célula mononuclear de sangre periférica

Una célula mononuclear de sangre periférica ( PBMC ) es cualquier célula sanguínea periférica que posee un núcleo redondo . ^{[ 1 ]} Estas células están compuestas por linfocitos ( células T , células B , células NK ) y monocitos , mientras que los eritrocitos y las plaquetas carecen de núcleo, y los granulocitos ( neutrófilos , basófilos y eosinófilos ) poseen núcleos multilobulados. En los seres humanos, los linfocitos constituyen la mayor parte de la población de PBMC, seguidos por los monocitos y solo un pequeño porcentaje de células dendríticas. ^{[ 2 ]}

Estas células se pueden extraer de la sangre total utilizando Ficoll , un polisacárido hidrofílico que separa las capas de la sangre, y centrifugación en gradiente, ^{[ 3 ]} que separa la sangre en una capa superior de plasma, seguida de una capa de PBMC (capa leucocitaria) y una fracción inferior de células polimorfonucleares (como neutrófilos y eosinófilos) y eritrocitos. Las células polimorfonucleares se pueden aislar aún más mediante la lisis de los glóbulos rojos. En ocasiones, se encuentran basófilos tanto en la fracción más densa como en la de PBMC. ^{[ 3 ]}

El método de aislamiento más común para obtener células mononucleares de sangre periférica (PBMC) es la centrifugación en gradiente de densidad. Sin embargo, existen varios métodos alternativos que se utilizan en investigación, como los tubos de preparación celular (CPT), la separación en roseta y la clasificación basada en microesferas inmunomagnéticas. Cada técnica mencionada se utiliza según el tipo de investigación que se realice y todas difieren en los niveles de pureza, el tiempo de procesamiento y la recuperación de PBMC. ^{[ 4 ]}

Muchos científicos que realizan investigaciones en los campos de la inmunología (incluidos los trastornos autoinmunes ), las enfermedades infecciosas , las neoplasias hematológicas , el desarrollo de vacunas , la inmunología de trasplantes y el cribado de alto rendimiento utilizan frecuentemente las células mononucleares de sangre periférica (PBMC). En muchos casos, las PBMC se obtienen de bancos de sangre . La fracción de PBMC también contiene poblaciones de células progenitoras, como demuestran los ensayos de formación de colonias basados ​​en metilcelulosa.

Las PBMC se utilizan ampliamente en la investigación biológica, ya que incluyen una gran parte de las células inmunitarias innatas y adaptativas presentes en el organismo. Estas células son relativamente fáciles de obtener mediante la extracción de muestras de sangre y pueden utilizarse para comprender cómo actúan las PBMC en diferentes entornos y así entender mejor su función. Mediante estos estudios, los investigadores pueden comprender mejor las respuestas inmunitarias al cáncer, las enfermedades, las respuestas autoinmunes y los efectos de tratamientos o terapias experimentales. ^{[ 11 ]}

Una vez aisladas las PBMC de la sangre mediante centrifugación en gradiente y separación con Ficoll , pueden cultivarse y conservarse mediante criopreservación para diversos ensayos de investigación. Algunos de estos experimentos incluyen el seguimiento de la reacción de las PBMC a diferentes estímulos inmunitarios, como lipopolisacáridos , fitohemaglutinina , concanavalina A y mitógeno de pokeweed . Los efectos de estos experimentos se determinan mediante cambios en la expresión génica, la producción de linfocitos y la revisión de las citocinas liberadas por las PBMC. ^{[ 11 ]}

Se ha considerado que las células mononucleares de sangre periférica (PBMC) constituyen una vía importante para la vacunación. Las PBMC de pacientes con cáncer pueden extraerse y cultivarse in vitro . Posteriormente, se exponen a las PBMC a antígenos tumorales , como el antígeno de células madre tumorales. Generalmente, se añaden citocinas inflamatorias para facilitar la captación y el reconocimiento del antígeno por parte de las PBMC.

Debido a que las PBMC contienen células inmunitarias importantes, se utilizan ampliamente en la investigación para comprender cómo responde el sistema inmunitario a diferentes enfermedades y vacunas. Durante los estudios de investigación, las PBMC se pueden aislar mediante centrifugación en gradiente de densidad para separarlas de las demás células sanguíneas presentes. ^{[ 11 ]}