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Articulo de referencia

Pseudotipado

La pseudotipificación es el proceso de producir virus o vectores virales en combinación con proteínas de envoltura viral extrañas . El resultado es una partícula viral pseudotip...

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La pseudotipificación es el proceso de producir virus o vectores virales en combinación con proteínas de envoltura viral extrañas . El resultado es una partícula viral pseudotipificada, también llamada pseudovirus . [ 1 ] Con este método, las proteínas de envoltura viral extrañas pueden usarse para alterar el tropismo del huésped o aumentar o disminuir la estabilidad de las partículas virales. Las partículas pseudotipificadas no portan el material genético para producir proteínas de envoltura viral adicionales, por lo que los cambios fenotípicos no pueden transmitirse a las partículas virales descendientes. En algunos casos, la incapacidad de producir proteínas de envoltura viral hace que el pseudovirus sea incapaz de replicarse . De esta manera, las propiedades de los virus peligrosos pueden estudiarse en un entorno de menor riesgo. [ 2 ]

La pseudotipificación permite controlar la expresión de las proteínas de la envoltura. Una proteína frecuentemente utilizada es la glicoproteína G (VSV-G) del virus de la estomatitis vesicular (VSV), que media la entrada a través del receptor LDL . Las proteínas de la envoltura incorporadas al pseudovirus permiten que el virus entre fácilmente en diferentes tipos de células con el receptor huésped correspondiente .

Desarrollo de vacunas

El virus pseudotipado puede usarse para vacunar animales contra proteínas expresadas en la envoltura del virión. [ 3 ] Este enfoque se ha utilizado para producir candidatos a vacunas contra el VIH , [ 3 ] henipavirus Nipah , [ 2 ] lisavirus de la rabia , [ 4 ] SARS-CoV , [ 5 ] virus del Ébola de Zaire , [ 6 ] y SARS-CoV-2 . [ 7 ] El virus de la estomatitis vesicular recombinante-virus del Ébola de Zaire (rVSV-ZEBOV) fue creado por la Agencia de Salud Pública de Canadá (PHAC) y actualmente está autorizado en la Unión Europea y Estados Unidos para la prevención de la enfermedad por virus del Ébola (EVE) causada por el virus del Ébola de Zaire .

Pruebas serológicas

Los virus pseudotipados, especialmente aquellos que portan un gen de luciferasa recombinante (rLuc), pueden utilizarse para evaluar si un tratamiento protege a las células huésped de la infección. [ 8 ] Por ejemplo, se extrae sangre de un animal con inmunidad serológica a un virus. Se genera un pseudovirus independiente con una proteína de envoltura del virus al que el animal es inmune. El pseudovirus se modifica genéticamente para que contenga un gen de luciferasa. Al mezclar la sangre extraída del animal con el pseudovirus, los anticuerpos protectores se unen y neutralizan la proteína de envoltura introducida. En cultivos celulares , los pseudovirus neutralizados no infectarán las células ni producirán el producto del gen reportero luminiscente. Al analizar las muestras de cultivo celular que contienen un inhibidor eficaz del virus, se observará una luminiscencia reducida. [ 4 ]

Referencias

  1. ↑ Ejemplo para el desarrollo de vectores retrovirales de pseudotipo en un grupo de trabajo del MHH. Archivado el 8 de noviembre de 2009 en Wayback Machine.
  2. 1 2 Nie, Jianhui; Liu, Lin; Wang, Qing; Chen, Ruifeng; Ning, hormigueo; Liu, Qiang; Huang, Weijin; Wang, Youchun (19 de febrero de 2019). "El sistema de pseudovirus Nipah permite la evaluación de vacunas in vitro e in vivo utilizando instalaciones que no son BSL-4" . Microbios e infecciones emergentes . 8 (1): 272– 281. doi : 10.1080/22221751.2019.1571871 . ISSN 2222-1751 . PMC 6455126 . PMID 30866781 .   
  3. 1 2 Racine, Trina; Kobinger, Gary P. ; Arts, Eric J. (2017-09-12). "Desarrollo de una vacuna contra el VIH utilizando un vector de virus de estomatitis vesicular que expresa glicoproteínas de envoltura del VIH-1 diseñadas para mejorar las respuestas humorales" . AIDS Research and Therapy . 14 (1): 55. doi : 10.1186/s12981-017-0179-2 . ISSN 1742-6405 . PMC 5594459 . PMID 28893277 .   
  4. ^ Möschler , Sarah; Locher, Samira; Conzelmann, Karl-Klaus; Krämer, Beate; Zimmer, Gert (16 de septiembre de 2016). "Cuantificación de anticuerpos neutralizantes del lisavirus mediante partículas de pseudotipo del virus de la estomatitis vesicular" . Virus . 8 (9): 254. doi : 10.3390/v8090254 . ISSN 1999-4915 . PMC 5035968 . PMID 27649230 .   
  5. ↑ Kapadia, Sagar U.; Simon, Ian D.; Rose, John K. (2008-06-20). "La vacuna contra el SARS basada en un virus de estomatitis vesicular recombinante defectuoso en la replicación es más potente que una basada en un vector competente para la replicación" . Virology . 376 ( 1): 165– 172. doi : 10.1016/j.virol.2008.03.002 . ISSN 0042-6822 . PMC 7103385. PMID 18396306 .   
  6. ↑ Salata, Cristiano; Calistri, Arianna; Alvisi, Gualtiero; Celestino, Michele; Parolin, Cristina; Palù, Giorgio (2019-03-19). "Entrada del virus del Ébola: de la caracterización molecular al descubrimiento de fármacos" . Viruses . 11 ( 3): 274. doi : 10.3390/v11030274 . ISSN 1999-4915 . PMC 6466262. PMID 30893774 .   
  7. ↑ Johnson, Marc C.; Lyddon, Terri D.; Suarez, Reinier; Salcedo, Braxton; LePique, Mary; Graham, Maddie; Ricana, Clifton; Robinson, Carolyn; Ritter, Detlef G. (2020-10-14). "Condiciones de pseudotipado optimizadas para la glicoproteína Spike del SARS-CoV-2" . Journal of Virology . 94 (21). doi : 10.1128/JVI.01062-20 . ISSN 0022-538X . PMC 7565639. PMID 32788194 .   
  8. ↑ Carnell, George William; Ferrara, Francesca; Grehan, Keith; Thompson, Craig Peter; Temperton, Nigel James (2015-04-29). "Ensayos de neutralización basados ​​en pseudotipos para la influenza: un análisis sistemático" . Frontiers in Immunology . 6 : 161. doi : 10.3389/fimmu.2015.00161 . ISSN 1664-3224 . PMC 4413832. PMID 25972865 .   
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