Enteromyxum leei

Enteromyxum leei es una especie de mixozoo , ^{[ 1 ]} parásito histozoico que infecta el tracto intestinal y, a veces, órganos asociados, como la vesícula biliar y el hígado, de varias especies de peces teleósteos. Los mixozoos son metazoos microscópicos, con un estilo de vida parasitario obligado. Las fases parasitarias de esta especie viven en el espacio paracelular entre los enterocitos de los peces. Es el agente causal de la enteromixosis, o enfermedad emaciante, también conocida como "síndrome de la cuchilla de afeitar" en peces espáridos. E. leei tiene un amplio rango de hospedadores y geográfico dentro de los peces marinos (al menos 60 especies de 22 familias diferentes, principalmente perciformes ), e incluso peces de agua dulce han sido infectados experimentalmente. E. leei surgió inicialmente en el Mediterráneo a finales de la década de 1980 y se cree que fue introducido involuntariamente en el Mar Rojo. ^{[ 2 ] [ 3 ]} Su patogenicidad e impacto económico dependen de la especie hospedadora. En la dorada , se manifiesta como una enfermedad crónica que provoca anorexia, retraso del crecimiento con pérdida de peso, caquexia , menor valor comercial y mayor mortalidad. En otras especies, no presenta signos clínicos. En la dorada de hocico afilado, la infección produce tasas de mortalidad muy elevadas, lo que ha llevado a los piscicultores a abandonar el cultivo de esta especie.

Enteromyxum leei fue descrito anteriormente como Myxidium leei , ^{[ 4 ]} y reportado inicialmente en dorada (GSB) ( Sparus aurata ) cultivada del sur de Chipre. La morfología de las mixosporas de este parásito difiere ligeramente de otras de la familia Myxiidae: las cápsulas polares se encuentran en el extremo y son alargadas en lugar de subesféricas (como en Myxidium ), pero se abren hacia un lado y sus forámenes no se encuentran en el plano sutural (como en Zschokkella); la línea sutural no divide la espora sino que es bastante ondulada y no alcanza las extremidades de la espora (como en muchas Zschokkella). Posteriormente, se formó una nueva combinación cuando se estableció el género Enteromyxum basándose en datos de biología molecular además de la morfología. ^{[ 5 ]} Hoy, el género consta de solo tres especies intestinales de huéspedes de peces marinos: E. leei , E. scopththalmi y E. fugu .

El ciclo de vida de los mixospóreos generalmente involucra dos huéspedes alternantes: peces y anélidos . Las mixosporas son ingeridas por los anélidos, en los cuales se producen actinosporas. Las actinosporas liberadas del anélido al agua llegan a un pez, penetran y las etapas de desarrollo migran hasta que llegan al sitio final de infección y se desarrollan en mixosporas. En contraste con este complejo ciclo de vida, se ha demostrado la transmisión espontánea y directa de pez a pez para E. leei y otras especies pertenecientes al género Enteromyxum en varios peces marinos. ^{[ 6 ]} La transmisión horizontal también ocurre a través de efluentes, cohabitación, y vías orales y anales. ^{[ 3 ] [ 7 ] [ 8 ] [ 9 ] [ 10 ] [ 11 ] [ 12 ] [ 13 ] [ 14 ]} Todos estos ensayos dependen de una fuente de peces infectados, ya que no se ha logrado el cultivo continuo in vitro de este parásito, como con cualquier otro Myxozoa.

Aunque es posible que este parásito mixospóreo también tenga un ciclo de vida indirecto que involucre a un huésped invertebrado en la naturaleza, dicho supuesto intermediario nunca se ha encontrado. Rangel et al. ^{[ 15 ]} encontraron una actinospora que infectaba al poliqueto marino Diopatra neapolitana en el estuario de Aveiro (Portugal) con una similitud del 81% con E. leei , pero hasta el momento no se ha encontrado ninguna dorada con E. leei en aguas portuguesas.

