Transferencia cromosómica mediada por microcélulas

La transferencia cromosómica mediada por microcélulas (o MMCT) es una técnica utilizada en biología celular y genética para transferir un cromosoma de una línea celular donante definida a una línea celular receptora. La MMCT se utiliza desde la década de 1970 y ha contribuido a multitud de descubrimientos, incluyendo genes supresores de tumores , metástasis y telomerasa , así como información sobre epigenética , inactivación del cromosoma X , función mitocondrial y aneuploidía . ^{[ 1 ] [ 2 ]} La MMCT sigue el procedimiento básico en el que las células donantes (es decir, las células que proporcionan uno o más cromosomas o fragmentos a una célula receptora) se inducen a multinuclear sus cromosomas. Estos núcleos se fuerzan a través de la membrana celular para crear microcélulas, que pueden fusionarse a una línea celular receptora. ^{[ 1 ]}

El término MMCT fue utilizado por primera vez por Fournier y Ruddle en 1977. ^{[ 3 ]} Su método se basó en trabajos previos de 1974 de Ege, Ringertz, Veomett y colegas, ^{[ 4 ] [ 5 ]} sintetizando las técnicas utilizadas en ese momento para inducir la multinucleación en células, la eliminación nuclear y las fusiones célula-célula. El siguiente paso importante en MMCT se produjo durante la década de 1980, cuando se utilizaron nuevas técnicas de transfección para introducir marcadores seleccionables en los cromosomas, lo que permitió seleccionar la introducción de cromosomas específicos y crear híbridos definidos con mayor facilidad . ^{[ 1 ]}

Los procedimientos para la MMCT difieren ligeramente, pero todos requieren: la inducción de multinucleación, la enucleación (eliminación del núcleo) y la fusión . La multinucleación generalmente se logra provocando una detención mitótica prolongada mediante el tratamiento con colcemida . Ciertas células se "deslizan" de la mitosis y forman múltiples núcleos. Estos núcleos se pueden eliminar utilizando citocalasina B para alterar el citoesqueleto y centrifugación en un gradiente de densidad para forzar la enucleación. Las microcélulas recién creadas se pueden fusionar con células receptoras (diana) mediante exposición a polietilenglicol, uso del virus Sendai o electrofusión. ^{[ 1 ] [ 6 ]}

Actualmente existen variaciones que permiten la construcción de ratones "humanizados" con grandes fragmentos de cromosomas humanos ^{[ 7 ]} , así como nuevos métodos para cromosomas artificiales humanos y de ratón ^{[ 8 ] .}