Daclatasvir

NS5A es un dímero de proteína fijadora de zinc que actúa como regulador en el ciclo de replicación del VHC. Contiene una hélice anfipática en el extremo amino y tres dominios diferentes con distintas afinidades de unión. El extremo N se une a las membranas celulares y es esencial para la formación de complejos de replicación. El dominio 1 (aminoácidos 401–60012) es una región de unión al ARN de NS5A y el dominio 2 participa en la replicación del ARN. El ensamblaje del virus está asociado al dominio 3. ^{[ 13 ]}

NS5A no solo se une a las membranas celulares, otras proteínas no estructurales del complejo de replicación del VHC y el ARN viral, sino también a cofactores como PI4KA . PI4KA es una quinasa que fosforila un grupo hidroxilo del fosfatidilinositol en su anillo de inositol en la posición cuatro. Esta fosforilación genera fosfatidilinositol 4-fosfato ( PI4P ), un sitio de unión que normalmente se encuentra en la membrana del Golgi . PI4P es necesario para el reclutamiento de proteínas efectoras que participan en las vesículas de transporte de lípidos. Por consiguiente, PI4P es crucial para el mantenimiento de la estructura de la membrana del Golgi y la secreción del Golgi. ^{[ 14 ]}

Al unirse a PI4KA en su dominio 1 y acumular PI4P lejos del aparato de Golgi, NS5A induce la formación de una red membranosa, una estructura de membrana que surge del retículo endoplasmático mediante el reclutamiento de vesículas lipídicas. El complejo de replicación del VHC se localiza en esta estructura reticular. A partir de estas membranas y gotas lipídicas, que han sido reclutadas mediante PI4P, los viriones pueden ensamblarse después de la replicación del ARN viral. ^{[ 15 ]}

La replicación del ARN y el ensamblaje de los viriones dependen de la proporción entre dos formas diferentes de NS5A. Según el grado de fosforilación de NS5A, se distingue entre NS5A (p56) y NS5A hiperfosforilada (p58). Un mayor grado de p58 parece inducir el ensamblaje del VHC, mientras que la ausencia de p58 conduce a la replicación del ARN. Sin embargo, el papel real de la fosforilación de NS5A no está claro. ^{[ 16 ] [ 17 ]}

Sin embargo, NS5A no solo regula la replicación y el ensamblaje del VHC, sino que también inhibe la apoptosis, por lo que la célula infectada no puede desintegrarse por sí misma y contener la infección, como lo hacen normalmente las células. Debido a la falta de apoptosis, las mutaciones en el genoma celular tampoco desencadenan la muerte celular. Esto favorece la aparición de tumores. ^{[ 16 ]}

NS5A contiene un sitio de unión en el dominio 1, donde puede insertarse daclatasvir. Debido a la estructura simétrica y relacionada con los aminoácidos de daclatasvir, se producen interacciones de enlaces de hidrógeno entre daclatasvir y los aminoácidos del sitio de unión. Esto provoca una modificación estructural de NS5A, lo que conlleva una pérdida de acción y, como resultado, una inhibición de la formación de viriones. ^{[ 18 ]}

Al alterar la estructura de NS5A, se inhibe el reclutamiento de PI4KA y, por lo tanto, la acumulación de PI4P. Las nuevas gotas lipídicas y los componentes membranosos ya no pueden ser reclutados por PI4P en la red membranosa, y esta red deja de mantenerse. Sin embargo, es importante mencionar que daclatasvir no inhibe directamente PI4KA, ya que se observó que en las células tratadas con daclatasvir, PI4P aún está presente en la membrana plasmática y el aparato de Golgi. Daclatasvir tampoco inhibe la deslocalización inicial de PI4KA inducida por NS5A, puesto que se observó que daclatasvir no tuvo impacto en la función de NS5A en células que expresan únicamente NS5A. Es probable que daclatasvir simplemente inhiba las funciones de NS5A asociadas con otras proteínas dentro del complejo de replicación del VHC, como la ARN replicasa NS4B. En conclusión, se presume que daclatasvir solo inhibe la hiperacumulación de PI4P en el contexto de la expresión completa del polipéptido del VHC.

Este fenómeno está asociado con la estructura del dominio 1 de NS5A. Se observó que el dominio 1 presenta dos conformaciones diferentes. El daclatasvir se une a una de ellas y, como resultado, bloquea el dominio 1 en dicha conformación. Sin embargo, NS5A aún puede unirse a PI4KA, lo que podría explicar la función restante de NS5A en las células no infectadas mencionadas anteriormente. La segunda conformación del dominio 1, que aparece en las células no tratadas, probablemente esté asociada con la hiperacumulación de PI4P, necesaria para la formación y el mantenimiento del complejo de replicación y la red membranosa. Por lo tanto, PI4KA aún puede interactuar con NS5A, pero debido al bloqueo estructural, NS5A no puede activar PI4KA con la misma eficacia que en condiciones normales. ^{[ 17 ]}

La inhibición de la hiperacumulación de PI4P provoca el colapso de la red membranosa y la formación de grandes estructuras agregadas a partir de las proteínas del complejo de replicación. Además, NS5A parece deslocalizarse de la red membranosa a gotas lipídicas dentro del citosol. ^{[ 16 ]} Como resultado de esta observación, es probable que el complejo de replicación del VHC y las envolturas virales aún se formen, pero se vean gravemente afectadas por el tratamiento con daclatasvir. ^{[ 17 ]}

Además, se ha observado que el tratamiento de células infectadas por el VHC con daclatasvir provoca la ausencia de la forma hiperfosforilada de NS5A (p58). No está claro si la formación de p58 es inhibida directamente por el daclatasvir o si se trata simplemente de un efecto secundario. Sin embargo, es probable que la ausencia de p58 sea crucial para la inhibición del ensamblaje del virión. ^{[ 17 ]}

Daclatasvir alcanza el estado estacionario en sujetos humanos después de aproximadamente 4 días de administración oral de 60 mg una vez al día  , con una concentración máxima que ocurre aproximadamente 2 horas después de la administración. ^{[ 4 ]} Se presenta en forma de comprimido oral, con una biodisponibilidad del 67%. ^{[ 4 ]} Daclatasvir se metaboliza predominantemente por la enzima hepática CYP3A4 y también es un sustrato de P-gp . ^{[ 4 ]} Se une fuertemente a las proteínas . La unión a proteínas se midió en alrededor del 99% en personas que recibieron múltiples dosis de daclatasvir, independientemente de la potencia de la dosis. ^{[ 4 ]} Daclatasvir tiene un volumen de distribución de 47 L después de una dosis oral de 60  mg y una dosis IV de 100  μg. ^{[ 4 ]}

En diciembre de 2014, Bristol Myers Squibb anunció que ofrecería el medicamento a la venta a diferentes precios en distintos países, dependiendo del nivel de desarrollo económico, y que otorgaría licencias del medicamento a fabricantes de genéricos para su venta en el mundo en desarrollo. ^{[ 20 ] [ 21 ]}

En enero de 2016, un curso de doce semanas costaba alrededor de 63.000 dólares en EE. UU., alrededor de 39.000 dólares en el Reino Unido, alrededor de 37.000 dólares en Francia y 525 dólares en Egipto. ^{[ 22 ]}