Las observaciones de campo comunes incluyen pérdida de apetito, bajas tasas de conversión de alimento y dificultades para alcanzar el tamaño comercial. Los signos clínicos de enteromixosis generalmente consisten en emaciación severa con atrofia muscular epaxial. Esta emaciación puede notarse externamente como un aspecto similar a un cuchillo o navaja. La emaciación se observa mejor en infecciones subcrónicas a temperaturas suaves, con peces muertos que generalmente parecen desnutridos (caquéxicos). La emaciación puede ser imperceptible en especies muy susceptibles y/o a altas temperaturas (por ejemplo, infecciones de D. puntazzo con E. leei ), porque los peces mueren antes de alcanzar la condición caquéxica. En la disección, los signos macroscópicos incluyen congestión focal intestinal y hemorragias, y puede aparecer frágil y semitransparente, a menudo lleno de líquido mucoso con depósitos reducidos de grasa perivisceral, órganos internos pálidos y ocasionalmente hígado verde. Las vesículas biliares agrandadas o de color anormal son comunes en algunos huéspedes (por ejemplo, D. puntazzo ).

La histopatología muestra la presencia de estadios mixozoarios ubicados entre los enterocitos, o libres en la luz con detritos en infecciones graves. Se desprenden cintas de epitelio que contienen estadios parasitarios. En infecciones avanzadas de GSB con E. leei, el intestino muestra hipertrofia de la lámina propia-submucosa y pérdida de la estructura de empalizada epitelial, junto con una intensa respuesta inflamatoria local. ^{[ 16 ] [ 17 ] [ 6 ]} Estos cambios intestinales afectan gravemente la absorción de nutrientes. La respuesta inflamatoria varía según el huésped. En general, las especies más susceptibles presentan una respuesta inflamatoria más marcada y el desprendimiento del epitelio ocurre antes en la infección.

El impacto de la enteromixosis depende de la especie de pez, la temperatura del agua y el tipo de instalaciones involucradas en los entornos de acuicultura. Este parásito ha provocado el abandono del cultivo de la dorada de hocico afilado (el huésped más susceptible) en algunas localidades de Italia y Grecia. ^{[ 18 ] [ 19 ]} E. leei constituye una amenaza para muchos otros espáridos cultivados, como la dorada de hocico afilado, Diplodus puntazzo ; ^{[ 20 ]} la dorada de manchas negras, Pagellus bogaraveo , ^{[ 21 ]} la dorada común, Pagrus pagrus , ^{[ 22 ]} y la dorada roja, Pagrus major . ^{[ 23 ]} Sin embargo, se desconoce el impacto económico a escala global.

La temperatura del agua es un factor de riesgo crítico en la transmisión y aparición de la enteromixosis. Se ha demostrado una clara relación entre la infección y la temperatura del agua. ^{[ 24 ] [ 14 ] [ 25 ]} La aparición de la enfermedad se retrasa considerablemente o incluso se suprime a bajas temperaturas (por debajo de 15  °C). Sin embargo, la infección puede permanecer latente durante el período más frío dentro de los peces y reaparecer cuando aumenta la temperatura del agua. ^{[ 24 ] [ 14 ]} Esto tiene importantes consecuencias epizootiológicas, ya que los falsos negativos (durante el invierno) son una fuente del parásito cuando aumentan las temperaturas del agua.

La enteromixosis se ha descrito en todo tipo de instalaciones de cultivo (tanques de hormigón/PVC, estanques de tierra, jaulas marinas). En las instalaciones terrestres de dorada, otros factores de riesgo o agravantes incluyen: (i) intercambio de agua deficiente y/o reingestión de agua residual contaminada; (ii) sistemas de recirculación; (iii) un período de cultivo prolongado necesario para la producción de peces grandes; ^{[ 26 ] [ 27 ]} y (iv) edad/tamaño de los peces al entrar en las jaulas marinas. ^{[ 28 ]} Otros autores consideraron que la enteromixosis está asociada con la sobrealimentación y el uso de dietas con alto contenido de grasa; ^{[ 19 ]} una dieta que contiene aceites vegetales como principal fuente de lípidos indujo un peor resultado de la enfermedad en GSB, ^{[ 29 ]} y un cambio de dietas herbívoras a carnívoras en acuarios de exhibición. ^{[ 30 ]} En todos los casos, el modo único de transmisión horizontal favorece la propagación de la enteromixosis en las poblaciones de peces cultivados.

