Articulo de referencia

Rojo de Texas

La solución contenida en el frasco (15 ml) tiene 0,009 mg/ml de Rojo Texas en DMF . El polvo a granel es de color púrpura oscuro. El Texas Red o cloruro de ácido sulforodamina 1...

La solución contenida en el frasco (15 ml) tiene 0,009 mg/ml de Rojo Texas en DMF . El polvo a granel es de color púrpura oscuro.

El Texas Red o cloruro de ácido sulforodamina 101 es un colorante fluorescente rojo , utilizado en histología para teñir muestras celulares, para clasificar células con máquinas de clasificación celular activadas por fluorescencia , en aplicaciones de microscopía de fluorescencia y en inmunohistoquímica . [ 1 ] [ 2 ] El Texas Red fluoresce a unos 615 nm, y el pico de su espectro de absorción está a 589 nm. El polvo es de color púrpura oscuro. Las soluciones pueden ser excitadas por un láser de colorante sintonizado a 595-605 nm, o con menor eficiencia por un láser de kriptón a 567 nm. El coeficiente de extinción de absorción a 596 nm es de aproximadamente 85 000 M −1 cm −1 .     

El compuesto suele ser una mezcla de dos cloruros de monosulfonilo, como se muestra en la imagen, o con los grupos SO₃ y SO₂Cl intercambiados . Puede utilizarse como marcador de proteínas, con las que forma fácilmente conjugados a través del grupo cloruro de sulfonilo (SO₂Cl ) . En agua, el grupo cloruro de sulfonilo de las moléculas de Texas Red sin reaccionar se hidroliza a sulfonato , y la molécula se convierte en la sulforodamina 101 , muy soluble en agua y fácil de eliminar selectivamente mediante lavado. Esta es una de las ventajas de la conjugación con Texas Red frente al uso de un isotiocianato de rodamina para la conjugación.

Una proteína con el cromóforo Texas Red unido puede actuar como agente de marcaje fluorescente; un anticuerpo con un marcador fluorescente se unirá a un antígeno específico y mostrará la ubicación de los antígenos como puntos brillantes al ser irradiado. Es relativamente brillante, por lo que puede utilizarse para detectar incluso antígenos con baja expresión . Otras moléculas también pueden marcarse con Texas Red, por ejemplo, diversas toxinas. El colorante se disuelve muy bien en agua y en otros disolventes polares, como la dimetilformamida y el acetonitrilo .

El Texas Red, unido a una cadena de ADN o ARN, se puede utilizar en la hibridación fluorescente in situ (FISH) como marcador molecular para resaltar secuencias específicas de ADN . El Texas Red se puede combinar con otro fluoróforo . A menudo se utiliza un conjugado en tándem de Texas Red con R- ficoeritrina ( PE-Texas Red ).

Los fluoróforos, como el Texas Red, se utilizan comúnmente en técnicas de biología molecular como la RT-PCR cuantitativa y los ensayos celulares . [ 3 ]

Los derivados de rodamina más recientes , como Alexa 594 y DyLight 594 , se han diseñado para que coincidan con los espectros de excitación y emisión del Rojo de Texas y se utilizan en diversas aplicaciones químicas y biológicas donde se necesita una mayor fotoestabilidad o una mayor intensidad de fluorescencia.

Referencias

  1. Titus JA; Haugland R; Sharrow SO; Segal DM (1982). "Texas Red, un fluoróforo hidrofílico de emisión roja para usar con fluoresceína en estudios de microfluorometría de flujo de doble parámetro y microscopía de fluorescencia". J. Immunol. Methods . 50 (2): 193– 204. doi : 10.1016/0022-1759(82)90225-3 . PMID 6806389 . 
  2. Información del producto Sigma-Aldrich sobre el cloruro ácido de sulforodamina 101
  3. Ahmad AI; Ghasemi JB (2007). " Nuevos cebadores FRET para PCR cuantitativa en tiempo real". Anal Bioanal Chem . 387 (8): 2737–43 . doi : 10.1007/s00216-007-1123-4 . PMID 17308892. S2CID 39968312 .