péptidos 2A

Los péptidos 2A son una clase de péptidos de 18 a 22 aminoácidos que pueden inducir el salto ribosomal durante la traducción de una proteína en una célula biológica. [ 1 ] [ 2 ] Estos péptidos comparten un motivo de secuencia central DxExNPGP y se ^{encuentran en una amplia gama de} familias virales . Los péptidos 2A pueden introducirse artificialmente para ayudar a generar poliproteínas a partir de un único ORF , provocando que el ribosoma falle en la formación de un enlace peptídico y luego reanude la traducción. ^{[ 3 ] [ 4 ]}

Los péptidos 2A reciben su nombre del virus en el que fueron descritos por primera vez. Por ejemplo, F2A, el primer péptido 2A descrito, proviene del virus de la fiebre aftosa . El nombre "2A" deriva del esquema de numeración genética de este virus. ^{[ 1 ] [ 5 ]}

Estos péptidos también se conocen como péptidos "autocortables" , lo cual es un término erróneo, ya que el enlace peptídico faltante nunca es sintetizado por el ribosoma y, por lo tanto, no se escinde.

El virus de la fiebre aftosa (FMDV) es un virus del género Aphthovirus que causa la fiebre aftosa en el ganado vacuno . ^{[ 6 ]} Como miembro de la familia Picornaviridae , el FMDV es un virus de ARN monocatenario de sentido positivo .

La proteína 2A se localiza entre las proteínas de la cápside y las polimerasas y proteasas necesarias para el ensamblaje de la cápside en las etapas tardías de la infección. El salto ribosomal incompleto durante la traducción del ARN viral mediada por la proteína 2A provoca, en algunos casos, la "caída del ribosoma", tras lo cual la traducción no se reinicia. Esto conlleva una prevalencia de las proteínas N-terminales y permite una mayor producción de proteínas estructurales en relación con las proteínas no estructurales. ^{[ 7 ]}

Cuatro miembros de la familia de péptidos 2A se utilizan frecuentemente en la investigación en ciencias biológicas. Estos son P2A, E2A, F2A y T2A. F2A se deriva del virus de la fiebre aftosa 18; E2A se deriva del virus de la rinitis equina A ; P2A se deriva del teschovirus porcino -1 2A; T2A se deriva del virus thosea asigna 2A. ^{[ 1 ]}

La siguiente tabla muestra las secuencias de cuatro miembros de los péptidos 2A. Agregar el enlazador opcional “ G S G ” (Gly-Ser-Gly) en el extremo N-terminal de un péptido 2A ayuda a mejorar la eficiencia. ^{[ 8 ]}

Los péptidos 2A inducen al ribosoma a omitir la formación del enlace peptídico entre la glicina (G) y la prolina (P) cerca del extremo C del péptido 2A, lo que resulta en que el péptido ubicado corriente arriba del péptido 2A tenga aminoácidos adicionales unidos a su extremo C, mientras que la proteína ubicada corriente abajo del péptido 2A tendrá una prolina adicional en su extremo N. El mecanismo molecular exacto de la escisión mediada por el péptido 2A aún se desconoce. ^{[ 9 ] [ 10 ]} Sin embargo, se cree que implica una "omisión" ribosomal de la formación del enlace peptídico glicil-prolil en lugar de una verdadera escisión proteolítica. ^{[ 11 ] [ 12 ]}

En biología molecular, los péptidos 2A se utilizan para expresar dos proteínas distintas a partir de un único marco de lectura abierto. Los péptidos 2A pueden emplearse cuando la fusión directa de proteínas no funciona o no es deseable.

Los diferentes péptidos 2A tienen diferentes eficiencias de salto de enlace peptídico, siendo T2A y P2A los más eficientes y F2A el menos eficiente. ^{[ 13 ] [ 14 ]} Por lo tanto, hasta el 50% de las proteínas vinculadas a F2A pueden producirse como una proteína de fusión , lo que podría causar algunos resultados impredecibles, incluyendo una ganancia de función. ^{[ 15 ]} Un estudio informó que los sitios 2A hacen que el ribosoma se desprenda aproximadamente el 60% del tiempo, y que, junto con la lectura del ribosoma de alrededor del 10% para P2A y T2A, esto resulta en una reducción de la expresión de la cadena peptídica corriente abajo en aproximadamente el 70%. ^{[ 1 ]} Sin embargo, el nivel de desprendimiento detectado en este estudio varió ampliamente dependiendo de la construcción exacta utilizada, con algunas construcciones que mostraron poca evidencia de desprendimiento; Además, dentro de una transcripción tricistrónica, se observó un mayor nivel de desprendimiento de ribosomas después de una secuencia 2A que después de dos secuencias 2A combinadas, lo cual contradice un modelo lineal de traducción.

• IRES
• ADN recombinante