Cromatograma de masas

Un cromatograma de masas es una representación de datos de espectrometría de masas como un cromatograma , donde el eje x representa el tiempo y el eje y representa la intensidad de la señal. ^[1] Los datos de origen contienen información de masa; sin embargo, no se representa gráficamente en un cromatograma de masas a favor de visualizar la intensidad de la señal en función del tiempo. El uso más común de esta representación de datos es cuando la espectrometría de masas se utiliza junto con alguna forma de cromatografía , como en la cromatografía líquida-espectrometría de masas o la cromatografía de gases-espectrometría de masas . En este caso, el eje x representa el tiempo de retención, análogo a cualquier otro cromatograma. El eje y representa la intensidad de la señal o la intensidad relativa de la señal. Hay muchos tipos diferentes de métricas que esta intensidad puede representar, dependiendo de qué información se extraiga de cada espectro de masas.

El cromatograma de corriente iónica total (TICC) representa la intensidad sumada en todo el rango de masas que se detectan en cada punto del análisis. ^{[2] [3]} El rango suele ser de varios cientos de unidades de masa a carga o más. En muestras complejas, el TICC a menudo proporciona información limitada ya que varios analitos eluyen simultáneamente, lo que oculta especies individuales.

El cromatograma de pico base es similar al TICC, sin embargo, solo monitorea el pico más intenso en cada espectro. ^{[4] [3]} Esto significa que el cromatograma de pico base representa la intensidad del pico más intenso en cada punto del análisis. Los cromatogramas de pico base suelen tener un aspecto más limpio y, por lo tanto, son más informativos que los cromatogramas TIC porque el fondo se reduce al centrarse en un solo analito en cada punto.

En un cromatograma de iones extraídos (EIC o XIC), también llamado cromatograma de iones reconstruidos (RIC), uno o más valores m/z que representan uno o más analitos de interés se recuperan ('extraen') de todo el conjunto de datos para una ejecución cromatográfica. ^[3] La intensidad total o la intensidad del pico base dentro de una ventana de tolerancia de masa alrededor de la relación masa-carga de un analito en particular se grafica en cada punto del análisis. El tamaño de la ventana de tolerancia de masa generalmente depende de la precisión de masa y la resolución de masa del instrumento que recopila los datos. Esto es útil para volver a examinar los datos para detectar analitos previamente insospechados, resaltar isómeros potenciales, resolver sustancias coeluyentes sospechosas o proporcionar cromatogramas limpios de compuestos de interés. Un cromatograma de iones extraídos se genera separando los iones de interés de un archivo de datos que contiene el espectro de masa completo a lo largo del tiempo después del hecho; Esto es diferente de los cromatogramas de iones seleccionados, que se analizan a continuación, en los que se recopilan datos solo para valores de m/z específicos. Un término estrechamente relacionado es el cromatograma de compuestos extraídos (ECC).

Un cromatograma de monitoreo de iones seleccionados (SIM) es similar a un EIC/XIC, con la excepción de que el espectrómetro de masas se opera en modo SIM, de modo que solo se detectan valores m/z preseleccionados en el análisis. ^[5] Los experimentos SIM se pueden realizar utilizando instrumentos de espectrometría de masas (MS) o espectrometría de masas en tándem (MS/MS). Son más comunes en los instrumentos MS. Esto difiere significativamente del cromatograma de iones extraídos mencionado anteriormente en que solo se recopilan datos para el ion o los iones de interés en un experimento SIM; para los cromatogramas de iones extraídos (EIC o XIC), se recopilan datos para un rango de masa completo durante la ejecución y luego se examinan para analitos de interés una vez completada la ejecución.

El experimento de monitoreo de reacción seleccionada (SRM) es muy similar al experimento SIM, excepto que se utiliza la espectrometría de masas en tándem y se detecta un ion producto específico de un ion parental específico. ^[3] Primero se selecciona la masa del analito parental mientras se filtran otros iones. Luego, el ion analito parental se fragmenta en la fase gaseosa y se monitorea un ion fragmento específico. Este experimento tiene una especificidad muy alta porque el cromatograma SRM representa solo iones de una masa particular que se fragmentan de una manera que produce una masa de producto muy específica. Este tipo de experimento solo se puede realizar utilizando espectrometría de masas en tándem. El progreso tecnológico en el área MS/MS condujo al desarrollo de MRM, monitoreo de reacción múltiple, que permite la detección simultánea de varios analitos coeluyentes con diferentes iones parentales y/o productos.

• Espectro de masas