La técnica de selección es un método para amplificar y multiplexar ADN genómico. [ 1 ]
Proceso
El ADN genómico se digiere con enzimas de restricción , se circulariza mediante hibridación con selectores y posteriormente se une a una secuencia vectora mediante ligación . El procedimiento da como resultado moléculas de ADN circular con un motivo de par de cebadores generales incorporado , que pueden utilizarse para la amplificación mediante PCR o RCA .
Construcción de selector
Un selector consta de dos oligonucleótidos, un oligonucleótido vector y una sonda selectora . [ 1 ] Juntos forman un selector con extremos específicos del objetivo a cada lado de un motivo de cebador general.
Mecanismos de selección
- Una sonda selectora se hibrida con ambos extremos del objetivo seleccionado.
- Una sonda selectora se hibrida con un extremo al extremo 3' del objetivo y el otro extremo a una secuencia interna del objetivo. El extremo 5' sobresaliente se escinde mediante la polimerasa Taq .
Referencias
Publicaciones
- Demostración del método de selección
- El software PieceMaker para el diseño de experimentos de selección
- ADN