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Conversión en tiempo real inducida por terremotos

La conversión inducida por agitación en tiempo real ( RT-QuIC ) es un ensayo altamente sensible para la detección de priones . [ 1 ] Tiene una especificidad cercana al 100% para...

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La conversión inducida por agitación en tiempo real ( RT-QuIC ) es un ensayo altamente sensible para la detección de priones . [ 1 ] Tiene una especificidad cercana al 100% para el diagnóstico de la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob . [ 2 ]

Técnica

El término "agitación" en el nombre de la técnica se refiere al hecho de que las muestras en el ensayo RT-QuIC se someten literalmente a agitación. Esta acción disgrega los agregados de proteína priónica (PrP), que luego se incuban, amplificando la cantidad de PrP mal plegada hasta niveles detectables. [ 3 ] [ 4 ]

Se trata de una prueba temprana, rápida y específica para enfermedades priónicas. Permite analizar diversos tipos de muestras, como líquido cefalorraquídeo (LCR), cerebro , ganglios linfáticos , sangre , músculo y piel , por lo que resulta aplicable a la tembladera en ovejas, la enfermedad del desgaste crónico (CWD) en cérvidos, la encefalopatía espongiforme bovina (EEB) en vacas y la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob esporádica en humanos, entre otras. [ 5 ]

El ensayo RT-QuIC utiliza en exceso priones normalmente plegados producidos recombinantemente, a menudo una proteína de hámster sirio truncada, aminoácidos 90-231. Se añaden muestras sospechosas de contener priones mal plegados, lo que provoca el mal plegamiento y la agregación de la proteína priónica normalmente plegada. Estos agregados proteicos pueden detectarse mediante la detección de fluorescencia en el espectro visible de la tioflavina T. [ 6 ] [ 7 ] [ 8 ] Los Centros para el Control y la Prevención de Enfermedades incluyen un resultado positivo de RT-QuIC en sus criterios diagnósticos para el diagnóstico probable de ECJ esporádica. [ 9 ]

Los ensayos RT-QuIC también pueden utilizarse para detectar la tembladera, la EEB y la CWD. Diversos procedimientos pueden mejorar la sensibilidad y la especificidad . La extracción de óxido de hierro (IOME) aprovecha la afinidad natural de la proteína priónica por los metales; una muestra se incuba con microesferas magnéticas, que se unen a la proteína priónica. Posteriormente, se recolecta y analiza la fracción de microesferas rica en priones. [ 10 ]

Los tejidos que se analizan habitualmente son los homogeneizados cerebrales y los tejidos linfáticos; sin embargo, también se han detectado priones en muestras de piel y sangre. [ 11 ] [ 12 ] [ 13 ] Algunos tejidos pueden ser difíciles de analizar para detectar priones. Por ejemplo, las muestras de sangre suelen tener niveles bajos de priones intracelulares circulantes y contienen inhibidores del ensayo. [ 14 ]

