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La tétrada está formada por cuatro esporas producidas tras la meiosis de una levadura u otro Ascomycota , Chlamydomonas u otra alga , o una planta . Tras el apareamiento de los haploides parentales, se producen diploides. En condiciones ambientales adecuadas, los diploides esporulan y experimentan meiosis. Los productos meióticos, las esporas, permanecen empaquetados en el cuerpo celular parental para formar la tétrada.
Tipificación genética
Si ambos progenitores tienen una mutación en dos genes diferentes, la tétrada puede segregar estos genes como el ditipo parental ( PD ), el ditipo no parental (NPD) o como el tetratipo (TT). [ 1 ]
El ditipo parental es un tipo tétrada que contiene dos genotipos diferentes , ambos parentales. Una disposición de esporas en ascomicetos que contiene solo las dos ascosporas de tipo no recombinante .
El ditipo no parental (NPD) es una espora que contiene solo las dos ascosporas de tipo recombinante (suponiendo dos loci segregantes). Un tipo tétrada contiene dos genotipos diferentes, ambos recombinantes.
Un tetratipo es una tétrada que contiene cuatro genotipos diferentes: dos parentales y dos recombinantes. En los ascomicetos, una disposición de esporas que consta de dos esporas parentales y dos recombinantes indica un único entrecruzamiento entre dos loci ligados.
análisis de ligamiento
La proporción entre los diferentes tipos de segregación que surgen después de la esporulación es una medida del ligamiento entre los dos genes.
Disección de tétradas
La disección de tétradas se ha convertido en una herramienta poderosa para los genetistas de levaduras, y se utiliza junto con muchos procedimientos establecidos que aprovechan la versatilidad de las levaduras como organismos modelo . El uso de técnicas modernas de microscopía y micromanipulación permite separar las cuatro esporas haploides de una tétrada de levadura y germinarlas individualmente para formar colonias de esporas aisladas.
Usos
El análisis de tétradas puede utilizarse para confirmar si un fenotipo es causado por una mutación específica, para la construcción de cepas y para investigar la interacción génica. Dado que la frecuencia de los tipos de segregación de tétradas está influenciada por la frecuencia de recombinación de los dos marcadores, los datos de segregación pueden utilizarse para calcular la distancia genética entre los marcadores si están cerca en el mismo cromosoma. Los análisis de tétradas también han contribuido a la detección y el estudio de los fenómenos de conversión génica y segregación postmeiótica. [ 2 ] Estos estudios han demostrado ser fundamentales para comprender el mecanismo de la recombinación meiótica, que a su vez es clave para comprender la función adaptativa de la reproducción sexual. El uso de tétradas en el análisis genético de estructura fina se describe en los artículos Neurospora crassa y Conversión génica .
Procedimiento general
Se realizan cruces entre cepas de apareamiento haploides MATa y MATα , y luego los diploides resultantes se transfieren a un medio de esporulación para formar una tétrada que contiene cuatro esporas haploides. Posteriormente, las tétradas se pueden preparar con zimoliasa u otra enzima para digerir la pared del asco. Finalmente, las esporas se separan con una aguja de micromanipulador y se depositan en posiciones separadas en una placa de Petri .
Herramientas
Tradicionalmente, la disección de tétradas se ha considerado una técnica compleja y poco convencional. [ 3 ] Sin embargo, desde entonces se han desarrollado instrumentos específicos para la disección de tétradas; los más avanzados permiten una separación fácil y semiautomatizada de las mismas. La mayoría de los micromanipuladores utilizan una aguja de fibra de vidrio a la que se adhieren las esporas debido a la formación de un menisco de agua entre el agar y la aguja.
Véase también
Referencias
- ↑ Perkins, DD (1962). " Entrecruzamiento e interferencia en un brazo cromosómico con múltiples marcas de Neurosopora" . Genetics . 47 : 1253–1274 . PMC 1210405. PMID 13942437 .
- ↑ Whitehouse, HLK. Recombinación genética. Nueva York: Wiley; 1982. ISBN 978-0471102052
- ↑ Protocolos de levadura: Métodos en biología celular y molecular, Ivor Howell Evan, Publicado por Humana Press, 1996, ISBN 0-89603-319-8, ISBN 978-0-89603-319-1
Enlaces externos
- "Cruces, diploides y tétradas" Archivado el 29/08/2008 en Wayback Machine
- Genética de los hongos
- Genética vegetal