Gradiente de pH inmovilizado

En la química de reacciones ácido-base , los geles de gradiente de pH inmovilizado ( IPG ) son matrices de gel de acrilamida copolimerizadas con el gradiente de pH , lo que da como resultado gradientes completamente estables excepto para los valores de pH más alcalinos (>12). El gradiente de pH inmovilizado se obtiene mediante el cambio continuo en la proporción de Immobilinas . Una Immobilina es un ácido o base débil definido por su valor de pK. ^{[ 2 ]} Los gradientes de pH inmovilizados (IPG) se elaboran mezclando dos tipos de acrilamida, una con Immobilina con propiedades amortiguadoras ácidas y otra con propiedades amortiguadoras básicas. ^{[ 3 ]} Las concentraciones de los amortiguadores en las dos soluciones definen el rango y la forma del gradiente de pH producido. Ambas soluciones contienen monómeros de acrilamida y catalizadores. Durante la polimerización, la porción de acrilamida de los amortiguadores se copolimeriza con los monómeros de acrilamida y bisacrilamida para formar un gel de poliacrilamida. Estos geles polimerizados están reforzados con un soporte a base de plástico que facilita su manipulación y mejora el rendimiento de los IPG. El gel se lava posteriormente para eliminar los catalizadores y los monómeros no polimerizados , que interfieren con la separación isoeléctrica. La IPG aumentó la reproducibilidad ^{[ 4 ] [ 5 ]} del enfoque isoeléctrico y la electroforesis en gel 2D . Otras ventajas son una mayor resolución ^{[ 6 ]} , una separación reproducible de proteínas alcalinas ^{[ 7 ]} y una mayor capacidad de carga (hasta 10 mg) ^{[ 8 ] .} 

Este método alternativo elimina los problemas de inestabilidad del gradiente y la baja capacidad de carga de la muestra asociados con el gradiente de pH del anfolito portador . ^{[ 9 ]} Hay geles IPG prefabricados disponibles comercialmente.