Safranina

La safranina ( safranina O o rojo básico 2 ) es un colorante biológico utilizado en histología y citología . Se emplea como contratinción en algunos protocolos de tinción, tiñendo de rojo los núcleos celulares . Es la contratinción clásica tanto en la tinción de Gram como en la tinción de endosporas . También puede utilizarse para la detección de cartílago , ^{[ 2 ]} mucina y gránulos de mastocitos .

La safranina suele tener la estructura química que se muestra a la derecha (a veces denominada dimetilsafranina ). También existe la trimetilsafranina , que presenta un grupo metilo añadido en la posición orto (véase el patrón de sustitución de areno ) del anillo inferior. Ambos compuestos se comportan de forma prácticamente idéntica en aplicaciones de tinción biológica, y la mayoría de los fabricantes de safranina no distinguen entre ellos. Las preparaciones comerciales de safranina suelen contener una mezcla de ambos tipos.

La safranina también se utiliza como indicador redox en química analítica .

Las safraninas son compuestos de azonio de la 2,8-dimetil-3,7-diaminofenazina simétrica . Se obtienen mediante la oxidación conjunta de una molécula de para -diamina con dos moléculas de amina primaria ; por condensación de compuestos para -aminoazo con aminas primarias, y por la acción de para -nitrosodialquilanilinas con bases secundarias como la difenilmetafenilendiamina. Son sólidos cristalinos que presentan un característico brillo metálico verde ; son fácilmente solubles en agua y tiñen de rojo o violeta. Son bases fuertes y forman sales monoácidas estables . Su solución alcohólica muestra fluorescencia amarillo-roja . ^{[ 3 ]}

La fenosafranina no es muy estable en estado libre ; su cloruro forma placas verdes . Puede diazotizarse fácilmente, y la sal de diazonio, al hervir con alcohol, produce aposafranina o bencenoindulina, C ₁₈ H ₁₂ N ₃ . Friedrich Kehrmann demostró que la aposafranina podía diazotizarse en presencia de ácido sulfúrico concentrado frío , y la sal de diazonio, al hervir con alcohol, producía sales de fenilfenazonio. La aposafranona, C ₁₈ H ₁₂ N ₂ O, se forma calentando aposafranina con ácido clorhídrico concentrado . Estos tres compuestos pueden representarse como orto- o para - quinonas . La "safranina" comercial es una orto -tolusafranina. El primer colorante de anilina que se preparó a escala industrial fue la mauveína (1856), obtenida por Sir William Henry Perkin calentando anilina cruda con dicromato de potasio y ácido sulfúrico. ^{[ 3 ]}

La mauveína fue convertida en parasafranina (1,8-dimetilsafranina) por Perkin en 1878 mediante la pérdida oxidativa / reductiva del grupo 7 N - para -tolilo. ^{[ 4 ]} Otra safranina bien conocida es la fenosafranina (CI 50200, cloruro de 3,7-diamino-5-fenilfenazinio), ampliamente utilizada como colorante histológico, fotosensibilizador y sonda redox. ^{[ 5 ]}