Articulo de referencia

Trampa potenciadora

La técnica de trampa de potenciador es un método de biología molecular . El constructo de trampa de potenciador contiene un elemento transponible y un gen reportero . El primero...

La técnica de trampa de potenciador es un método de biología molecular . El constructo de trampa de potenciador contiene un elemento transponible y un gen reportero . El primero es necesario para la inserción (aleatoria) en el genoma, mientras que el segundo es necesario para la identificación de la regulación espacial ejercida por el potenciador. Además, el constructo suele incluir un marcador genético , por ejemplo, el gen mini- white , que restaura el color rojo de los ojos en Drosophila , o la resistencia a la ampicilina en E. coli .

Las trampas de potenciadores más comunes y básicas son P [ lacZ ], que utiliza el gen reportero lacZ de E. coli , y P [ GAL4 ], que utiliza el factor de transcripción GAL4 de levadura . Existe un gran número de cepas de moscas que contienen inserciones de GAL4 y un número igualmente grande de cepas de moscas que contienen una secuencia de ADN UAS seguida de un gen de interés, lo que permite la expresión de un gran número de genes con diferentes "controladores" GAL4. En lugar de generar moscas transgénicas con el potenciador vinculado directamente al gen de interés (lo que lleva aproximadamente un año si se parte sin la construcción de ADN adecuada), simplemente se cruza una mosca transgénica con otra. [ 1 ] [ 2 ] [ 3 ]

Mecanismo

Los elementos de trampa de potenciador colocan un gen reportero bajo un promotor mínimo, de modo que cuando una inserción se ubica cerca de un potenciador endógeno, el potenciador cercano puede impulsar la expresión del gen reportero. [ 4 ] Esto difiere de las trampas de genes, que normalmente utilizan casetes de aceptores de empalme y poliadenilación para reportar la inserción dentro de una unidad de transcripción en lugar de un detector de potenciador de promotor mínimo. [ 5 ]

Véase también

Referencias

  1. Andrea Brand y Norbert Perrimon (1993). Expresión génica dirigida como medio para alterar el destino celular y generar fenotipos dominantes. Development, 118, pp 401-415.
  2. DJ Finnegan (1992). Elementos transponibles. Current Opinion in Genetics and Development, 2, pp 861-867.
  3. JA Fischer, E. Giniger, T. Maniatis y M. Ptashne (1988). GAL4 activa la transcripción en Drosophila. Nature, 332, pp 853-856.
  4. Caza con trampas: Estrategias a nivel genómico para el descubrimiento de genes y el análisis funcional. Investigación del genoma / Cold Spring Harbor Laboratory Press. https://genome.cshlp.org/content/9/11/1019/F1.expansion.html
  5. Transferencia de tecnología de gusanos y moscas a vertebrados: manipulaciones genómicas basadas en transposición y sus perspectivas futuras. Genome Biology / Springer Nature. https://link.springer.com/article/10.1186/gb-2007-8-s1-s1?error=cookies_not_supported&code=300358b4-a3ea-4dde-8060-94eb7aff01d6