Alexa Fluor

La familia de colorantes fluorescentes Alexa Fluor es una serie de colorantes inventados por Molecular Probes , ahora parte de Thermo Fisher Scientific , y comercializados bajo la marca Invitrogen. Los colorantes Alexa Fluor se utilizan frecuentemente como marcadores de células y tejidos en microscopía de fluorescencia y biología celular . ^{[ 1 ]} Los colorantes Alexa Fluor pueden conjugarse directamente a anticuerpos primarios o secundarios para amplificar la señal y la sensibilidad ^{[ 2 ]} u otras biomoléculas.

Los espectros de excitación y emisión de la serie Alexa Fluor cubren el espectro visible y se extienden hasta el infrarrojo . ^{[ 3 ]} Los miembros individuales de la familia se numeran aproximadamente según sus máximos de excitación en nanómetros .

Richard y Rosaria Haugland , fundadores de Molecular Probes , son reconocidos en biología y química por su investigación sobre colorantes fluorescentes útiles en aplicaciones de investigación biológica. En el momento de la fundación de Molecular Probes, estos productos eran prácticamente inaccesibles comercialmente. Varios colorantes fluorescentes de uso generalizado en la actualidad fueron descubiertos y desarrollados en los laboratorios de Molecular Probes, como el Rojo Texas , el Azul Cascade, el Verde Oregon, el Azul Marina y la familia Alexa Fluor. Los más famosos de estos, la familia de colorantes Alexa Fluor, fueron diseñados para mejorar las propiedades de familias de colorantes fluorescentes biológicos desarrolladas previamente y solucionar algunos de sus problemas. Los colorantes Alexa Fluor recibieron su nombre en honor a Alex Haugland, hijo de Richard y Rosaria Haugland.

Molecular Probes fue adquirida en 2003 por Invitrogen , ^{[ 4 ]} que trabajó para expandir aún más la familia Alexa Fluor mediante la adición de nuevos colorantes para cubrir las áreas no cubiertas en el espectro de emisión. En 2008, Invitrogen y la línea de productos Alexa Fluor pasaron a formar parte de Life Technologies , tras la fusión de Invitrogen con Applied Biosystems . En 2014, Life Technologies fue adquirida por Thermo Fisher Scientific , que revitalizó el nombre y la marca Invitrogen , recuperando la línea de productos Alexa Fluor.

Los colorantes Alexa Fluor se sintetizaron químicamente mediante sulfonación y modificaciones químicas adicionales aplicadas a las conocidas familias de colorantes de cumarina , rodamina y cianina , así como a la familia del xanteno (de la cual forma parte la fluoresceína , un estándar de la industria ). La sulfonación confirió a los colorantes Alexa Fluor resultantes una carga negativa , haciéndolos más hidrofílicos y solubles que sus colorantes originales; las modificaciones adicionales se destinaron a mejorar el rendimiento del colorante en otras áreas. Por ejemplo, Alexa Fluor 488, una forma sulfonada y modificada químicamente de fluoresceína, se diseñó para resolver los conocidos problemas de fotoblanqueo rápido e intensidad de fluorescencia dependiente del pH, característicos del colorante isotiocianato de fluoresceína .

Los colorantes de la serie Alexa Fluor son menos sensibles al pH y más fotoestables que los colorantes originales ( fluoresceína , rodamina , etc.) de los que se sintetizaron. Si bien se conocen los coeficientes de extinción de cada miembro de esta línea de colorantes (véase la tabla), no se conocen sus rendimientos cuánticos ni sus tiempos de vida . Las comparaciones de brillo también suelen ser favorables.

Otras líneas de productos comerciales ofrecen alternativas a los colorantes Alexa Fluor. Las comparaciones con otros colorantes son menos consistentes y, además, más delicadas, dependiendo de las condiciones y técnicas empleadas. Dichas comparaciones deben considerarse en función de las condiciones y técnicas utilizadas, así como del rendimiento del colorante (señal, fondo, estabilidad) requerido.

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• Hullin-Matsuda, F.; Murate, M.; Kobayashi, T. (25 de septiembre de 2018). "Sondas proteicas para visualizar esfingomielina y ceramida fosfoetanolamina". Chem . Phys. Lipids . 216 : 132–141 . doi : 10.1016/j.chemphyslip.2018.09.002 . PMID 30194925. S2CID 52179117 .   Revisión de una aplicación de visualización de lípidos de Alexa Fluor.
• Kozma, E.; Jayasekara, PS; Squarcialupi, L.; Paoletta, S.; Moro, S.; Federico, S.; Spalluto, G.; Jacobson, KA (1 de enero de 2013). "Ligandos fluorescentes para receptores de adenosina" . Bioorg. Medicina. Química. Lett . 23 (1): 26– 36. doi : 10.1016/j.bmcl.2012.10.112 . PMC 3557833 . PMID 23200243 .   Revisión de un conjunto de fluoróforos basados ​​en Alexa Fluor (AF) 488 para estudios de unión a receptores. El artículo presenta las estructuras de AF488 y AF532, así como un amplio conjunto de otros fluoróforos estándar como Cy5 , Texas Red , EVOBlue, FITC , NBD, Dansyl , 1- Pyrene y diversos complejos de Bodipy.

• Tabla de datos adicional con estructuras moleculares