Tripsinización

La tripsinización es un proceso de disociación celular que utiliza tripsina , una enzima proteolítica que degrada las proteínas, para separar las células adheridas al recipiente de cultivo. Al añadirse al cultivo celular, la tripsina degrada las proteínas que permiten la adhesión celular al recipiente. La tripsinización se utiliza frecuentemente para transferir células a un nuevo recipiente. Una vez finalizado el proceso, las células quedan en suspensión y presentan una forma redondeada.

Para fines experimentales, las células suelen cultivarse en recipientes con forma de matraces o placas de plástico. En estos recipientes, las células reciben un medio de cultivo que contiene los nutrientes esenciales necesarios para su proliferación, y se adhieren al recipiente y entre sí a medida que crecen.

Este proceso de cultivo celular o de tejidos requiere un método para disociar las células del recipiente y entre sí. La tripsina, una enzima común en el tracto digestivo , puede utilizarse para digerir las proteínas que facilitan la adhesión al recipiente y entre las células.

Una vez que las células se han desprendido de su contenedor, es necesario desactivar la tripsina, a menos que sea sintética, ya que las proteínas de la superficie celular también se degradarán con el tiempo, lo que afectará el funcionamiento celular. ^{[ 1 ]} Se puede usar suero para inactivar la tripsina, ya que contiene inhibidores de proteasas. ^{[ 2 ]} Debido a la presencia de estos inhibidores, el suero debe eliminarse antes de tratar un recipiente de cultivo con tripsina y no debe volver a añadirse al recipiente hasta que las células se hayan desprendido de su superficie de crecimiento; este desprendimiento puede confirmarse mediante observación visual con un microscopio.

La tripsinización se utiliza a menudo para permitir el paso de células adherentes a un nuevo recipiente, para su observación con fines experimentales o para reducir el grado de confluencia en un matraz de cultivo mediante la eliminación de un porcentaje de las células.