Véase también

Referencias

  1. ↑ Zerr, Inga; Cramm, Maria; da Silva Correia, Susana Margarida; Zafar, Saima; Villar-Piqué, Anna; Llorens, Franc; Schmitz, Matthias (2020-11-19). "Optimización del ensayo de conversión inducida por agitación en tiempo real para el diagnóstico de enfermedades priónicas" . Frontiers in Bioengineering and Biotechnology . 8 586890. doi : 10.3389/fbioe.2020.586890 . ISSN 2296-4185 . PMC 7710546. PMID 33330419 .   
  2. ↑ Zerr, Inga (7 de abril de 2022). "Diagnóstico de laboratorio de la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob". New England Journal of Medicine . 386 (14): 1345– 1350. doi : 10.1056/NEJMra2119323 . PMID 35388668 . 
  3. ↑ Lewczuk, Piotr; Riederer, Peter; O'Bryant, Sid E.; Verbeek, Marcel M.; Dubois, Bruno; Visser, Pieter Jelle; Jellinger, Kurt A.; Engelborghs, Sebastiaan; Ramírez, Alfredo; Parnetti, Lucila; Jack, Clifford R.; Teunissen, Charlotte E.; Hampel, Harald; Lleó, Alberto; Jessen, Frank; Glodzik, Lidia; de León, Mony J.; Fagan, Anne M.; Molinuevo, José Luis; Jansen, Willemijn J.; Winblad, Bengt; Shaw, Leslie M.; Andreasson, Ulf; Otto, Marcos; Mollenhauer, británico; Wiltfang, Jens; Turner, Martín R.; Zerr, Inga; Händels, Ron; Thompson, Alejandro G.; Johansson, Gunilla; Ermann, Natalia; Trojanowski, John Q.; Karaca, Ilker; Wagner, Holger; Oeckl, Patricio; van Waalwijk van Doorn, Linda; Bjerke, María; Kapogiannis, Dimitrios; Kuiperij, H. Bea; Farotti, Lucía; Li, Yi; Gordon, Brian A.; Epelbaum, Stéphane; Vos, Stephanie JB; Klijn, Catharina JM; Van Nostrand, William E.; Minguillón, Carolina; Schmitz, Matías; Gallo, Carla; López Mato, Andrea; Thibaut, Florencia; Lista, Simone; Alcolea, Daniel; Zetterberg, Henrik; Blennow, Kaj; Kornhuber, Johannes (27 de octubre de 2017). «Biomarcadores en líquido cefalorraquídeo y sangre para demencias neurodegenerativas: Actualización del Consenso del Grupo de Trabajo sobre Marcadores Biológicos en Psiquiatría de la Federación Mundial de Sociedades de Psiquiatría Biológica» . The World Journal of Biological Psychiatry . 19 (4): 244– 328. doi : 10.1080/15622975.2017.1375556 . PMC 5916324. PMID 29076399 .  
  4. ^ Cramm, María; Schmitz, Matías; Karch, André; Mitrova, Eva; Kuhn, Franziska; Schroeder, Bjoern; Raeber, Alex; Vargés, Daniela; Kim, Yong-Sun; Satoh, Katsuya; Collins, Steven; Zerr, Inga (1 de abril de 2015). "La estabilidad y la reproducibilidad subrayan la utilidad de RT-QuIC para el diagnóstico de la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob" . Neurobiología Molecular . 53 (3): 1896–1904.doi : 10.1007 / s12035-015-9133-2 . PMC 4789202 . PMID 25823511 .  
  5. ↑ Atarashi, R.; Sano, K.; Satoh, K.; Nishida, N. (2011). "Conversión inducida por temblores en tiempo real: un ensayo altamente sensible para la detección de priones" . Prion . 5 ( 3): 150– 3. doi : 10.4161/pri.5.3.16893 . PMC 3226039. PMID 21778820 .  
  6. ↑ Haley NJ, Hoover EA (2015). "Enfermedad de desgaste crónico en cérvidos: conocimientos actuales y perspectivas futuras". Annual Review of Animal Biosciences . 3 : 305–25 . doi : 10.1146/annurev-animal-022114-111001 . PMID 25387112 . 
  7. ^ Atarashi R, Satoh K, Sano K, Fuse T, Yamaguchi N, Ishibashi D, Matsubara T, Nakagaki T, Yamanaka H, ​​Shirabe S, Yamada M, Mizusawa H, Kitamoto T, Klug G, McGlade A, Collins SJ, Nishida N (febrero de 2011). "Detección ultrasensible de priones humanos en líquido cefalorraquídeo mediante conversión inducida por terremotos en tiempo real" (PDF) . Medicina de la Naturaleza . 17 (2): 175– 78. doi : 10.1038/nm.2294 . hdl : 10069/25642 . PMID 21278748 . S2CID 11381303 . Archivado desde el original (PDF) el 17 de agosto de 2019 . Consultado el 17 de agosto de 2019 .  