La enteromixosis no puede diagnosticarse directamente a partir de los signos clínicos, ya que estos son inespecíficos. El diagnóstico confirmatorio generalmente consiste en la detección de esporas de Enteromyxum u otras fases proliferativas en frotis intestinales, ya sean frescos o teñidos con tinción de Diff-Quick o May-Grünwald-Giemsa. La detección de las fases de desarrollo en frotis frescos es difícil y requiere considerable experiencia. El examen de cortes histológicos del intestino es el procedimiento estándar, con la ayuda de algunas tinciones, como ácido peryódico de Schiff (PAS), Giemsa o azul de toluidina , o algunas lectinas. Sin embargo, cuando el parásito se encuentra en bajas cantidades o con una distribución irregular, la infección puede pasar desapercibida.

Más recientemente, se han utilizado sondas de oligonucleótidos para el diagnóstico de enteromixosis mediante PCR ^{[ 6 ] [ 24 ] [ 28 ] [ 31 ]} e hibridación in situ (ISH). ^{[ 32 ]} Se ha desarrollado un procedimiento de muestreo no letal para la detección por PCR de E. leei mediante la toma de muestras del recto con un hisopo de algodón. Este procedimiento ha sido validado frente a un método de referencia (observación histológica de todo el tracto digestivo), con una alta sensibilidad (0,96) y especificidad (Palenzuela, datos no publicados).

Actualmente no existen terapias aprobadas para E. leei .

La prevención es el principal objetivo para el control de E. leei . Una vez que el parásito se establece, generalmente solo se erradica con medidas agresivas que incluyen la eliminación de los peces infectados, la desinfección de tanques, jaulas marinas, el secado de estanques, etc.

Como este parásito no puede sobrevivir en agua dulce, se ha sugerido el tratamiento con hiposalinidad para controlar la infección en los peces payaso. ^{[ 33 ]} Se ha demostrado que algunos aditivos dietéticos reducen los niveles de infección y/o algunos signos de la enfermedad, como la pérdida de peso. ^{[ 34 ] [ 35 ]}

La mayor parte de la investigación realizada sobre este parásito se ha centrado en la dorada y, más recientemente, en el lenguado japonés ( Paralichthys olivaceus ). Los esfuerzos recientes en el marco del proyecto ParaFishControl ^{[ 36 ]} , financiado por la UE dentro del programa Horizonte 2020 , se han centrado en la obtención de datos transcriptómicos para encontrar candidatos a vacunas y dianas terapéuticas, descifrar la respuesta inmunitaria del huésped y encontrar posibles soluciones nutracéuticas . Además, se están realizando estudios epidemiológicos en la cuenca mediterránea para determinar el verdadero impacto de la enteromixosis y los factores del huésped/granja que potencian o mitigan su propagación. Un protocolo para el procedimiento estándar de transmisión de esta enteromixosis en condiciones experimentales formará parte de una guía que publicará 5M Publishing.

Con respecto a la respuesta inmune en la enteromixosis GSB, las inmunoglobulinas séricas, la lisozima , las peroxidasas y el complemento participan en la respuesta humoral, ^{[ 37 ] [ 38 ] [ 39 ] [ 40 ]} y las células B, las células T, los mastocitos y los melanomacrófagos actúan local y sistémicamente durante la respuesta inflamatoria. ^{[ 41 ]} La composición y expresión de la mucina, y la distribución de las células caliciformes secretoras de moco también se modulan durante la enteromixosis. La exposición crónica al parásito estimula la expresión génica relacionada con la señalización del interferón y el procesamiento y presentación de antígenos en el intestino de peces expuestos no parasitados, lo que puede indicar el desencadenamiento local de mecanismos de resistencia inmune contra la infección. ^{[ 42 ]} Un aumento en los centros de melanomacrófagos esplénicos durante la enteromixosis GSB también puede indicar el inicio de una respuesta inmune adquirida. ^{[ 41 ]} La expresión de interleucina (IL) durante la enteromixosis por GSB se modula de un perfil proinflamatorio a uno antiinflamatorio, y este cambio aparentemente está impulsado por la regulación positiva de il10 . ^{[ 43 ]} Más recientemente, se ha sugerido la participación de células T citotóxicas en la eliminación del parásito a partir de la mayor expresión de cd8 en intestinos de peces expuestos pero no parasitados. ^{[ 44 ]}