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Articulo de referencia

Paquete de gas

[ 1 ] Esta tabla muestra los pasos involucrados en el uso de un GasPak para crear un ambiente completamente anaeróbico para la incubación de una placa de agar inoculada. Después...

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[ 1 ] Esta tabla muestra los pasos involucrados en el uso de un GasPak para crear un ambiente completamente anaeróbico para la incubación de una placa de agar inoculada. Después de inocular la(s) placa(s) de agar con bacterias en condiciones asépticas, las placas de agar se colocan en un frasco anaeróbico que contiene componentes, como la cámara del catalizador, que ayudarán a facilitar la reacción para eliminar el oxígeno libre y proporcionar condiciones completamente anaeróbicas. La tira de azul de metileno es un indicador que se coloca en el frasco y que se vuelve incoloro en condiciones completamente anaeróbicas, lo que proporciona prueba de que el frasco pudo alcanzar con éxito un estado anaeróbico. Los componentes de la envoltura GasPak junto con la adición de agua, permiten el inicio de la reacción que tiene lugar en la cámara del catalizador. El frasco anaeróbico sellado se incuba luego a la temperatura deseada para permitir el crecimiento de las bacterias. En la figura anterior por ejemplo, la incubación se realizó a100°F (38°C). Una tira indicadora incolora demuestra que se han cumplido las condiciones anaeróbicas y que ahora se pueden observar las placas de agar para detectar el crecimiento bacteriano.  

Gas-pak es un método utilizado en la producción de un ambiente anaeróbico . Se utiliza para cultivar bacterias que mueren o no crecen en presencia de oxígeno ( anaerobios ).

Se trata de sobres desechables disponibles comercialmente que contienen un polvo seco o gránulos que, al mezclarse con agua y conservarse en un recipiente hermético del tamaño adecuado, generan una atmósfera libre de oxígeno elemental (O₂ ) . Se utilizan para producir cultivos anaeróbicos en microbiología . [ 2 ] [ 3 ] [ 4 ] Es una técnica mucho más sencilla que la del recipiente anaeróbico de McIntosh y Filde, donde es necesario bombear gases hacia dentro y hacia fuera.

Componentes de los sobres de gas-pak

  1. Borohidruro de sodio - NaBH₄
  2. Bicarbonato de sodio - NaHCO₃
  3. Ácido cítrico - C 3 H 5 O(COOH) 3
  4. Cloruro de cobalto - CoCl 2 (catalizador)

Puede ser necesario añadir un catalizador dicotiledóneo para iniciar la reacción.

Reacciones

  • NaBH 4 + 2 H 2 O = NaBO 2 + 4 H 2 ↑
  • C 3 H 5 O (COOH) 3 + 3 NaHCO 3 + [ CoCl 2 ] = C 3 H 5 O (COONa) 3 + 3 CO 2 + 3 H 2 + [ CoCl 2 ]
  • 2 H 2 + O 2 + [ Catalizador ] = 2 H 2 O + [ Catalizador ]

Consumo de oxígeno

Estos productos químicos reaccionan con el agua para producir hidrógeno y dióxido de carbono junto con citrato de sodio (C 3 H 5 O(COONa) 3 ) y agua como subproductos.. Nuevamente, el hidrógeno y el oxígeno reaccionan sobre un catalizador como la alúmina paladiumizada (suministrada por separado) para formar agua.

Método de cultivo

El medio de cultivo , la bolsita de gas (abierta y con agua añadida) y un indicador se colocan en un recipiente hermético para gas que se incuba a la temperatura deseada . El indicador revela si el ambiente estaba libre de oxígeno o no.

El indicador químico que se suele utilizar para este fin es la "solución química de azul de metileno ", que desde su síntesis nunca ha estado expuesta al oxígeno elemental. Al oxidarse en presencia de oxígeno atmosférico en el recipiente, adquiere un color azul intenso , pero se vuelve incolora cuando el oxígeno desaparece y se alcanzan condiciones anaeróbicas.

Referencias

  1. ↑ "Sistema GasPak (el recipiente anaeróbico)" . Laboratorios médicos . Consultado el 3 de diciembre de 2016 .
  2. ↑ Libro de texto de microbiología del Prof. CP Baveja, ISBN 81-7855-266-3
  3. ↑ Libro de texto de microbiología de Ananthanarayan y Panikar, ISBN 81-250-2808-0
  4. ↑ "GasPak Jar" . Archivado del original el 28 de septiembre de 2009. Consultado el 27 de octubre de 2009 ."Sistema GasPak". Consultado el 27 de octubre de 2009.