Ficoll

Ficoll es un polisacárido neutro, altamente ramificado, de alta masa e hidrofílico , sintetizado a partir de unidades repetitivas de sacarosa , que se disuelve fácilmente en soluciones acuosas . El radio de Ficoll oscila entre 2 y 7 nm. Se prepara mediante la reacción del polisacárido con epiclorhidrina . Ficoll es una marca registrada propiedad de GE Healthcare. ^{[ 1 ]} 

Ficoll forma parte de Ficoll-Paque, que se utiliza en laboratorios de biología para separar la sangre en sus componentes ( eritrocitos , leucocitos , etc.). Ficoll-Paque se coloca normalmente en el fondo de un tubo cónico, y la sangre se vierte lentamente sobre él. Tras la centrifugación , se observarán las siguientes capas en el tubo cónico, de arriba abajo: plasma y otros componentes, una capa de células mononucleares denominada capa leucocitaria ( PBMC /MNC), Ficoll-Paque, y eritrocitos y granulocitos , que deberían estar presentes en forma de sedimento. Esta separación facilita la obtención de PBMC. Cabe destacar que puede producirse cierta retención de glóbulos rojos (presencia de eritrocitos y granulocitos) en la capa de PBMC o Ficoll-Paque. En ocasiones, puede producirse una coagulación sanguínea importante en la capa de PBMC. El etilendiaminotetraacetato ( EDTA ) y la heparina se utilizan comúnmente junto con Ficoll-Paque(TM) para prevenir la coagulación y se utilizan como separador de células mononucleares.

En una época temprana de la investigación sobre el tratamiento de la diabetes mediante trasplante, se utilizó Ficoll para intentar separar los islotes de Langerhans del tejido pancreático humano digerido con enzimas (colagenasa). La teoría era que los islotes separados podrían utilizarse para el trasplante en pacientes con diabetes tipo 1. En la práctica, el uso de Ficoll dificultó la obtención de una preparación de islotes lo suficientemente pura, con una recuperación suficiente del tejido original, para un trasplante de islotes seguro y eficaz en humanos.

Debido a que la estratificación con Ficoll-Paque es un proceso muy lento, se han desarrollado dispositivos que facilitan el paso más laborioso: la superposición. Un ejemplo de ello es SepMate-50, ^{[ 2 ]} un tubo especializado que contiene un inserto poroso que forma una barrera física entre el Ficoll-Paque y la muestra de sangre. Esto permite pipetear rápidamente la muestra de sangre sobre el inserto, evitando la necesidad de superponerla directamente sobre el Ficoll-Paque. El inserto SepMate también reduce la duración de la centrifugación y, tras esta, la capa superior que contiene plasma y PBMC se puede verter en un tubo nuevo. ^{[ 3 ]} Otros dispositivos incluyen una columna que contiene una barrera porosa de polietileno de alta densidad o "frita". Estos productos permiten estratificar la sangre mucho más rápidamente sin mezclar polisacárido y sangre. Un ejemplo de este tipo de producto es el "Accuspin System Histopaque-1077" comercializado por Sigma Aldrich. El costo de este producto es significativamente mayor que el de los productos básicos Ficoll y Ficoll-Paque. También es posible incluir el sistema de separación Ficoll-Paque en el Vacutainer utilizado para la recolección de sangre. Estos Vacutainers aumentan la comodidad y la seguridad en la recolección de hemoderivados, pero cuestan 50 veces más que el Vacutainer básico.

• Percoll

• Manual de medios, metodología y aplicaciones para la separación celular. Archivado el 5 de diciembre de 2008 en Wayback Machine.