  8. ^ Orrú CD, Bongianni M, Tonoli G, Ferrari S, Hughson AG, Groveman BR, Fiorini M, Pocchiari M, Monaco S, Caughey B, Zanusso G (agosto de 2014). "Una prueba para la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob mediante cepillado nasal" . La Revista de Medicina de Nueva Inglaterra . 371 (6): 519– 29. doi : 10.1056/NEJMoa1315200 . PMC 4186748 . PMID 25099576 .  
  9. ↑ " Criterios diagnósticos de los CDC para la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob (ECJ), 2018" . Centros para el Control y la Prevención de Enfermedades. 17 de septiembre de 2018. Recuperado el 22 de noviembre de 2018. Adaptado de: a) Vigilancia mundial, diagnóstico y terapia de las encefalopatías espongiformes transmisibles humanas: Informe de una consulta de la OMS, febrero de 1998, Ginebra, Suiza; b) Zerr et al. 2009 ; c) Unidad Nacional de Investigación y Vigilancia de la ECJ. Protocolo: Vigilancia de la ECJ en el Reino Unido. Punto c consultado el 15 de agosto de 2018.Zerr I, Kallenberg K, Summers DM, Romero C, Taratuto A, Heinemann U, Breithaupt M, Varges D, Meissner B, Ladogana A, Schuur M, Haik S, Collins SJ, Jansen GH, Stokin GB, Pimentel J, Hewer E, Collie D, Smith P, Roberts H, Brandel JP, van Duijn C, Pocchiari M, Begue C, Cras P, Will RG, Sánchez-Juan P (octubre de 2009). "Criterios de diagnóstico clínico actualizados para la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob esporádica" . Cerebro . 132 (parte 10): 2659– 68. doi : 10.1093/brain/awp191 . PMC 2759336 . PMID 19773352 .  
  10. ↑ Denkers ND, Henderson DM, Mathiason CK, Hoover EA (agosto de 2016). "Detección mejorada de priones en muestras biológicas mediante extracción de partículas magnéticas y conversión inducida por temblores en tiempo real" . J Gen Virol . 97 (8): 2023–2029 . doi : 10.1099/jgv.0.000515 . PMC 5903251. PMID 27233771 .  
  11. ^ Mammana A, Baiardi S, Rossi M, Franceschini A, Donadio V, Capellari S, Caughey B, Parchi P (abril de 2020). "Detección de priones en biopsias de piel por punción de pacientes con enfermedad de Creutzfeldt-Jakob" . Ann Clin Transl Neurol . 7 (4): 559– 564. doi : 10.1002/acn3.51000 . PMC 7187701 . PMID 32141717 .  
  12. ↑ Concha-Marambio L, Pritzkow S, Moda F, Tagliavini F, Ironside JW, Schulz PE, Soto C (diciembre de 2016). " Detección de priones en sangre de pacientes con enfermedad de Creutzfeldt-Jakob variante" . Sci Transl Med . 8 (370): 370ra183. doi : 10.1126/scitranslmed.aaf6188 . PMC 5538786. PMID 28003548 .  
  13. ↑ Orrú CD, Yuan J, Appleby BS, Li B, Li Y, Winner D, Wang Z, Zhan YA, Rodgers M, Rarick J, Wyza RE, Joshi T, Wang GX, Cohen ML, Zhang S, Groveman BR, Petersen RB, Ironside JW, Quiñones-Mateu ME, Safar JG, Kong Q, Caughey B, Zou WQ (noviembre de 2017). "Actividad de siembra de priones e infectividad en muestras de piel de pacientes con enfermedad de Creutzfeldt-Jakob esporádica" . Sci Transl Med . 9 (417). doi : 10.1126/scitranslmed.aam7785 . PMC 5744860. PMID 29167394 .  
  14. ↑ Orrú CD, Wilham JM, Raymond LD, Kuhn F, Schroeder B, Raeber AJ, Caughey B (2011). " Prueba de sangre para la enfermedad priónica mediante inmunoprecipitación y conversión mejorada inducida por agitación" . mBio . 2 (3): e00078–11. doi : 10.1128/mBio.00078-11 . PMC 3101782. PMID 21558432 .