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Articulo de referencia

Coagulasa

Staphylococcus aureus utiliza la coagulasa para formar una capa de fibrina a partir del fibrinógeno presente en el torrente sanguíneo. Esto ayuda a la bacteria a evadir la detec...

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Staphylococcus aureus utiliza la coagulasa para formar una capa de fibrina a partir del fibrinógeno presente en el torrente sanguíneo. Esto ayuda a la bacteria a evadir la detección y la fagocitosis por parte del sistema inmunitario.

La coagulasa es una enzima proteica producida por diversos microorganismos que permite la conversión de fibrinógeno en fibrina . En el laboratorio , se utiliza para distinguir entre diferentes tipos de aislamientos de Staphylococcus . Es importante destacar que S. aureus suele ser coagulasa-positivo, lo que significa que una prueba de coagulasa positiva indicaría la presencia de S. aureus o de cualquiera de los otros 11 estafilococos coagulasa-positivos . [ 1 ] Una prueba de coagulasa negativa mostraría, en cambio, la presencia de organismos coagulasa-negativos como Staphylococcus epidermidis o Staphylococcus saprophyticus . Sin embargo, ahora se sabe que no todos los S. aureus son coagulasa-positivos. [ 2 ] [ 3 ] Mientras que los estafilococos coagulasa-positivos suelen ser patógenos , los estafilococos coagulasa-negativos se asocian con mayor frecuencia a infecciones oportunistas . [ 4 ]   

También es producida por Yersinia pestis . [ 5 ]

La coagulasa reacciona con la protrombina en la sangre. El complejo resultante se llama estafilotrombina , lo que permite que la enzima actúe como una proteasa para convertir el fibrinógeno, una proteína plasmática producida por el hígado, en fibrina. Esto produce la coagulación de la sangre. La coagulasa está fuertemente unida a la superficie de la bacteria S.  aureus y puede recubrir su superficie con fibrina al entrar en contacto con la sangre. El coágulo de fibrina puede proteger a la bacteria de la fagocitosis y aislarla de otras defensas del huésped. [ 6 ] Por lo tanto, la capa de fibrina puede hacer que la bacteria sea más virulenta. La coagulasa unida forma parte de la familia más amplia de proteínas de adhesión MSCRAMM .

prueba de coagulasa

La prueba de coagulasa se ha utilizado tradicionalmente para diferenciar Staphylococcus aureus de los estafilococos coagulasa-negativos . S. aureus produce dos formas de coagulasa (coagulasa unida y coagulasa libre). La coagulasa unida, también conocida como "factor de aglutinación" , se puede detectar mediante una prueba de coagulasa en portaobjetos, y la coagulasa libre se puede detectar mediante una prueba de coagulasa en tubo.

Prueba de diapositivas

Se realiza una prueba de coagulasa en portaobjetos con un control negativo para descartar la autoaglutinación. Se colocan dos gotas de solución salina en el portaobjetos etiquetado con el número de muestra, Prueba (T) y control (C). Las dos gotas de solución salina se emulsionan con el microorganismo de prueba utilizando un asa de siembra, un alambre recto o un palillo de madera. Se coloca una gota de plasma ( se recomienda plasma de conejo anticoagulado con EDTA ) [ 7 ] sobre la gota de solución salina inoculada correspondiente a la prueba y se mezcla bien; luego, el portaobjetos se agita suavemente durante unos 10 segundos.

  • Si el resultado es "positivo", se observaría una aglomeración macroscópica en el plasma en un plazo de 10 segundos, sin que se produjera aglomeración en la gota de solución salina.
  • Si el resultado es "negativo", no se observará ninguna aglomeración.

Si la prueba de coagulasa en portaobjetos es negativa, se debe realizar una prueba en tubo para confirmar el resultado. La aglutinación en ambas gotas indica autoaglutinación, por lo que se debe realizar una prueba en tubo. Esta prueba no se realiza en todas las instituciones, sino que la mayoría de los resultados dependen de los hemocultivos del laboratorio.

Prueba de tubo

Un coágulo de fibrina formado en un tubo de ensayo por la reacción de la coagulasa.

La prueba en tubo utiliza plasma de conejo inoculado con una colonia de estafilococos (cocos grampositivos catalasa positivos ). El tubo se incuba a 37  °C durante 1,5 horas. Si el resultado es negativo, la incubación se prolonga hasta 18 horas.

  • Si es 'positivo' (por ejemplo, la colonia sospechosa es S.  aureus ), el plasma se coagulará, [ 8 ] dando como resultado un coágulo (a veces el coágulo es tan pronunciado que el líquido se solidificará por completo).
  • Si el resultado es negativo, el plasma permanece líquido. Un resultado negativo podría deberse a S.  epidermidis , pero solo una prueba de identificación más detallada, como las pruebas bioquímicas o los métodos de análisis de perfiles , puede confirmarlo . Un falso negativo puede ocurrir si la muestra no se deja enfriar durante unos 30 minutos a temperatura ambiente o 10 minutos en el congelador, ya que el suero puede derretirse. Si el resultado es realmente negativo, el suero permanecerá líquido después de enfriarse.
  • Lista de estafilococos coagulasa positivos: Staphylococcus aureus subsp. anaerobio , S. aureus subsp. aureus , S. delphini , S. hyicus , S. intermedius , S. lutrae y Staphylococcus schleiferi subsp. coagulantes .
  • Lista de estafilococos coagulasa negativos de importancia clínica: S.  saprophyticus , S.cohnii subsp. cohnii , S. cohnii subsp. urealyticum , S. captitus subsp. captitus , S. warneri , S.hominis , S.epidermidis , S. caprae y S.  lugdunensis

Referencias

  1. ↑ Becker et al., 2014. PMID 25278577
  2. ↑ Ryan KJ, Ray CG (editores) (2004). Microbiología médica de Sherris (4.ª ed.). McGraw Hill. ISBN 0-8385-8529-9.
  3. ↑ Prueba previa, Cirugía, 12.ª ed., pág. 88
  4. ↑ González-Martín M, Suárez-Bonnet A, Tejedor-Junco MT (2020). "Factores de virulencia en estafilococos coagulasa-positivos de interés veterinario distintos de Staphylococcus aureus" . Veterinary Quarterly . 40 (1): 118– 131. doi : 10.1080/01652176.2020.1748253 . PMC 7178840. PMID 32223696 .  
  5. ↑ "coagulasa" en el Diccionario Médico de Dorland
  6. ↑ Tortora, Gerard J.; Funke, Berdell R.; Case, Christine L. (2013). Microbiología: Una introducción (11.ª ed.). Glenview, IL: Pearson Education Inc. pág. 434. ISBN   978-0-321-73360-3.
  7. ↑ A.Forbes, Betty; Daniel F.Sahm; Alice S.Weissfeld (1998). Microbiología diagnóstica de Bailey y Scott (Décima ed.). Don Ladig. págs. 430–431 . ISBN   0-8151-2535-6.
  8. ↑ "prueba de coagulasa" en el Diccionario Médico de Dorland