Articulo de referencia

Fedebás

Phadebas es un sustrato bioquímico sintético que se utiliza para la evaluación tanto cualitativa como cuantitativa de la enzima α-amilasa . Su componente activo es DSM-P, microe...

Phadebas es un sustrato bioquímico sintético que se utiliza para la evaluación tanto cualitativa como cuantitativa de la enzima α-amilasa . Su componente activo es DSM-P, microesferas en las que se ha unido químicamente un colorante azul. Cuando la enzima amilasa digiere el sustrato en solución, libera ese colorante azul a una velocidad proporcional a la cantidad de enzima presente. Se utiliza en una variedad de aplicaciones, desde pruebas de control de calidad para alimentos y bebidas hasta la detección de manchas de saliva en investigaciones forenses. [1]

Historia

El "Phadebas Amylase Test" (PAT) fue el primer producto desarrollado por Pharmacia Diagnostics y se lanzó en 1970. [2] El nombre Phadebas es una abreviatura de Pharmacia Diagnostics Biologically Active Substances. [ cita requerida ] En los años 70, PAT se utilizó en hospitales de todo el mundo como una prueba de diagnóstico in vitro para pancreatitis aguda, pero la aplicación fue superada más tarde por los sistemas de análisis automáticos. [ cita requerida ] PAT ya no se comercializa para el mercado de IVD y ya no mantiene su certificado CE. [ cita requerida ] Aunque la aplicación original ha desaparecido, el producto todavía se utiliza como agente colorante en algunos ensayos clínicos. [3] Phadebas no juega un papel activo en el diagnóstico posterior en estos ensayos. [ cita requerida ] El método semimanual de Phadebas demostró funcionar en otras aplicaciones fuera del mercado de IVD. [ cita requerida ] El método fue adoptado por los laboratorios forenses y por la industria alimentaria y química. En 2005, la empresa fue adquirida por Magle Life Sciences y en 2007 se lanzó Phadebas Forensic como primera diversificación dentro de la familia de productos. [ cita requerida ] Tres años más tarde, se lanzó Phadebas Honey Diastase Test, lo que dio como resultado un total de ocho productos en la cartera de Phadebas. [ cita requerida ]

Aplicaciones

Phadebas se utiliza en una amplia gama de aplicaciones, desde pruebas de control de calidad de alimentos y bebidas hasta la detección de manchas de saliva en investigaciones forenses .

Investigación y calidad

La PAT se utiliza para determinar con precisión la α-amilasa para una amplia variedad de aplicaciones industriales y académicas, por ejemplo: [4]

  • α-amilasa de detergentes
  • Investigación y desarrollo biotecnológico (por ejemplo, excreción bacteriana de amilasa)
  • Aplicaciones en odontología
  • Reactivo para el diagnóstico clínico de la pancreatitis
  • Productos químicos especiales

Ciencias forenses

La prueba de prensa forense Phadebas se utiliza como una prueba presuntiva para la saliva . [5] Phadebas se puede utilizar para encontrar saliva como fuente de ADN o para identificar el origen de una mancha. La prueba se realiza colocando papel atado con el sustrato Phadebas sobre una muestra y aplicando presión. [5] Es un método más sensible y selectivo para identificar manchas de saliva que las fuentes de luz alternativas , ya que estas manchas no fluorescen fuertemente y pueden confundirse con otros fluidos biológicos como el semen. [6] La prueba puede considerarse selectiva para la saliva, ya que la actividad de la α-amilasa en la saliva es típicamente varios órdenes de magnitud mayor que en otros fluidos corporales. [7] Un estudio ha demostrado que hasta el 40% de las manchas de saliva en las prendas pasan desapercibidas cuando se utilizan fuentes de luz alternativas. [8] La prueba es capaz de localizar depósitos de saliva con poca dependencia de la porosidad del sustrato. [6]

Especificidad de la saliva

Existen otras sustancias corporales que pueden dar positivo en la prueba de alfa-amilasa de Phadebas Forensic Press. Algunos ejemplos son las heces, [5] [9] el semen, [9] [6] la orina [10] [6] y las lágrimas. [6] Aunque existe la posibilidad de falsos positivos de otras fuentes de amilasa, las instrucciones de uso publicadas por Phadebas Forensic establecen que ningún otro fluido biológico forense relevante (con excepción de las heces) reaccionará en los 10 minutos siguientes a la realización de la prueba. [5] También se ha demostrado que ciertos detergentes sin diluir pueden causar una reacción positiva cuando se prueban con la prueba de amilasa de Phadebas. [11] La prueba no es específica para humanos; es sensible a la saliva de otras especies, a la amilasa de microbios como Baccilus y a extractos de ciertas plantas, como la manzana y la col. [12]

