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proteína fluorescente amarilla

Proteína fluorescente amarilla, Zoanthus La proteína fluorescente amarilla ( YFP ) es una mutación genética de la proteína fluorescente verde (GFP), derivada originalmente de la...

Proteína fluorescente amarilla, Zoanthus

La proteína fluorescente amarilla ( YFP ) es una mutación genética de la proteína fluorescente verde (GFP), derivada originalmente de la medusa Aequorea victoria . [ 1 ] Su pico de excitación es de 513  nm y su pico de emisión es de 527  nm. [ 2 ] Al igual que la GFP original, la YFP es una herramienta útil en biología celular y molecular porque los picos de excitación y emisión de la YFP son distinguibles de los de la GFP, lo que permite el estudio de múltiples procesos/proteínas en un mismo experimento.

Tres versiones mejoradas de YFP son Citrine, Venus y Ypet. Tienen menor sensibilidad al cloruro, maduración más rápida y mayor brillo (definido como el producto del coeficiente de extinción y el rendimiento cuántico ). Normalmente, YFP actúa como aceptor para sensores FRET codificados genéticamente , cuyo donante más probable es la proteína fluorescente cian monomérica (mCFP). El desplazamiento al rojo con respecto a GFP se debe a una interacción de apilamiento Pi-Pi como resultado de la sustitución T203Y introducida por mutación, que esencialmente aumenta la polarizabilidad del entorno local del cromóforo , además de proporcionar densidad electrónica adicional al cromóforo.

"Venus" contiene una novedosa sustitución de aminoácidos –F46L– que acelera la oxidación del cromóforo a 37 °C, la etapa limitante de la velocidad de maduración. La proteína tiene otras sustituciones (F64L/ M153T/ V163A/ S175G), que permiten que Venus se pliegue correctamente y le confieren una tolerancia relativa a la acidosis y al Cl⁻ . [ 3 ]

Evolución de YFP a partir de GFP

Se necesitaron cuatro mutaciones proteicas de la GFP de tipo silvestre encontrada en la medusa Aequorea Victoria para crear el mutante YFP. La mutación más importante fue el reemplazo de treonina por tirosina en la posición del residuo 203 [ 1 ] (la sustitución se denota como T203Y, donde T e Y representan el código de una letra para los aminoácidos treonina y tirosina, respectivamente).

Véase también

Referencias

  1. 1 2 Ormö, Mats; Cubitt, Andrew B.; Kallio, Karen; Gross, Larry A.; Tsien, Roger Y.; Remington, S. James (1996-09-06). "Estructura cristalina de la proteína fluorescente verde de Aequorea victoria" . Science . 273 (5280): 1392– 1395. Bibcode : 1996Sci...273.1392O . doi : 10.1126/science.273.5280.1392 . ISSN 0036-8075 . PMID 8703075 .  
  2. Lambert, Talley. "EYFP en FPbase" . FPbase . Consultado el 22 de febrero de 2021 .
  3. Nagai, T; Ibata, K; Park, ES; Kubota, M; Mikoshiba, K; Miyawaki, A (2002). "Una variante de la proteína fluorescente amarilla con maduración rápida y eficiente para aplicaciones de biología celular". Nature Biotechnology . 20 (1): 87– 90. doi : 10.1038/nbt0102-87 . PMID 11753368 . 
  • Introducción a las proteínas fluorescentes
  • EYFP en FPbase
  • Miyawaki, Atsushi; Llopis, Juan; Heim, Roger; McCaffery, J. Michael; Adams, Joseph A.; Ikura, Mitsuhiko; Tsien, Roger Y. (1997). "Indicadores fluorescentes para Ca2+ basados ​​en proteínas fluorescentes verdes y calmodulina" . Nature . 388 (6645): 882–7 . doi : 10.1038/42264 . PMID 9278050 .