Apareamiento triparental

El apareamiento triparental es una forma de conjugación bacteriana en la que un plásmido conjugativo presente en una cepa bacteriana ayuda a la transferencia de un plásmido movilizable presente en una segunda cepa bacteriana a una tercera cepa bacteriana. ^[1] Los plásmidos se introducen en bacterias con fines tales como transformación , clonación o mutagénesis por transposón . Los apareamientos triparentales pueden ayudar a superar algunas de las barreras para la movilización eficiente de plásmidos. Por ejemplo, si el plásmido conjugativo y el plásmido movilizable son miembros del mismo grupo de incompatibilidad, no necesitan coexistir de manera estable en la segunda cepa bacteriana para que se transfiera el plásmido movilizable.

Historia

El apareamiento triparental se identificó en levaduras en 1960 y luego en Escherichia coli en 1962. ^[2]

Proceso

Requisitos

Una cepa auxiliar , que lleva un plásmido conjugativo (como el plásmido F ) que codifica los genes necesarios para la conjugación y la transferencia de ADN .
Una cepa donante , que lleva un plásmido movilizable que puede utilizar las funciones de transferencia del plásmido conjugativo.
Una cepa receptora en la que desea introducir el plásmido movilizable.

Se requieren de cinco a siete días para determinar si el plásmido se introdujo con éxito en la nueva cepa bacteriana y confirmar que no hay transferencia de la cepa auxiliar o donante.

Por el contrario, la electroporación no requiere una cepa donante o auxiliar, lo que ayuda a evitar la posible contaminación con otras cepas. La introducción del plásmido en la cepa receptora se puede verificar en dos días, lo que hace que la electroporación sea un método de transformación más rápido y eficiente. Sin embargo, la electroporación no funciona con todas las bacterias y se limita principalmente a organismos modelo bien caracterizados.

Véase también

Enlaces externos

Protocolo para P. aeruginosa

Referencias

^ Wise, Arlene A.; Liu, Zhenying; Binns, Andrew N. (2006), Wang, Kan (ed.), "Tres métodos para la introducción de ADN extraño en Agrobacterium", Agrobacterium Protocols , vol. 343, Totowa, NJ: Humana Press, págs. 43-54, doi :10.1385/1-59745-130-4:43, ISBN 978-1-59745-130-7, PMID 16988332 , consultado el 13 de junio de 2022
^ Fischer-Fantuzzi, L; Di Girolamo, M (25 de octubre de 1961). "Apareamientos tripparentales en Escherichia Coli". Genética . 46 (10): 1305-1315. doi : 10.1093/genética/46.10.1305. ISSN 1943-2631. PMC 1210142 . PMID 13893172.

[1] Wise, Arlene A.; Liu, Zhenying; Binns, Andrew N. (2006), Wang, Kan (ed.), "Tres métodos para la introducción de ADN extraño en Agrobacterium", Agrobacterium Protocols , vol. 343, Totowa, NJ: Humana Press, págs. 43-54, doi :10.1385/1-59745-130-4:43, ISBN 978-1-59745-130-7, PMID 16988332 , consultado el 13 de junio de 2022

[2] Fischer-Fantuzzi, L; Di Girolamo, M (25 de octubre de 1961). "Apareamientos tripparentales en Escherichia Coli". Genética . 46 (10): 1305-1315. doi : 10.1093/genética/46.10.1305. ISSN 1943-2631. PMC 1210142 . PMID 13893172.