Hispanopedia WikiLa pseudotipificación es el proceso de producir virus o vectores virales en combinación con proteínas de envoltura virales extrañas . El resultado es una partícula viral pseudotipada, también llamada pseudovirus . [1] Con este método, las proteínas de envoltura virales extrañas se pueden utilizar para alterar el tropismo del huésped o aumentar o disminuir la estabilidad de las partículas virales. Las partículas pseudotipadas no llevan el material genético para producir proteínas de envoltura viral adicionales, por lo que los cambios fenotípicos no se pueden transmitir a las partículas virales de la progenie. En algunos casos, la incapacidad de producir proteínas de envoltura viral hace que la replicación del pseudovirus sea incompetente . De esta manera, las propiedades de los virus peligrosos se pueden estudiar en un entorno de menor riesgo. [2]
La seudotipificación permite controlar la expresión de las proteínas de la envoltura. Una proteína que se utiliza con frecuencia es la glucoproteína G (VSV-G) del virus de la estomatitis vesicular (VSV), que media la entrada a través del receptor LDL . Las proteínas de la envoltura incorporadas al pseudovirus permiten que el virus entre fácilmente en diferentes tipos de células con el receptor huésped correspondiente .
Desarrollo de vacunas
El virus pseudotipado se puede utilizar para vacunar animales contra proteínas expresadas en la envoltura del virión. [3] Este enfoque se ha utilizado para producir vacunas candidatas contra el VIH , [3] el henipavirus Nipah , [2] el lisavirus de la rabia , [4] el SARS-CoV , [5] el ébolavirus de Zaire , [6] y el SARS-CoV-2 . [7] El virus de la estomatitis vesicular recombinante-virus del ébola de Zaire (rVSV-ZEBOV) fue creado por la Agencia de Salud Pública de Canadá (PHAC) y actualmente está autorizado en la Unión Europea y los Estados Unidos para la prevención de la enfermedad por el virus del Ébola (EVE) causada por el ébolavirus de Zaire .
Pruebas serológicas
Los virus pseudotipados, especialmente los virus pseudotipados que portan un gen de luciferasa recombinante (rLuc), se pueden utilizar para probar si un tratamiento puede proteger a las células huésped de la infección. [8] Por ejemplo, se extrae sangre de un animal con inmunidad serológica a un virus. Se genera un pseudovirus separado con una proteína de envoltura del virus al que el animal tiene inmunidad. El pseudovirus se modifica adicionalmente para que contenga un gen para la luciferasa. Cuando la sangre extraída del animal se mezcla con el pseudovirus, los anticuerpos protectores se unen y neutralizan la proteína de envoltura introducida. En el cultivo celular , se evitará que los pseudovirus neutralizados infecten las células y produzcan el producto del gen reportero luminiscente. Cuando se analizan las muestras de cultivo celular donde está presente un inhibidor eficaz del virus tendrán luminiscencia reducida. [4]
Referencias
- ^ Ejemplo de desarrollo de vectores retrovirales pseudotipo en un grupo de trabajo del MHH Archivado el 8 de noviembre de 2009 en Wayback Machine.
- ^ ab Nie, Jianhui; Liu, Lin; Wang, Qing; Chen, Ruifeng; Ning, Tingting; Liu, Qiang; Huang, Weijin; Wang, Youchun (19 de febrero de 2019). "El sistema de pseudovirus Nipah permite la evaluación de vacunas in vitro e in vivo utilizando instalaciones que no son BSL-4". Emerging Microbes & Infections . 8 (1): 272–281. doi :10.1080/22221751.2019.1571871. ISSN 2222-1751. PMC 6455126 . PMID 30866781.
- ^ ab Racine, Trina; Kobinger, Gary P. ; Arts, Eric J. (12 de septiembre de 2017). "Desarrollo de una vacuna contra el VIH utilizando un vector del virus de la estomatitis vesicular que expresa glicoproteínas de envoltura del VIH-1 de diseño para mejorar las respuestas humorales". Investigación y terapia del SIDA . 14 (1): 55. doi : 10.1186/s12981-017-0179-2 . ISSN 1742-6405. PMC 5594459 . PMID 28893277.
- ^ ab Moeschler, Sarah; Locher, Samira; Conzelmann, Karl-Klaus; Krämer, Beate; Zimmer, Gert (16 de septiembre de 2016). "Cuantificación de anticuerpos neutralizantes del lisavirus mediante partículas de pseudotipo del virus de la estomatitis vesicular". Virus . 8 (9): 254. doi : 10.3390/v8090254 . ISSN 1999-4915. PMC 5035968 . PMID 27649230.
- ^ Kapadia, Sagar U.; Simon, Ian D.; Rose, John K. (2008-06-20). "La vacuna contra el SARS basada en un virus de la estomatitis vesicular recombinante con replicación defectuosa es más potente que una basada en un vector con capacidad de replicación". Virology . 376 (1): 165–172. doi :10.1016/j.virol.2008.03.002. ISSN 0042-6822. PMC 7103385 . PMID 18396306.
- ^ Salata, Cristiano; Calistri, Arianna; Alvisi, Gualtiero; Celestino, Michele; Parolin, Cristina; Palù, Giorgio (19 de marzo de 2019). "Entrada al virus del Ébola: de la caracterización molecular al descubrimiento de fármacos". Viruses . 11 (3): 274. doi : 10.3390/v11030274 . ISSN 1999-4915. PMC 6466262 . PMID 30893774.
- ^ Johnson, Marc C.; Lyddon, Terri D.; Suarez, Reinier; Salcedo, Braxton; LePique, Mary; Graham, Maddie; Ricana, Clifton; Robinson, Carolyn; Ritter, Detlef G. (14 de octubre de 2020). "Condiciones de pseudotipificación optimizadas para la glicoproteína de la espícula del SARS-COV-2". Revista de Virología . 94 (21). doi : 10.1128/JVI.01062-20 . ISSN 0022-538X. PMC 7565639 . PMID 32788194.
- ^ Carnell, George William; Ferrara, Francesca; Grehan, Keith; Thompson, Craig Peter; Temperton, Nigel James (29 de abril de 2015). "Ensayos de neutralización basados en pseudotipos para la influenza: un análisis sistemático". Frontiers in Immunology . 6 : 161. doi : 10.3389/fimmu.2015.00161 . ISSN 1664-3224. PMC 4413832 . PMID 25972865.