RPMI.html
  • http://www.captivatebio.com/rpmi-1640-medium.html