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Articulo de referencia

tinción supravital

Tinción supravital de una muestra de sangre humana de un paciente con anemia hemolítica . Los reticulocitos son las células con puntos azul oscuro y estructuras lineales curvas ...

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Tinción supravital de una muestra de sangre humana de un paciente con anemia hemolítica . Los reticulocitos son las células con puntos azul oscuro y estructuras lineales curvas (retículo) en el citoplasma.

La tinción supravital es un método de tinción utilizado en microscopía para examinar células vivas extraídas de un organismo. Se diferencia de la tinción intravital , que se realiza inyectando u introduciendo el colorante en el cuerpo. Por lo tanto, una tinción supravital puede tener mayor toxicidad , ya que solo unas pocas células necesitan sobrevivir durante un breve período. Algunos autores utilizan el término " tinción vital " para referirse específicamente a una tinción intravital, mientras que otros lo emplean indistintamente con una tinción supravital, siendo el concepto fundamental que la célula examinada aún está viva. Dado que las células están vivas y no fijadas, fuera del cuerpo, las tinciones supravitales son de naturaleza temporal. [ 1 ] [ 2 ]

La tinción supravital más común se realiza en reticulocitos utilizando azul de metileno nuevo o azul de cresilo brillante , lo que permite observar el patrón reticulofilamentoso de los ribosomas que se precipitan característicamente en estos glóbulos rojos inmaduros vivos mediante las tinciones supravitales. Al contar el número de estas células, se puede determinar la tasa de formación de glóbulos rojos, lo que proporciona información sobre la actividad de la médula ósea y la anemia . [ 3 ] Esto contrasta con la tinción vital , en la que el colorante empleado es uno que se excluye de las células vivas, de modo que solo las células muertas se tiñen positivamente. (Las tinciones vitales incluyen colorantes como el azul de tripano y el yoduro de propidio , que son demasiado voluminosos o tienen demasiada carga para atravesar la membrana celular, o que son expulsados ​​rápidamente por las células vivas).

La tinción supravital puede combinarse con la tinción de anticuerpos de superficie celular ( inmunofluorescencia ) para aplicaciones como el análisis FACS . [ 4 ] La inmunofluorescencia también puede realizarse en el interior de células vivas mediante la permeabilización celular reversible con el detergente Triton X-100 . Ajustado cuidadosamente a la concentración apropiada para el número de células, el pretratamiento puede permitir el acceso de moléculas de entre 1 y 150 kilodaltons al interior de la célula. [ 5 ] Aunque los anticuerpos pueden usarse de manera similar en este contexto, el término "tinción supravital" generalmente se reserva para sustancias químicas más pequeñas que poseen propiedades adecuadas intrínsecamente.

Ejemplos de colorantes supravitales comunes

Colorantes supravitales para glóbulos rojos: [ 6 ]

Referencias

  1. ↑ "Diccionario médico inglés" .
  2. ↑ N. Chandler Foot (1954). "Tinción vital". Anales de la Academia de Ciencias de Nueva York . 59 (2): 259– 267. doi : 10.1111/j.1749-6632.1954.tb45936.x . PMID 13229212 . 
  3. ↑ John P. Greer; Maxwell Myer Wintrobe (2008). Hematología clínica de Wintrobe . ISBN 9780781765077.
  4. ↑ Tina Carlsen; Richard Langlois; Erin Bissell. "Informe final de prueba de concepto del sistema de inmunoensayo/tinción vital (IVSS)" (PDF) . Laboratorio Nacional Lawrence Livermore.
  5. ↑ Anne L van de Ven, Karen Adler-Storthz y Rebecca Richards-Kortum (2009). "Administración de agentes de contraste óptico mediante Triton-X100, Parte 1: Permeabilización reversible de células vivas para el marcaje intracelular" . J Biomed Opt . 14 (2): 021012. doi : 10.1117/1.3090448 . PMC 2748244. PMID 19405725 .  {{cite journal}}: CS1 maint: varios nombres: lista de autores ( enlace )
  6. ↑ Glosario de hematología, microscopía clínica y fluidos corporales de CAP (2011)