Alimenticio

La prueba se utiliza para determinar la α-amilasa en una amplia variedad de aplicaciones alimentarias, por ejemplo en alimentos y bebidas:

Según la Directiva de la UE sobre la miel, [13] la actividad de la diastasa es un criterio de composición que debe determinarse para las mieles destinadas al consumo humano. Los métodos de análisis oficiales para la determinación de la actividad de la diastasa en la miel son el ensayo de Schade y el ensayo de Phadebas, recomendados por la Comisión Internacional de la Miel. [14] Como este método se basa en ecuaciones fijas en lugar de una curva estándar , se desarrolló el nuevo ensayo de diastasa de miel Phadebas para garantizar resultados estables independientemente del lote. [15]

Referencias

  1. ^ Sitio web oficial
  2. ^ Sitio web oficial
  3. ^ "Kit de electroforesis de isoenzimas de isoamilasa amilasa".
  4. ^ Prueba de amilasa de Phadebas - Química e investigación - Actividad de amilasa en detergentes, textiles y biotecnología Archivado el 18 de marzo de 2012 en Wayback Machine Phadebas.com
  5. ^ abcd "Examen forense de elementos para detectar la presencia de saliva" (PDF) . Phadebas.com . Consultado el 12 de abril de 2022 .
  6. ^ abcde Wornes, Danielle J.; Speers, Samuel J.; Murakami, Julie A. (julio de 2018). "La evaluación y validación del papel Phadebas® como herramienta de detección presuntiva de saliva en elementos forenses". Forensic Science International . 288 : 81–88. doi :10.1016/j.forsciint.2018.03.049. ISSN  0379-0738. PMID  29734053. S2CID  13663095.
  7. ^ PH Whitehead; Ann E. Kipps (1975). "Un papel de prueba para detectar manchas de saliva". J. Forens. Sci. Soc . 15 (1): 39–42. doi :10.1016/S0015-7368(75)70934-9. PMID  1159385.
  8. ^ Fiedler et al, Detección de semen y saliva con un sistema de detección de rayos UV de máxima intensidad (Lumatec Superlite 400), 59.ª Reunión Anual de la AAFS, San Antonio, febrero de 2007
  9. ^ ab Olsén, Eva-Lena; Edenberger, Erika; Mattsson, Marianne; Ansell, Ricky (1 de diciembre de 2011). "Prueba Phadebas® Forensic Press y presencia de amilasas en fluidos corporales depositados naturalmente sobre textiles". Forensic Science International: Genetics Supplement Series . 3 (1): e155–e156. doi : 10.1016/j.fsigss.2011.08.078 . ISSN  1875-1768.
  10. ^ Casey, David G.; Price, Judy (30 de enero de 2010). "La sensibilidad y especificidad del kit RSID™-saliva para la detección de amilasa salival humana en el Laboratorio de Ciencias Forenses, Dublín, Irlanda". Forensic Science International . 194 (1): 67–71. doi :10.1016/j.forsciint.2009.10.009. ISSN  0379-0738. PMID  19931992.
  11. ^ Feia, Andrea; Novroski, Nicole (enero de 2013). "La evaluación de posibles falsos positivos con detergentes al realizar pruebas serológicas de amilasa en la ropa". Revista de Ciencias Forenses . 58 : S183–S185. doi :10.1111/j.1556-4029.2012.02267.x. PMID  22946767. S2CID  39779556.
  12. ^ Pang, Benjamin CM; Cheung, Bobbie KK (28 de agosto de 2008). "Aplicabilidad de dos kits disponibles comercialmente para la identificación forense de manchas de saliva". Revista de Ciencias Forenses . 53 (5): 1117–1122. doi :10.1111/j.1556-4029.2008.00814.x. PMID  18637870. S2CID  205767620.
  13. ^ Directiva 2001/110/CE del Consejo, de 20 de diciembre de 2001, relativa a la miel
  14. ^ Métodos armonizados de la Comisión Internacional de la Miel (2009)
  15. ^ Prueba de diastasa de miel de Phadebas - Actividad de diastasa en miel Archivado el 31 de enero de 2013 en archive.today Phadebas.com
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